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P203 Impact de la dénutrition et importance de la qualité des lipides du régime de renutrition sur les acides gras et le risque inflammatoire du rat âgé
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Nutrition clinique et métabolisme 27 (2013) S57–S175 / Cahiers de nutrition et de diététique 48 (2013) S57–S175
téines solubles de lait, apparaît comme une piste intéressante pour le maintien des performances motrices et en particulier de Mots clés : Caséine, protéines solubles de lait, viande, muscle squelettique, contraction, force, rat, sarcopénie, la masse musculaire.
P202 Amélioration par le resvératrol des dommages artériels liés au vieillissement : rôle de TXNIP T. Bédarida1,*, S. Baron1,2, F. Vibert 1, E. Thioulouse3, J.-L. Beaudeux1,4, C.-H. Cottart1,4, V. Nivet1,5 1 Équipe Viva – EA 4466, Faculté de Pharmacie, Université Paris Descartes, Sorbonne Paris Cité, 2Service de Physiologie, Hôpital Européen Georges Pompidou, AP-HP, 3 Laboratoire de Biochimie, Hôpital Trousseau, AP-HP, 4 Service de biochimie, Hôpital Necker, AP-HP, 5 Service de biochimie, Hôpital Européen Georges Pompidou, APHP, Paris, France Introduction et but de l’étude. – Actuellement, la proportion de personnes de plus de 80 ans augmente. Ces personnes polypathologiques souffrent fréquemment d’intolérance au glucose ou de maladies cardio-vasculaires, connues pour être la première cause de mortalité chez les personnes âgées. Nous nous sommes particulièrement intéressés à la protéine Txnip (Thioredoxin-interacting protein) aussi appelée VDUP (Vitamin D3-upregulated protein), car elle semble être à l’interface entre le stress oxydant et le métabolisme glucidique, tous deux dérégulés avec l’âge. En effet, elle est nécessaire à la synthèse du glucose et est l’inhibiteur de la thioredoxine, un puissant système enzymatique antioxydant. En outre, lors d’une récente étude, des effets bénéfiques du resvératrol, une phytoalexine ayant des effets anti-inflammatoires et anti-oxydants via l’activation des sirtuines, ont été montrés sur l’insulino-résistance développée avec l’âge ainsi que sur TXNIP dans un contexte de stress oxydant. Le but de l’étude est de déterminer les voies impliquées dans l’amélioration par le resvératrol des dommages artériels liés au vieillissement. Matériel et méthodes. – Notre étude a été réalisée sur modèle murin de C57/Bl6 âgées de 9 et 25 mois (n = 20-30/groupes), traité ou non par du resvératrol pendant 12 semaines. Les données expérimentales obtenues regroupent une exploration fonctionnelle par échodoppler, ainsi qu’une étude moléculaire des facteurs impliqués dans l’inflammation, le stress oxydant, la calcification et le remodelage matriciel. Résultats. – Nous avons montré que le resvératrol permettait de reverser l’insulino-résistance et d’améliorer l’hypertrophie et la dilation aortique lié au vieillissement sans modifier la pression sanguine. Le vieillissement artériel est associé à une calcification médiale, cependant le resvératrol n’agit pas par cette voie. Il a, néanmoins, tendance à diminuer stress oxydant chez les souris âgées. La transcription de TXNIP, notamment, est fortement régulée par le resvératrol et sous forme protéique, TXNIP est présent en moins grande quantité dans le noyau lors du traitement au resvératrol, témoignant d’une réduction de l’état de stress des cellules. Conclusion. – La diminution du taux de transcription de TXNIP et sa localisation cytosolique induite par le resvératrol, corrélées à la diminution du stress oxydant, pourrait être à l’origine de l’amélio-
ration de la dysfonction endothéliale, couplée à une amélioration de l’insulino-résistance. Ces résultats place TXNIP au cœur de la corrélation entre la dérégulation du stress oxydant et du métabolisme glucidique.
P203 Impact de la dénutrition et importance de la qualité des lipides du régime de renutrition sur les acides gras et le risque inflammatoire du rat âgé B. Delplanque1,*, H. Ould Hamouda1, C. Rosique2, C. Bonhomme3, P. Le Ruyet3, Y. Rolland4, M. Taouis1, J.-C. Martin2 1 NMPA, CNPS, Université Paris Sud, Orsay, 2 INRA1260, Université Aix Marseille, Marseille, 3 Lactalis Nutrition Santé, Torcé, 4 Pôle Gériatrie, CHU, Toulouse, France Introduction et but de l’étude. – La dénutrition est très fréquente dans la population humaine âgée et s’accompagne de nombreuses pathologies. Nous avons évalué l’impact de la dénutrition et de la renutrition apportant différentes qualités de lipides sur la composition des acides gras (AG) plasmatiques du rat âgé. Matériel et méthodes. – Quatre groupes de 6 rats âgés (24 m) ont été soumis à des régimes apportant : C groupe Contrôle : protéines 14 %, glucides 74 %, lipides 4 % (huile de soja 8 % ALA18:3n-3, 53 % LA18:2n-6) D groupe Dénutri pendant 3mois : régime contrôle limité à 50 % de la consommation ad libitum (12gvs24g/j) Deux groupes dénutris puis restaurés 1m ad libitum avec des régimes à 6 % de lipides soit : R1 : huile de soja R2 : mélange de Matière Grasse Laitière (MGLA)/Colza apportant 4,9 % ALA, 10 % LA, supplémenté en DHA. Résultats. – Le régime lipidique contrôle apporte 0,08 g/j d’ALA, qui se réduit à 0,04 g/j en période de dénutrition pour remonter à 0,12 g/j en période de restauration R1(Soja) et à 0,07 g/ j en période de restauration R2(MGLA/Colza/DHA). Le ratio n-6/ n-3 (LA/ALA) passe de 6,6 (C,D,R1) à 2,1 (R2) Impact de la dénutrition : Réduction des AG plasmatiques n-3 : ALA (– 45 % p < 0,01) et dérivés LCn-3 (– 20 % p < 0,05), alors que la série n-6 (LA et dérivé AA : arachidonique20:4n-6) est très faiblement augmentée, majorant le ratio AA/EPA pro-aggrégant/pro-inflammatoire de 2,5 fois (p < 0,02). Impact de la renutrition : Le régime de renutrition R1 (Soja) restaure les valeurs des AG de la série n-3 à des niveaux comparables aux contrôles, à l’exception du DHA qui reste inférieur (– 22 % p < 0,05), même inférieur au DHA en fin de dénutrition. La série n-6 et la situation pro-inflammatoire (AA/EPA) sont revenues aux valeurs contrôles. Le régime de renutrition R2 (MGLA/Colza/DHA) restaure les valeurs d’ALA et celles des dérivés LCn-3 à des niveaux supérieurs à ceux observés chez les contrôles, ou en fin de dénutrition, ou après restauration par le soja (+300% pour EPA p < 0,001 et +20 % à 40 % pour DHA p < 0,002). Les valeurs de la série n-6 sont réduites (– 24 % LA et – 33 % AA p < 0,001). La situation pro-inflammatoire de dénutrition est donc régulée et le ratio AA/EPA ou AA/ LCn-3 est très inférieur à celui des vieux rats contrôles (divisé par 5, p < 0,001).
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Conclusion. – Une dénutrition non carencée en ALA chez le rat âgé, induit une perte spécifique et conséquente des omega3 (ALA et dérivés LCn-3) et conduit à un état pro-inflammatoire exprimé sous la forme d’une augmentation AA/EPA. Cet état pro-inflammatoire est régulé après renutrition riche en ALA (R1 : soja), mais ne permet pas de retrouver des valeurs de DHA d’avant dénutrition. En revanche, l’utilisation de MGLA/Colza/DHA (R2) induit en 1 mois une augmentation très importantes des dérivés LCn-3 (EPA, DHA), qui, associée à une baisse des n-6 (LA et AA) conduit à un statut pro-inflammatoire bien inférieur à celui observé généralement chez les vieux rats et pourrait donc avoir un impact favorable sur le vieillissement. ANR-ALIA-2010-01306-Présage
NUTRITION EN PHYSIOPATHOLOGIE ET PATHOLOGIE : MALADIES CHRONIQUES P204 La glutamine peut elle restaurer l’expression des protéines de jonctions serrées au cours du syndrome de l’intestin irritable à prédominance diarrhéique ? J. Bertrand1,2,*, C. Bôle-Feysot1,2, C. Guérin1,2, M. Gouteux1,2, P. Déchelotte1,2,3, P. Ducrotté1,2,4, M. Coëffier1,2,3 1 INSERM UMR1073, 2Institut de recherche et d’innovation biomédicale, Université de Rouen, 3 Unité de Nutrition, 4 Département de Gastroentérologie, CHU, Rouen, France Introduction et but de l’étude. – Des études récentes ont montré une augmentation de la perméabilité intestinale au cours du syndrome de l’intestin irritable à prédominance diarrhéique (SII-D), ainsi qu’une diminution de l’expression des protéines de jonctions serrées1,2. La glutamine, substrat préférentiel des cellules à division rapide, est capable de moduler la perméabilité intestinale et l’expression de ces protéines de jonctions serrées dans différents modèles expérimentaux. Le but de cette étude a donc été d’évaluer ex vivo les effets de la glutamine sur l’expression des protéines des jonctions serrées, occludine et claudine-1, au niveau de la muqueuse colique de patients SII-D. Matériel et méthodes. – Quatorze patients SII-D répondant aux critères de Rome III ont été inclus (9 F / 5H, 41,4 ± 4,8 ans). Des biopsies coliques ont été prélevées et immédiatement mises en culture en présence de doses croissantes de glutamine : 0,6 (concentration plasmatique physiologique), 2, 5 et 10 mmol/L. Après 18 heures de cultures, les biopsies ont été congelées ainsi que le milieu de culture. L’expression des protéines des jonctions serrées, occludine et claudine-1, a été mesurée par western blot et la concentration des cytokines IL-1β, IL-2, IL-4, IL-5, IL-6, IL-8, IL-12, TNFα et IFNγ a été mesurée dans le milieu par la technologie multiplex. Les résultats, exprimés en moyenne ± sem, ont été comparés par ANOVA pour séries appariées et des post-tests de Bonferroni, p < 0,05 étant considéré comme le seuil de significativité. Résultats. – L’expression de la claudine-1 était augmentée par les doses croissantes de glutamine (0,47 ± 0,04 à 10 mM vs 0,33 ± 0,03 à 0,6 mM, p < 0,05). L’expression de l’occludine n’était pas modifiée par
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la glutamine. Cependant, l’effet de la glutamine était négativement corrélé à l’expression de l’occludine (Pearson r = – 0,84, p = 0,0005) ou de la claudine-1 (Pearson r = – 0,83, p = 0,0007), suggérant que la glutamine a des effets plus marqués lorsque l’expression des protéines de jonctions serrées est faible. La glutamine ne modifiait pas la concentration des cytokines dans le milieu de culture. Conclusion. – Notre étude montre que la glutamine augmente l’expression de la protéine claudine-1 chez des patients SII-D sans modifier l’expression de l’occludine. Néanmoins, l’effet de la glutamine semble être dépendant de l’expression basale de la claudine1 et de l’occludine. Des travaux complémentaires sont actuellement en cours pour mieux comprendre les effets de la glutamine. Référencesþ: 1. Zhou et al., Gut 2010;59:775-784. 2. Bertiaux-Vandaele et al., Am J Gastroenterol 2011;106:2165-2173.
P205 La glutamine régule le niveau d’ubiquitination de deux protéines de stress, Grp-75 et hsp74, au niveau duodénal chez le volontaire sain J. Bertrand1,2,*, A. Goichon1,2, P. Chan2,3, S. Azhar1,2, S. Lecleire1,2,4, N. Donnadieu5, D. Vaudry2,3,6, P. Déchelotte1,2,7, A.-F. Cailleux2,8, M. Coëffier1,2,7 1INSERM UMR1073, 2Institut de recherche et d’innovation biomédicale, Université de Rouen, Rouen, 3 Plateforme de Protéomique, PISSARO, Mont Saint Aignan, 4 Département de Gastroentérologie, 5 Département de Pharmacie, CHU, Rouen, 6 INSERM UMR982, Université de Rouen, Mont Saint Aignan, 7 Unité de Nutrition, 8 CIC 0204, CHU, Rouen, France Introduction et but de l’étude. – La glutamine, substrat préférentiel des cellules à division rapide, a des effets protecteurs au niveau intestinal dans diverses situations physiopathologiques. Le système ubiquitine-protéasome qui régule la dégradation de nombreuses protéines, est impliqué dans la régulation de nombreux processus cellulaires. Or, il a été décrit que la glutamine modifiait la dégradation de l’inhibiteur du facteur de transcription NF-kB par le protéasome en régulant le processus d’ubiquitination (1, 2). Cependant les effets de la glutamine sur le processus d’ubiquitination d’autres protéines restent méconnus. Le but de cette étude était donc de rechercher les protéines dont le taux d’ubiquitination était modifié par la glutamine au niveau intestinal chez l’homme. Matériel et méthodes. – Cinq volontaires sains (26,8 ± 10 ans, 22,5 ± 1,6 kg.m-2) ont reçu pendant 5 heures lors de 2 épreuves séparées d’au moins 2 semaines et réalisées dans un ordre aléatoire soit une perfusion entérale d’une solution de maltodextrines (0,25 g.kg-1.h-1) soit de maltodextrines supplémentées avec de la glutamine (0,117 g.kg-1.h-1). Après 5 heures, des biopsies endoscopiques duodénales ont été prélevées et immédiatement congelées. L’expression des protéines ubiquitinées a été analysée par une approche protéomique combinant une électrophorèse bidimensionnelle et un immunoblot dirigé contre l’ubiquitine. Après analyse des variations d’ubiquitination (basée sur un ratio d’expression R > 1,5), les protéines d’intérêt ont été identifiées par spectromé-
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téines solubles de lait, apparaît comme une piste intéressante pour le maintien des performances motrices et en particulier de Mots clés : Caséine, protéines solubles de lait, viande, muscle squelettique, contraction, force, rat, sarcopénie, la masse musculaire.
P202 Amélioration par le resvératrol des dommages artériels liés au vieillissement : rôle de TXNIP T. Bédarida1,*, S. Baron1,2, F. Vibert 1, E. Thioulouse3, J.-L. Beaudeux1,4, C.-H. Cottart1,4, V. Nivet1,5 1 Équipe Viva – EA 4466, Faculté de Pharmacie, Université Paris Descartes, Sorbonne Paris Cité, 2Service de Physiologie, Hôpital Européen Georges Pompidou, AP-HP, 3 Laboratoire de Biochimie, Hôpital Trousseau, AP-HP, 4 Service de biochimie, Hôpital Necker, AP-HP, 5 Service de biochimie, Hôpital Européen Georges Pompidou, APHP, Paris, France Introduction et but de l’étude. – Actuellement, la proportion de personnes de plus de 80 ans augmente. Ces personnes polypathologiques souffrent fréquemment d’intolérance au glucose ou de maladies cardio-vasculaires, connues pour être la première cause de mortalité chez les personnes âgées. Nous nous sommes particulièrement intéressés à la protéine Txnip (Thioredoxin-interacting protein) aussi appelée VDUP (Vitamin D3-upregulated protein), car elle semble être à l’interface entre le stress oxydant et le métabolisme glucidique, tous deux dérégulés avec l’âge. En effet, elle est nécessaire à la synthèse du glucose et est l’inhibiteur de la thioredoxine, un puissant système enzymatique antioxydant. En outre, lors d’une récente étude, des effets bénéfiques du resvératrol, une phytoalexine ayant des effets anti-inflammatoires et anti-oxydants via l’activation des sirtuines, ont été montrés sur l’insulino-résistance développée avec l’âge ainsi que sur TXNIP dans un contexte de stress oxydant. Le but de l’étude est de déterminer les voies impliquées dans l’amélioration par le resvératrol des dommages artériels liés au vieillissement. Matériel et méthodes. – Notre étude a été réalisée sur modèle murin de C57/Bl6 âgées de 9 et 25 mois (n = 20-30/groupes), traité ou non par du resvératrol pendant 12 semaines. Les données expérimentales obtenues regroupent une exploration fonctionnelle par échodoppler, ainsi qu’une étude moléculaire des facteurs impliqués dans l’inflammation, le stress oxydant, la calcification et le remodelage matriciel. Résultats. – Nous avons montré que le resvératrol permettait de reverser l’insulino-résistance et d’améliorer l’hypertrophie et la dilation aortique lié au vieillissement sans modifier la pression sanguine. Le vieillissement artériel est associé à une calcification médiale, cependant le resvératrol n’agit pas par cette voie. Il a, néanmoins, tendance à diminuer stress oxydant chez les souris âgées. La transcription de TXNIP, notamment, est fortement régulée par le resvératrol et sous forme protéique, TXNIP est présent en moins grande quantité dans le noyau lors du traitement au resvératrol, témoignant d’une réduction de l’état de stress des cellules. Conclusion. – La diminution du taux de transcription de TXNIP et sa localisation cytosolique induite par le resvératrol, corrélées à la diminution du stress oxydant, pourrait être à l’origine de l’amélio-
ration de la dysfonction endothéliale, couplée à une amélioration de l’insulino-résistance. Ces résultats place TXNIP au cœur de la corrélation entre la dérégulation du stress oxydant et du métabolisme glucidique.
P203 Impact de la dénutrition et importance de la qualité des lipides du régime de renutrition sur les acides gras et le risque inflammatoire du rat âgé B. Delplanque1,*, H. Ould Hamouda1, C. Rosique2, C. Bonhomme3, P. Le Ruyet3, Y. Rolland4, M. Taouis1, J.-C. Martin2 1 NMPA, CNPS, Université Paris Sud, Orsay, 2 INRA1260, Université Aix Marseille, Marseille, 3 Lactalis Nutrition Santé, Torcé, 4 Pôle Gériatrie, CHU, Toulouse, France Introduction et but de l’étude. – La dénutrition est très fréquente dans la population humaine âgée et s’accompagne de nombreuses pathologies. Nous avons évalué l’impact de la dénutrition et de la renutrition apportant différentes qualités de lipides sur la composition des acides gras (AG) plasmatiques du rat âgé. Matériel et méthodes. – Quatre groupes de 6 rats âgés (24 m) ont été soumis à des régimes apportant : C groupe Contrôle : protéines 14 %, glucides 74 %, lipides 4 % (huile de soja 8 % ALA18:3n-3, 53 % LA18:2n-6) D groupe Dénutri pendant 3mois : régime contrôle limité à 50 % de la consommation ad libitum (12gvs24g/j) Deux groupes dénutris puis restaurés 1m ad libitum avec des régimes à 6 % de lipides soit : R1 : huile de soja R2 : mélange de Matière Grasse Laitière (MGLA)/Colza apportant 4,9 % ALA, 10 % LA, supplémenté en DHA. Résultats. – Le régime lipidique contrôle apporte 0,08 g/j d’ALA, qui se réduit à 0,04 g/j en période de dénutrition pour remonter à 0,12 g/j en période de restauration R1(Soja) et à 0,07 g/ j en période de restauration R2(MGLA/Colza/DHA). Le ratio n-6/ n-3 (LA/ALA) passe de 6,6 (C,D,R1) à 2,1 (R2) Impact de la dénutrition : Réduction des AG plasmatiques n-3 : ALA (– 45 % p < 0,01) et dérivés LCn-3 (– 20 % p < 0,05), alors que la série n-6 (LA et dérivé AA : arachidonique20:4n-6) est très faiblement augmentée, majorant le ratio AA/EPA pro-aggrégant/pro-inflammatoire de 2,5 fois (p < 0,02). Impact de la renutrition : Le régime de renutrition R1 (Soja) restaure les valeurs des AG de la série n-3 à des niveaux comparables aux contrôles, à l’exception du DHA qui reste inférieur (– 22 % p < 0,05), même inférieur au DHA en fin de dénutrition. La série n-6 et la situation pro-inflammatoire (AA/EPA) sont revenues aux valeurs contrôles. Le régime de renutrition R2 (MGLA/Colza/DHA) restaure les valeurs d’ALA et celles des dérivés LCn-3 à des niveaux supérieurs à ceux observés chez les contrôles, ou en fin de dénutrition, ou après restauration par le soja (+300% pour EPA p < 0,001 et +20 % à 40 % pour DHA p < 0,002). Les valeurs de la série n-6 sont réduites (– 24 % LA et – 33 % AA p < 0,001). La situation pro-inflammatoire de dénutrition est donc régulée et le ratio AA/EPA ou AA/ LCn-3 est très inférieur à celui des vieux rats contrôles (divisé par 5, p < 0,001).
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Conclusion. – Une dénutrition non carencée en ALA chez le rat âgé, induit une perte spécifique et conséquente des omega3 (ALA et dérivés LCn-3) et conduit à un état pro-inflammatoire exprimé sous la forme d’une augmentation AA/EPA. Cet état pro-inflammatoire est régulé après renutrition riche en ALA (R1 : soja), mais ne permet pas de retrouver des valeurs de DHA d’avant dénutrition. En revanche, l’utilisation de MGLA/Colza/DHA (R2) induit en 1 mois une augmentation très importantes des dérivés LCn-3 (EPA, DHA), qui, associée à une baisse des n-6 (LA et AA) conduit à un statut pro-inflammatoire bien inférieur à celui observé généralement chez les vieux rats et pourrait donc avoir un impact favorable sur le vieillissement. ANR-ALIA-2010-01306-Présage
NUTRITION EN PHYSIOPATHOLOGIE ET PATHOLOGIE : MALADIES CHRONIQUES P204 La glutamine peut elle restaurer l’expression des protéines de jonctions serrées au cours du syndrome de l’intestin irritable à prédominance diarrhéique ? J. Bertrand1,2,*, C. Bôle-Feysot1,2, C. Guérin1,2, M. Gouteux1,2, P. Déchelotte1,2,3, P. Ducrotté1,2,4, M. Coëffier1,2,3 1 INSERM UMR1073, 2Institut de recherche et d’innovation biomédicale, Université de Rouen, 3 Unité de Nutrition, 4 Département de Gastroentérologie, CHU, Rouen, France Introduction et but de l’étude. – Des études récentes ont montré une augmentation de la perméabilité intestinale au cours du syndrome de l’intestin irritable à prédominance diarrhéique (SII-D), ainsi qu’une diminution de l’expression des protéines de jonctions serrées1,2. La glutamine, substrat préférentiel des cellules à division rapide, est capable de moduler la perméabilité intestinale et l’expression de ces protéines de jonctions serrées dans différents modèles expérimentaux. Le but de cette étude a donc été d’évaluer ex vivo les effets de la glutamine sur l’expression des protéines des jonctions serrées, occludine et claudine-1, au niveau de la muqueuse colique de patients SII-D. Matériel et méthodes. – Quatorze patients SII-D répondant aux critères de Rome III ont été inclus (9 F / 5H, 41,4 ± 4,8 ans). Des biopsies coliques ont été prélevées et immédiatement mises en culture en présence de doses croissantes de glutamine : 0,6 (concentration plasmatique physiologique), 2, 5 et 10 mmol/L. Après 18 heures de cultures, les biopsies ont été congelées ainsi que le milieu de culture. L’expression des protéines des jonctions serrées, occludine et claudine-1, a été mesurée par western blot et la concentration des cytokines IL-1β, IL-2, IL-4, IL-5, IL-6, IL-8, IL-12, TNFα et IFNγ a été mesurée dans le milieu par la technologie multiplex. Les résultats, exprimés en moyenne ± sem, ont été comparés par ANOVA pour séries appariées et des post-tests de Bonferroni, p < 0,05 étant considéré comme le seuil de significativité. Résultats. – L’expression de la claudine-1 était augmentée par les doses croissantes de glutamine (0,47 ± 0,04 à 10 mM vs 0,33 ± 0,03 à 0,6 mM, p < 0,05). L’expression de l’occludine n’était pas modifiée par
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la glutamine. Cependant, l’effet de la glutamine était négativement corrélé à l’expression de l’occludine (Pearson r = – 0,84, p = 0,0005) ou de la claudine-1 (Pearson r = – 0,83, p = 0,0007), suggérant que la glutamine a des effets plus marqués lorsque l’expression des protéines de jonctions serrées est faible. La glutamine ne modifiait pas la concentration des cytokines dans le milieu de culture. Conclusion. – Notre étude montre que la glutamine augmente l’expression de la protéine claudine-1 chez des patients SII-D sans modifier l’expression de l’occludine. Néanmoins, l’effet de la glutamine semble être dépendant de l’expression basale de la claudine1 et de l’occludine. Des travaux complémentaires sont actuellement en cours pour mieux comprendre les effets de la glutamine. Référencesþ: 1. Zhou et al., Gut 2010;59:775-784. 2. Bertiaux-Vandaele et al., Am J Gastroenterol 2011;106:2165-2173.
P205 La glutamine régule le niveau d’ubiquitination de deux protéines de stress, Grp-75 et hsp74, au niveau duodénal chez le volontaire sain J. Bertrand1,2,*, A. Goichon1,2, P. Chan2,3, S. Azhar1,2, S. Lecleire1,2,4, N. Donnadieu5, D. Vaudry2,3,6, P. Déchelotte1,2,7, A.-F. Cailleux2,8, M. Coëffier1,2,7 1INSERM UMR1073, 2Institut de recherche et d’innovation biomédicale, Université de Rouen, Rouen, 3 Plateforme de Protéomique, PISSARO, Mont Saint Aignan, 4 Département de Gastroentérologie, 5 Département de Pharmacie, CHU, Rouen, 6 INSERM UMR982, Université de Rouen, Mont Saint Aignan, 7 Unité de Nutrition, 8 CIC 0204, CHU, Rouen, France Introduction et but de l’étude. – La glutamine, substrat préférentiel des cellules à division rapide, a des effets protecteurs au niveau intestinal dans diverses situations physiopathologiques. Le système ubiquitine-protéasome qui régule la dégradation de nombreuses protéines, est impliqué dans la régulation de nombreux processus cellulaires. Or, il a été décrit que la glutamine modifiait la dégradation de l’inhibiteur du facteur de transcription NF-kB par le protéasome en régulant le processus d’ubiquitination (1, 2). Cependant les effets de la glutamine sur le processus d’ubiquitination d’autres protéines restent méconnus. Le but de cette étude était donc de rechercher les protéines dont le taux d’ubiquitination était modifié par la glutamine au niveau intestinal chez l’homme. Matériel et méthodes. – Cinq volontaires sains (26,8 ± 10 ans, 22,5 ± 1,6 kg.m-2) ont reçu pendant 5 heures lors de 2 épreuves séparées d’au moins 2 semaines et réalisées dans un ordre aléatoire soit une perfusion entérale d’une solution de maltodextrines (0,25 g.kg-1.h-1) soit de maltodextrines supplémentées avec de la glutamine (0,117 g.kg-1.h-1). Après 5 heures, des biopsies endoscopiques duodénales ont été prélevées et immédiatement congelées. L’expression des protéines ubiquitinées a été analysée par une approche protéomique combinant une électrophorèse bidimensionnelle et un immunoblot dirigé contre l’ubiquitine. Après analyse des variations d’ubiquitination (basée sur un ratio d’expression R > 1,5), les protéines d’intérêt ont été identifiées par spectromé-