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Caractérisation phénotypique et fonctionnelle des souris invalidées pour le gène c-mip dans les podocytes
Posters : recherche / Néphrologie & Thérapeutique 11 (2015) 444–450
– la vasopressine est une hormone importante lors d’une restriction en K+ ; – la HKA2 joue un rôle central dans l’adaptation à un régime pauvre en K+ . Conclusion La présence d’une HKA2 activée est donc requise pour limiter la diminution de la kaliémie mais contribue à l’apparition d’une hypertension sensible au sel. Déclaration d’intérêts Les auteurs n’ont pas transmis de déclaration de conflits d’intérêts. http://dx.doi.org/10.1016/j.nephro.2015.07.232 PMR.03
Conséquences de l’hyperparathyroïdie primitive sur l’excrétion rénale de calcium D. Granjon 1,∗ , O. Bonny 2 , A. Edwards 1 1 Équipe 3 métabolisme et physiologie rénale, centre de recherche des Cordeliers, Paris, France 2 Département de toxicologie et pharmacologie, université de Lausanne, Lausanne, Suisse ∗ Auteur correspondant. Adresse e-mail : [email protected] (D. Granjon) Introduction Les flux de calcium entre l’intestin, les os et les reins sont régulés principalement par l’hormone parathyroïdienne (PTH) et la forme active de la vitamine D (calcitriol), mettant en jeu de nombreux rétrocontrôles. Dans le rein, la PTH et le calcitriol augmentent la réabsorption de calcium, alors que le récepteur sensible au Ca2+ (CaSR) réduit la perméabilité de la branche ascendante large de Henlé au Ca2+ , conduisant à une élévation de l’excrétion urinaire de calcium. Dans l’hyperparathyroïdie primitive (HPP), caractérisée par une hypercalcémie et une hypophosphatémie, l’excrétion urinaire de calcium peut être assez variable. La PTH à hautes doses peut en effet avoir un effet opposé sur la calciurie, d’une part, en favorisant la réabsorption de calcium dans le tubule distal et, d’autre part, en amplifiant la charge filtrée. L’objectif de cette étude est de modéliser les déterminants de la calciurie dans l’HPP. Matériels et méthodes Pour cela, nous avons construit un modèle mathématique représentant l’homéostasie du calcium chez le rat, considérant les organes et les hormones pertinents. Il est constitué d’équations différentielles, décrivant la conservation du calcium, de la PTH et du calcitriol dans chaque compartiment. Résultats Différents scénarii ont été introduits dans le modèle, notamment l’hypocalcémie, l’hypercalcémie et une parathyroïdectomie. Les prédictions du modèle corrèlent bien avec les résultats expérimentaux tirés de la littérature, validant notre modèle. Nous avons alors simulé le cas de l’HPP en augmentant le taux de synthèse de la PTH par les glandes parathyroïdiennes. Les concentrations plasmatiques de PTH, de Ca2+ et de calcitriol augmentent linéairement. En revanche, la fraction d’excrétion urinaire de calcium ainsi que la charge totale excrétée diminuent dans un premier temps, augmentant par la suite en synchronie avec la synthèse de PTH. Discussion Ce phénomène de diminution de la calciurie peut être expliqué par les effets de compensation entre PTH et CaSR sur le transport de calcium dans le rein. Conclusion Ce mécanisme peut expliquer, en partie, la variabilité de l’hypercalciurie dans l’HPP. Déclaration d’intérêts Les auteurs n’ont pas transmis de déclaration de conflits d’intérêts. Pour en savoir plus Raposo et al. J Clin Endocrinol Metab 2002. Jaeger et al. AJP Endocrinol Metab 1987. http://dx.doi.org/10.1016/j.nephro.2015.07.233
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PMR.04
Caractérisation phénotypique et fonctionnelle des souris invalidées pour le gène c-mip dans les podocytes
M. Mangier 1,∗ , S.Y. Zhang 1 , A. Moktefi 2 , V. Latapie 1 , P. Vachin 1 , A. Pawlak 1 , D. Sahali 3 , M. Ollero 1 1 Équipe 21, U955, Inserm, Créteil, France 2 Service d’anatomopathologie, hôpital Henri-Mondor, Créteil, France 3 Service de néphrologie et transplantation, hôpital Henri-Mondor, Créteil, France ∗ Auteur correspondant. Adresse e-mail : [email protected] (M. Mangier) Introduction Des études cliniques et expérimentales ont montré que l’expression de c-mip dans les podocytes est étroitement associée au développement d’une protéinurie néphrotique et un effacement des podocytes. Ces résultats nous ont conduits à générer une lignée de souris invalidées pour le gène c-mip spécifiquement dans les podocytes afin de déterminer si elles sont résistantes à l’induction d’une protéinurie expérimentale par deux modèles expérimentaux, l’un induit par le LPS et un autre basé sur l’administration chronique de sorafénib dont nous avons montré chez l’homme qu’elle pouvait entraîner une protéinurie massive essentiellement causée par des altérations podocytaires ou parfois endothéliales. Matériels et méthodes L’invalidation podocytaire du gène c-mip, conditionnelle et inductible par la doxycycline, a été confirmée par PCR sur des glomérules isolés par sélection magnétique après perfusion intracardiaque de billes enrobées de sulfate de fer, et par immunohistochimie. Résultats À l’état basal, les études histologiques et immunomorphologiques ont révélé une architecture normale ainsi qu’une expression normale des marqueurs podocytaires. Après injection de LPS, la protéinurie des souris déficientes est significativement diminuée par rapport aux souris témoins. Les analyses n’ont montré aucune altération de l’architecture glomérulaire ni de modifications de l’expression de différents marqueurs podocytaires, contrairement aux souris témoins. Les souris traitées au sorafénib ont développé une protéinurie massive avec apparition de lésions glomérulaires de type MAT (microangiopathie thrombotique) et HSF (hyalinose segmentaire et focale) pour les souris témoins et des lésions de MAT beaucoup plus prononcées chez les souris invalidées avec apparition de thrombi intracapillaires. Discussion La délétion de c-mip dans les podocytes préviendrait le déclenchement d’un syndrome néphrotique expérimental induit par le LPS et le sorafénib, mais pas d’effet protecteur sur les lésions de type MAT induites par ce dernier. Conclusion Ces travaux suggèrent que la délétion de c-mip aurait un effet protecteur sur les dysfonctions podocytaires à l’origine de lésions de hyalinose segmentaire et focale. Déclaration d’intérêts Les auteurs n’ont pas transmis de déclaration de conflits d’intérêts. Pour en savoir plus Izzedine H et al. Kidney Int 2014. Zhang et al. Sci Signal 2010. http://dx.doi.org/10.1016/j.nephro.2015.07.234 PMR.05
c-mip altère la régulation de CD20 et l’activation du lymphocyte B J. Oniszczuk 1,∗ , L. Nielsen 2 , M. Mangier 1 , V. Audard 3 , D. Sahali 2 1 Équipe 21, Inserm U955, hôpital Henri-Mondor, Créteil, France 2 Service de néphrologie et transplantation, hôpital Henri-Mondor, Créteil, France 3 Équipe 21 IMRB, service de néphrologie et transplantation, Créteil, France
– la vasopressine est une hormone importante lors d’une restriction en K+ ; – la HKA2 joue un rôle central dans l’adaptation à un régime pauvre en K+ . Conclusion La présence d’une HKA2 activée est donc requise pour limiter la diminution de la kaliémie mais contribue à l’apparition d’une hypertension sensible au sel. Déclaration d’intérêts Les auteurs n’ont pas transmis de déclaration de conflits d’intérêts. http://dx.doi.org/10.1016/j.nephro.2015.07.232 PMR.03
Conséquences de l’hyperparathyroïdie primitive sur l’excrétion rénale de calcium D. Granjon 1,∗ , O. Bonny 2 , A. Edwards 1 1 Équipe 3 métabolisme et physiologie rénale, centre de recherche des Cordeliers, Paris, France 2 Département de toxicologie et pharmacologie, université de Lausanne, Lausanne, Suisse ∗ Auteur correspondant. Adresse e-mail : [email protected] (D. Granjon) Introduction Les flux de calcium entre l’intestin, les os et les reins sont régulés principalement par l’hormone parathyroïdienne (PTH) et la forme active de la vitamine D (calcitriol), mettant en jeu de nombreux rétrocontrôles. Dans le rein, la PTH et le calcitriol augmentent la réabsorption de calcium, alors que le récepteur sensible au Ca2+ (CaSR) réduit la perméabilité de la branche ascendante large de Henlé au Ca2+ , conduisant à une élévation de l’excrétion urinaire de calcium. Dans l’hyperparathyroïdie primitive (HPP), caractérisée par une hypercalcémie et une hypophosphatémie, l’excrétion urinaire de calcium peut être assez variable. La PTH à hautes doses peut en effet avoir un effet opposé sur la calciurie, d’une part, en favorisant la réabsorption de calcium dans le tubule distal et, d’autre part, en amplifiant la charge filtrée. L’objectif de cette étude est de modéliser les déterminants de la calciurie dans l’HPP. Matériels et méthodes Pour cela, nous avons construit un modèle mathématique représentant l’homéostasie du calcium chez le rat, considérant les organes et les hormones pertinents. Il est constitué d’équations différentielles, décrivant la conservation du calcium, de la PTH et du calcitriol dans chaque compartiment. Résultats Différents scénarii ont été introduits dans le modèle, notamment l’hypocalcémie, l’hypercalcémie et une parathyroïdectomie. Les prédictions du modèle corrèlent bien avec les résultats expérimentaux tirés de la littérature, validant notre modèle. Nous avons alors simulé le cas de l’HPP en augmentant le taux de synthèse de la PTH par les glandes parathyroïdiennes. Les concentrations plasmatiques de PTH, de Ca2+ et de calcitriol augmentent linéairement. En revanche, la fraction d’excrétion urinaire de calcium ainsi que la charge totale excrétée diminuent dans un premier temps, augmentant par la suite en synchronie avec la synthèse de PTH. Discussion Ce phénomène de diminution de la calciurie peut être expliqué par les effets de compensation entre PTH et CaSR sur le transport de calcium dans le rein. Conclusion Ce mécanisme peut expliquer, en partie, la variabilité de l’hypercalciurie dans l’HPP. Déclaration d’intérêts Les auteurs n’ont pas transmis de déclaration de conflits d’intérêts. Pour en savoir plus Raposo et al. J Clin Endocrinol Metab 2002. Jaeger et al. AJP Endocrinol Metab 1987. http://dx.doi.org/10.1016/j.nephro.2015.07.233
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Caractérisation phénotypique et fonctionnelle des souris invalidées pour le gène c-mip dans les podocytes
M. Mangier 1,∗ , S.Y. Zhang 1 , A. Moktefi 2 , V. Latapie 1 , P. Vachin 1 , A. Pawlak 1 , D. Sahali 3 , M. Ollero 1 1 Équipe 21, U955, Inserm, Créteil, France 2 Service d’anatomopathologie, hôpital Henri-Mondor, Créteil, France 3 Service de néphrologie et transplantation, hôpital Henri-Mondor, Créteil, France ∗ Auteur correspondant. Adresse e-mail : [email protected] (M. Mangier) Introduction Des études cliniques et expérimentales ont montré que l’expression de c-mip dans les podocytes est étroitement associée au développement d’une protéinurie néphrotique et un effacement des podocytes. Ces résultats nous ont conduits à générer une lignée de souris invalidées pour le gène c-mip spécifiquement dans les podocytes afin de déterminer si elles sont résistantes à l’induction d’une protéinurie expérimentale par deux modèles expérimentaux, l’un induit par le LPS et un autre basé sur l’administration chronique de sorafénib dont nous avons montré chez l’homme qu’elle pouvait entraîner une protéinurie massive essentiellement causée par des altérations podocytaires ou parfois endothéliales. Matériels et méthodes L’invalidation podocytaire du gène c-mip, conditionnelle et inductible par la doxycycline, a été confirmée par PCR sur des glomérules isolés par sélection magnétique après perfusion intracardiaque de billes enrobées de sulfate de fer, et par immunohistochimie. Résultats À l’état basal, les études histologiques et immunomorphologiques ont révélé une architecture normale ainsi qu’une expression normale des marqueurs podocytaires. Après injection de LPS, la protéinurie des souris déficientes est significativement diminuée par rapport aux souris témoins. Les analyses n’ont montré aucune altération de l’architecture glomérulaire ni de modifications de l’expression de différents marqueurs podocytaires, contrairement aux souris témoins. Les souris traitées au sorafénib ont développé une protéinurie massive avec apparition de lésions glomérulaires de type MAT (microangiopathie thrombotique) et HSF (hyalinose segmentaire et focale) pour les souris témoins et des lésions de MAT beaucoup plus prononcées chez les souris invalidées avec apparition de thrombi intracapillaires. Discussion La délétion de c-mip dans les podocytes préviendrait le déclenchement d’un syndrome néphrotique expérimental induit par le LPS et le sorafénib, mais pas d’effet protecteur sur les lésions de type MAT induites par ce dernier. Conclusion Ces travaux suggèrent que la délétion de c-mip aurait un effet protecteur sur les dysfonctions podocytaires à l’origine de lésions de hyalinose segmentaire et focale. Déclaration d’intérêts Les auteurs n’ont pas transmis de déclaration de conflits d’intérêts. Pour en savoir plus Izzedine H et al. Kidney Int 2014. Zhang et al. Sci Signal 2010. http://dx.doi.org/10.1016/j.nephro.2015.07.234 PMR.05
c-mip altère la régulation de CD20 et l’activation du lymphocyte B J. Oniszczuk 1,∗ , L. Nielsen 2 , M. Mangier 1 , V. Audard 3 , D. Sahali 2 1 Équipe 21, Inserm U955, hôpital Henri-Mondor, Créteil, France 2 Service de néphrologie et transplantation, hôpital Henri-Mondor, Créteil, France 3 Équipe 21 IMRB, service de néphrologie et transplantation, Créteil, France