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γ-Glutamyltyramine de Tephrosia noctiflora
Phytochemistry, 1980, Vol. 19, pp. 122551226. @ PergamonPress Ltd. Printedin England.
0031-9422/80/0601-1225
$02.00/O
SHORT REPORTS
y-GLUTAMYLTYRAMINE P. * Centre
de Recherches t Laboratoire
TEPHROSIA
DE
FORGACS,*
T.
des Laboratoires Roger des Plantes Mtdicinales,
SEVENET?
NOCTIFLORA
et A. JEHANNO*
Bellon, 90 rue Marcel Bourdarias, 94140-Alfortville, Montravel, B.P.1264, NoumCa, Nouvelle-Caltdonie
France;
(ReuisP requ le 19 octobre 1979) Key Word Index-Tephrosia glutamyltyramine; tryptophan;
noctiflora; tyramine;
Leguminosae;
INTRODUCllON
Les parties akriennes de Tephrosia noctiflora Boj. Lkgumineuse de Nouvelle-CalCdonie, CtudiCe ici pour la premikre fois, renferment la y-glutamyl tyramine, nouvel amide & partir d’une plante. RdSULTATS
ET DISCUSSION
Les tiges feuillkes de Tephrosia noctiflora Boj. sont broyces, puis infuskes dans l’eau distill&e. Aprks filtration, la solution est pass&e sur une colonne de rCsine adsorbante apolaire type XAD2. Le lavage de la colonne & l’eau distillke, permettant d’kliminer un ballast constituk entre autres de sucres et de sels mintraux, est suivi d’une Clution des produits adsorb& sur rCsine k l’aide d’une solution hydro-alcoolique. On obtient ainsi une fraction qui, amenCe ?I set, donne une poudre de couleur chamois. Une ttude chimique montre la prksence de flavonosides et d’amino acides.
HO-f \t
non-protein
amino acids; y-glutamylamide;
y-
tyrosine.
L’hydrolyse acide de ce composk men&e dans HCl (N) conduit au bout d’une heure & reflux, done trbs rapidement, & l’apparition en CCM de deux spots identifits g la tyramine et h I’acide glutamique (identification confirm&e par passage de l’hydrolysat sur auto analyseur Technicon. Ce comportement est la prkomption de l’existence d’une liaison trks labile type y-glutamyl amide et non d’une liaison peptidique habituelle. L’ester mkthylique prCparC classiquement & partir de l’acide (MeOH-HCl, 2 hr) montre en spectromktrie de masse les fragments caractkristiques: M’ 280, pits 2 m/e 221 (M-CO,Me), 161 &H,-C~-(CH~),144 (CO+-(CH,),-CH-CH-(NH)-CO,Me) (NH)-CO,Me), et les autres pits attendus & m/e 121, 120, 108, 107. Nous proposons pour le composk isolC la structure de y-glutamyltyramine ou L-glutamine, N-2-(4 hydroxylphbnyl)kthyl (1).
R
CH,-CH,-NH-C-CH,-CH,-YH-COOH
\--/
IGH,
L’ktude de ces derniers par chromatographie couche mince, indique l’existence d’un spot se rCvClant rouge vif g la ninhydrine aprks chauffage. La comparaison avec des amino acides de rCfCrence, ainsi que la rCvClation colorke inhabituelle pouvaient faire penser B un amino acide original. La fraction provenant de l’klution XAD2 a done ttk pas&e sur une rCsine Cchangeuse d’ions type IR 120 H‘ afin d’kliminer les flavonosides. Aprbs lavage de la colonne & l’eau entrainant les flavonosides non fix&, l’klution par une solution d’ammoniaque conduit ?I l’obtention d’une fraction brute riche en amino acides. Sur l’extrait set de celle-ci, les reprises successives par l’kthanol puis le mCthano1 a reflux permettent d’enrichir en un produit Ce dernier peut-&tre cristallisk dans un inconnu. mklange eau-propanol.
RCcemment en biologie animale, la y-glutamylation enzymatique d’amines dans le cerveau du rat, aprks leurs injections intraventriculaires, a ttC observke par Tsuji et al. [l], notamment avec la tyramine. Nous signalons que nous n’avons pas trouvC ce produit dans les espkces telles que Tephrosia purpurea, T. candida.
PARTIE
EXPkRIMENTALE
La plante a ttC r&colt&e en septembre 1975 sur les pentes en Nouvelle-Caltdonie par T. SCvenet du Montravel, (RBfBrence herbier, SBvenet 1065). Les spectres UV ont 6th dtterminis en solution dans HCI, les IR ont 6tt enregistrks dans le KBr, les points de fusion ont Bt6 pris au Kafler
1225
1226
Short Reporta
(CorrlgCsJ. Les spectres de masse ont +5ti effectuCs avec I’appareil type MS-9. Les pouvoirs rotatoires ant &tt! mesurts dans HCI sur polarimktre Jobin-Yvon. type Rourgogne II. Exfracriottr L’I stpurufions. 1,2S ky de tiger feuilltes sent broy& ct infus&s dans 7.5 I. d’HZO houillante. A@ esso~age ct ringage la phase aqueuse est pass& SUI- colonnr d’Amherlitc XADl 16 x 90 cm). On law la colonne par 7 I. d’H,O distill&. La dCsorption des produns fix& se fait par de I‘EtOH 5 SO% 13 I.1 La soln hydroalcoolique est &apor& a see et le r&idu 30 g repris dans 300 ml d’HZO est pass6 sur rb\inc /\rnhcrlttc IR 120 H’ (2.5 x 60 cm). Apr’:s labagc par 3 I. de MeOH a 50%~. on Clue par 3 I. de NH,OH (N). Cette soln ammoniacale donne -1,3 g d‘extrait sec. Les reprises B reflux success~vcs par EtOH (5.1250 ml) puis MeOH (Sx 200 ml) j rcfiux montrent dam les fractions lb3 (&OH) la prCsence dc tryptophane (R, 0.-16), tyramine (K, 0,47), tyrosinc CR, 0,33) ainsi que d’un spot de R, 0.26 rouge vlf lors de la rPvdlation par la ninhydrint: [II] apr& chauffage B
Phyrochemistry,
1980. Vol. 19. pp. 1226-l 227. 0
DEPENDENCE THE LEAF
130”. La CCM est effect&e \UI gel de Si Alec’ lc mClange Cluant EtOAc-MeCOEt-HCC),H-H,O (5 : .?.1: 11.LCSfractions 4 et 5 (EtOH) et 1-S (MeOH tr& I-iclw en product se rCvClant rouge sont rbunies et concentr& B LCC(7% mg). La reprise $ 80” par le m~langc PI-OHGH,O (I(1 :9OI iaisae cristalliser 600 mg d‘un produit qui Jorme urw tachc en <‘CM (RI 0.76). F. 21X-21’)‘. (Analy\c: Trouv;: (‘. 58.63: f1. 6.97; N. 10.61. Rksultat calculi pour C‘,,H,,NZO,,: (‘. 5X.6.1; H. 18’ t HCI N. c I I: Spectra UV: 6,81; N. 10.52%). [a];;‘AEiiY nm (10s ~1: 230 i3.S). 2x0 1.1.231. Spcctw IR: NHCO B 16~0cm ‘. BIBLIOGRAPHIE
M.. Matsuoka, Y. et Neurochern. 29, 633. 2. Fahmy, R. A. ct Niedcr\\icser. Acta 44, 2022. I. T’suji,
Nakajima,
‘I‘. (1977)
1.
A. (1961 J FfpfLr. (‘hinz
Pergamon Press Ltd. Printed in England.
OF THE HYDROCARBON CONSTITUENTS OF WAXES OF KHAYA SPECIES ON LEAF AGE 0.
0.
P. F/\ROYA,
Department
Key Word Index-Khclytr:
J. I.
of Chemistry,
leaf waxes:
G1.C:
OKOGLJN
University
and
D.
of Ihadan.
R.
GOIDDARI)
Ihadan.
Nigeria
alkanes. --_-
Abstract-The hydrocarbon constituents taxonomic purposes using GLC. The leaf n-alkanes were in the range of C2, to C;,, percentage composition of the n-alkane lcaves having n-C,, as the most abundant
--______
of the leaf waxes of eight species of Khccycl were analysed for waxes contained neither isoalkanes nor alkenes and the bulk of the odd-carbon number compounds predominating. It was found that the constituents of the leaf waxes varied with the age of leaves. young alkane, whereas older leaves had n-Ci,.
_
INTRODUCTION
Trees of the Meliaceae have received much attention from chemists [l] and a large number of compounds have been isolated [2-A]. The distribution of these compounds form a pattern common to the family [ 11. ‘The object of the present work was to examine the chemotaxonomic importance of aikancs in the leaf waxes of eight species of Khccycl. We also wished to examine whether there was any variation in the alkane composition of the waxes and the age of the leaves.
RESULTS
AND
1XSCUSSIO.N
Eight species of Khqct growing on the campus of the University of Ibadan were chosen for the investigation These were k’hcly~r s~~~cgc~lensia. K. ~~n~hothrc.tr (Uganda), K. ctnrhotlwcct (C;hana), K. icorenai,s, K. grandifoliola (Uganda). K. rtytcsiccl (amani), K. k;rctr+ difoliolu (Ife I and K. rnc[tln~tr.sc,ltriurlci,~. During a preliminary investigation it was found that the hydrocarbon composition of the leaf waxes \ aried with the age of the Icavc\ (viable I I. In both casts,
0031-9422/80/0601-1225
$02.00/O
SHORT REPORTS
y-GLUTAMYLTYRAMINE P. * Centre
de Recherches t Laboratoire
TEPHROSIA
DE
FORGACS,*
T.
des Laboratoires Roger des Plantes Mtdicinales,
SEVENET?
NOCTIFLORA
et A. JEHANNO*
Bellon, 90 rue Marcel Bourdarias, 94140-Alfortville, Montravel, B.P.1264, NoumCa, Nouvelle-Caltdonie
France;
(ReuisP requ le 19 octobre 1979) Key Word Index-Tephrosia glutamyltyramine; tryptophan;
noctiflora; tyramine;
Leguminosae;
INTRODUCllON
Les parties akriennes de Tephrosia noctiflora Boj. Lkgumineuse de Nouvelle-CalCdonie, CtudiCe ici pour la premikre fois, renferment la y-glutamyl tyramine, nouvel amide & partir d’une plante. RdSULTATS
ET DISCUSSION
Les tiges feuillkes de Tephrosia noctiflora Boj. sont broyces, puis infuskes dans l’eau distill&e. Aprks filtration, la solution est pass&e sur une colonne de rCsine adsorbante apolaire type XAD2. Le lavage de la colonne & l’eau distillke, permettant d’kliminer un ballast constituk entre autres de sucres et de sels mintraux, est suivi d’une Clution des produits adsorb& sur rCsine k l’aide d’une solution hydro-alcoolique. On obtient ainsi une fraction qui, amenCe ?I set, donne une poudre de couleur chamois. Une ttude chimique montre la prksence de flavonosides et d’amino acides.
HO-f \t
non-protein
amino acids; y-glutamylamide;
y-
tyrosine.
L’hydrolyse acide de ce composk men&e dans HCl (N) conduit au bout d’une heure & reflux, done trbs rapidement, & l’apparition en CCM de deux spots identifits g la tyramine et h I’acide glutamique (identification confirm&e par passage de l’hydrolysat sur auto analyseur Technicon. Ce comportement est la prkomption de l’existence d’une liaison trks labile type y-glutamyl amide et non d’une liaison peptidique habituelle. L’ester mkthylique prCparC classiquement & partir de l’acide (MeOH-HCl, 2 hr) montre en spectromktrie de masse les fragments caractkristiques: M’ 280, pits 2 m/e 221 (M-CO,Me), 161 &H,-C~-(CH~),144 (CO+-(CH,),-CH-CH-(NH)-CO,Me) (NH)-CO,Me), et les autres pits attendus & m/e 121, 120, 108, 107. Nous proposons pour le composk isolC la structure de y-glutamyltyramine ou L-glutamine, N-2-(4 hydroxylphbnyl)kthyl (1).
R
CH,-CH,-NH-C-CH,-CH,-YH-COOH
\--/
IGH,
L’ktude de ces derniers par chromatographie couche mince, indique l’existence d’un spot se rCvClant rouge vif g la ninhydrine aprks chauffage. La comparaison avec des amino acides de rCfCrence, ainsi que la rCvClation colorke inhabituelle pouvaient faire penser B un amino acide original. La fraction provenant de l’klution XAD2 a done ttk pas&e sur une rCsine Cchangeuse d’ions type IR 120 H‘ afin d’kliminer les flavonosides. Aprbs lavage de la colonne & l’eau entrainant les flavonosides non fix&, l’klution par une solution d’ammoniaque conduit ?I l’obtention d’une fraction brute riche en amino acides. Sur l’extrait set de celle-ci, les reprises successives par l’kthanol puis le mCthano1 a reflux permettent d’enrichir en un produit Ce dernier peut-&tre cristallisk dans un inconnu. mklange eau-propanol.
RCcemment en biologie animale, la y-glutamylation enzymatique d’amines dans le cerveau du rat, aprks leurs injections intraventriculaires, a ttC observke par Tsuji et al. [l], notamment avec la tyramine. Nous signalons que nous n’avons pas trouvC ce produit dans les espkces telles que Tephrosia purpurea, T. candida.
PARTIE
EXPkRIMENTALE
La plante a ttC r&colt&e en septembre 1975 sur les pentes en Nouvelle-Caltdonie par T. SCvenet du Montravel, (RBfBrence herbier, SBvenet 1065). Les spectres UV ont 6th dtterminis en solution dans HCI, les IR ont 6tt enregistrks dans le KBr, les points de fusion ont Bt6 pris au Kafler
1225
1226
Short Reporta
(CorrlgCsJ. Les spectres de masse ont +5ti effectuCs avec I’appareil type MS-9. Les pouvoirs rotatoires ant &tt! mesurts dans HCI sur polarimktre Jobin-Yvon. type Rourgogne II. Exfracriottr L’I stpurufions. 1,2S ky de tiger feuilltes sent broy& ct infus&s dans 7.5 I. d’HZO houillante. A@ esso~age ct ringage la phase aqueuse est pass& SUI- colonnr d’Amherlitc XADl 16 x 90 cm). On law la colonne par 7 I. d’H,O distill&. La dCsorption des produns fix& se fait par de I‘EtOH 5 SO% 13 I.1 La soln hydroalcoolique est &apor& a see et le r&idu 30 g repris dans 300 ml d’HZO est pass6 sur rb\inc /\rnhcrlttc IR 120 H’ (2.5 x 60 cm). Apr’:s labagc par 3 I. de MeOH a 50%~. on Clue par 3 I. de NH,OH (N). Cette soln ammoniacale donne -1,3 g d‘extrait sec. Les reprises B reflux success~vcs par EtOH (5.1250 ml) puis MeOH (Sx 200 ml) j rcfiux montrent dam les fractions lb3 (&OH) la prCsence dc tryptophane (R, 0.-16), tyramine (K, 0,47), tyrosinc CR, 0,33) ainsi que d’un spot de R, 0.26 rouge vlf lors de la rPvdlation par la ninhydrint: [II] apr& chauffage B
Phyrochemistry,
1980. Vol. 19. pp. 1226-l 227. 0
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130”. La CCM est effect&e \UI gel de Si Alec’ lc mClange Cluant EtOAc-MeCOEt-HCC),H-H,O (5 : .?.1: 11.LCSfractions 4 et 5 (EtOH) et 1-S (MeOH tr& I-iclw en product se rCvClant rouge sont rbunies et concentr& B LCC(7% mg). La reprise $ 80” par le m~langc PI-OHGH,O (I(1 :9OI iaisae cristalliser 600 mg d‘un produit qui Jorme urw tachc en <‘CM (RI 0.76). F. 21X-21’)‘. (Analy\c: Trouv;: (‘. 58.63: f1. 6.97; N. 10.61. Rksultat calculi pour C‘,,H,,NZO,,: (‘. 5X.6.1; H. 18’ t HCI N. c I I: Spectra UV: 6,81; N. 10.52%). [a];;‘AEiiY nm (10s ~1: 230 i3.S). 2x0 1.1.231. Spcctw IR: NHCO B 16~0cm ‘. BIBLIOGRAPHIE
M.. Matsuoka, Y. et Neurochern. 29, 633. 2. Fahmy, R. A. ct Niedcr\\icser. Acta 44, 2022. I. T’suji,
Nakajima,
‘I‘. (1977)
1.
A. (1961 J FfpfLr. (‘hinz
Pergamon Press Ltd. Printed in England.
OF THE HYDROCARBON CONSTITUENTS OF WAXES OF KHAYA SPECIES ON LEAF AGE 0.
0.
P. F/\ROYA,
Department
Key Word Index-Khclytr:
J. I.
of Chemistry,
leaf waxes:
G1.C:
OKOGLJN
University
and
D.
of Ihadan.
R.
GOIDDARI)
Ihadan.
Nigeria
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Abstract-The hydrocarbon constituents taxonomic purposes using GLC. The leaf n-alkanes were in the range of C2, to C;,, percentage composition of the n-alkane lcaves having n-C,, as the most abundant
--______
of the leaf waxes of eight species of Khccycl were analysed for waxes contained neither isoalkanes nor alkenes and the bulk of the odd-carbon number compounds predominating. It was found that the constituents of the leaf waxes varied with the age of leaves. young alkane, whereas older leaves had n-Ci,.
_
INTRODUCTION
Trees of the Meliaceae have received much attention from chemists [l] and a large number of compounds have been isolated [2-A]. The distribution of these compounds form a pattern common to the family [ 11. ‘The object of the present work was to examine the chemotaxonomic importance of aikancs in the leaf waxes of eight species of Khccycl. We also wished to examine whether there was any variation in the alkane composition of the waxes and the age of the leaves.
RESULTS
AND
1XSCUSSIO.N
Eight species of Khqct growing on the campus of the University of Ibadan were chosen for the investigation These were k’hcly~r s~~~cgc~lensia. K. ~~n~hothrc.tr (Uganda), K. ctnrhotlwcct (C;hana), K. icorenai,s, K. grandifoliola (Uganda). K. rtytcsiccl (amani), K. k;rctr+ difoliolu (Ife I and K. rnc[tln~tr.sc,ltriurlci,~. During a preliminary investigation it was found that the hydrocarbon composition of the leaf waxes \ aried with the age of the Icavc\ (viable I I. In both casts,