- Email: [email protected]
Antigenicity of human hemoglobin Ao and Fo
198
ist theoretisch das Blut in der linken Herzkammer starker verdiinnt als in der rechten. Urn diese Hypothese zu kontrollieren, haben wir bei einer gewissen Anzahl von Fallen mit verschiedenartigen Todesursachen die Blutverdiinnungen gemessen. Wir haben jeweils Blutproben der beiden Herzkammern gewonnen, das Serum abzentrifugiert un bei immer gleichbleibender Serummenge den Gefrierpunkt bestimmt. Die Messungen wurden mit einem “Fiske”-Osmometer vorgenommen, bei dem man den Gefrierpunkt direkt in Milliosmol pro Liter Serum ablesen kann. Dann berechneten wir den Unterschied zwischen dem Wert der linken und dem rechten Herzkammer. Wenn es sich nicht urn Wasserleichen handelte (natiirliche Todesursache, Verkehrsunfall, Tod durch Schussverletzung u.a.), bestand kein oder nur ein unwesentlicher Unterschied. Bei Wasserleichen mit Ertrinkungsanzeichen (vor allem mit Ertrinkungslungen) wechselte der Verdiinnungsunterschied zwischen 5% und 18%. Bei den anderen Wasserleichen waren die Werte gleich oder ohne beachtenswertem Unterschied. Dies erlaubt uns zu sagen, dass wir keine falsch positiven Resultate hatten. Es muss jedoch darauf hingewiesen werden, dass die Methode weder bei starker Hiimolyse der Blutproben (keine Serumgewinnung moglich) noch bei Fehlen von Blut in einer der beiden Herzkammern (Blut durch Todesstarre herausgepresst) angewandt werden kann. Fukae, T.,Ohya, I. and Suyama, ANTIGENICITY
H. (Nagasaki, Japan)
OF HUMAN HEMOGLOBIN Ao AND Fo
The specific antisera to human Hb Ao(cusps) and Hb Fo(asys) were the most useful in the identification of human blood stains. Separations by ion exchange chromatography of Hb Fo from cord blood hemolysate and Hb Ao from adult blood hemolysate have already been obtained with DEAE-Sephadex A-50. White rabbits of 2.5 - 3 kg were immunized by intramuscular injections of purified Fo and Ao hemoglobins, and the resulting antisera were first absorbed with human erythrocyte non-hemoglobin proteins. Hybridization of purified Ao and Fo hemoglobins with canine hemoglobin was carried out as described by Huisman. The separated (Y,0 and y chains of human hemoglobin were prepared by the PMB method. The immunological properties of these antisera against the various components obtained as above were analysed for their specificity using serological techniques, such as the ring test, immunoelectrophoresis and combined starch-agarose immunodiffusion. The distribution of specificity was found to differ between antisera to Hb Ao and Hb Fo. In anti-A0 sera similar amounts of antibodies to (Y and 0 chains were found, while in anti-F0 sera a preponderance of antibodies to y chains compared with those to (Ychains was noted. In addition, Hb Fo was found to be a more specific immunogen than Hb Ao, and this superior immunogenicity was accounted for by the enhanced immunogenicity of the y polypeptide chain.
ist theoretisch das Blut in der linken Herzkammer starker verdiinnt als in der rechten. Urn diese Hypothese zu kontrollieren, haben wir bei einer gewissen Anzahl von Fallen mit verschiedenartigen Todesursachen die Blutverdiinnungen gemessen. Wir haben jeweils Blutproben der beiden Herzkammern gewonnen, das Serum abzentrifugiert un bei immer gleichbleibender Serummenge den Gefrierpunkt bestimmt. Die Messungen wurden mit einem “Fiske”-Osmometer vorgenommen, bei dem man den Gefrierpunkt direkt in Milliosmol pro Liter Serum ablesen kann. Dann berechneten wir den Unterschied zwischen dem Wert der linken und dem rechten Herzkammer. Wenn es sich nicht urn Wasserleichen handelte (natiirliche Todesursache, Verkehrsunfall, Tod durch Schussverletzung u.a.), bestand kein oder nur ein unwesentlicher Unterschied. Bei Wasserleichen mit Ertrinkungsanzeichen (vor allem mit Ertrinkungslungen) wechselte der Verdiinnungsunterschied zwischen 5% und 18%. Bei den anderen Wasserleichen waren die Werte gleich oder ohne beachtenswertem Unterschied. Dies erlaubt uns zu sagen, dass wir keine falsch positiven Resultate hatten. Es muss jedoch darauf hingewiesen werden, dass die Methode weder bei starker Hiimolyse der Blutproben (keine Serumgewinnung moglich) noch bei Fehlen von Blut in einer der beiden Herzkammern (Blut durch Todesstarre herausgepresst) angewandt werden kann. Fukae, T.,Ohya, I. and Suyama, ANTIGENICITY
H. (Nagasaki, Japan)
OF HUMAN HEMOGLOBIN Ao AND Fo
The specific antisera to human Hb Ao(cusps) and Hb Fo(asys) were the most useful in the identification of human blood stains. Separations by ion exchange chromatography of Hb Fo from cord blood hemolysate and Hb Ao from adult blood hemolysate have already been obtained with DEAE-Sephadex A-50. White rabbits of 2.5 - 3 kg were immunized by intramuscular injections of purified Fo and Ao hemoglobins, and the resulting antisera were first absorbed with human erythrocyte non-hemoglobin proteins. Hybridization of purified Ao and Fo hemoglobins with canine hemoglobin was carried out as described by Huisman. The separated (Y,0 and y chains of human hemoglobin were prepared by the PMB method. The immunological properties of these antisera against the various components obtained as above were analysed for their specificity using serological techniques, such as the ring test, immunoelectrophoresis and combined starch-agarose immunodiffusion. The distribution of specificity was found to differ between antisera to Hb Ao and Hb Fo. In anti-A0 sera similar amounts of antibodies to (Y and 0 chains were found, while in anti-F0 sera a preponderance of antibodies to y chains compared with those to (Ychains was noted. In addition, Hb Fo was found to be a more specific immunogen than Hb Ao, and this superior immunogenicity was accounted for by the enhanced immunogenicity of the y polypeptide chain.