- Email: [email protected]
Krebs von den Lungen-6 (KL-6), un marqueur de fibrose pulmonaire et de sévérité dans la sclérodermie systémique
77e Congrès de médecine interne, Lyon du 27 au 29 juin 2018 / La Revue de médecine interne 39 (2018) A55–A117
CO019
CO020
Krebs von den Lungen-6 (KL-6), un marqueur de fibrose pulmonaire et de sévérité dans la sclérodermie systémique
Expression de ZAP-70 par les lymphocytes B non tumoraux : une nouveau mécanisme de rupture de tolérance B ? Résultats préliminaires in vivo
A. Benyamine 1,∗ , X. Heim 2 , N. Resseguier 3 , D. Bertin 2 , C. Gomez 4 , M. Ebbo 5 , J.R. Harlé 6 , G. Kaplanski 7 , P. Rossi 1 , N. Bardin 2 , B. Granel 1 1 Médecine interne, hôpital Nord, Marseille, France 2 Laboratoire d’immunologie, CHU de la Conception, Marseille, France 3 Laboratoire de santé publique, CHU La Timone, Marseille, France 4 Pneumologie, CHU Nord, Marseille, France 5 Médecine interne, hôpital de la Timone, AP–HM, Marseille, France 6 Médecine interne, 264, rue Saint-Pierre, Marseille, France 7 Service de médecine interne, CHU de la Conception, Marseille, France ∗ Auteur correspondant. Adresse e-mail : [email protected] (A. Benyamine) Introduction Nous avons étudié la pertinence de Krebs von den Lungen-6 (KL-6) dans le diagnostic et l’évaluation de la sévérité de la pneumopathie interstitielle diffuse (PID) chez des patients atteints de sclérodermie systémique (ScS). Patients et méthodes Le KL-6 sérique était dosé par technique immuno-enzymatique chimioluminescente chez 75 patients ScS. Les patients étaient divisés en deux groupes en fonction de la présence d’une pneumopathie interstitielle diffuse sur la tomodensitométrie thoracique. Les épreuves fonctionnelles respiratoires (EFR), les principales manifestations cliniques et la gravité de la maladie (score de Medsger) étaient recueillies. Résultats Les taux de KL-6 étaient plus élevés chez les patients ScS avec PID que chez ceux sans PID (p < 10−4 ) et étaient inversement corrélés avec la capacité vitale forcée, la capacité pulmonaire totale et la mesure du transfert du CO. Un taux de KL-6 supérieur à 872 U/mL correspondait au seuil optimal associé à la PID. Les patients présentant un syndrome restrictif et une dyspnée avaient des taux de KL-6 significativement plus élevés. Les patients ScS avec des anticorps anti-topoisomérase 1 avaient des taux sériques de KL-6 plus élevés que les patients avec des anticorps anti-centromères (p < 10−4 ). La PID et la positivité des anticorps anti-topoisomérase 1 étaient des facteurs indépendamment associés à KL-6 dans l’analyse multivariée. Le taux de KL-6 corrélait positivement avec la sévérité de la maladie. Conclusion Notre étude confirme que KL-6 est un biomarqueur intéressant pour le diagnostic des PID associées à la ScS dans une cohorte franc¸aise de patients. Les niveaux élevés de KL-6 devraient inciter à évaluer la PID par imagerie et EFR. Des études prospectives sont nécessaires pour déterminer l’intérêt de KL-6 comme marqueur d’évolutivité de la PID et sa place dans la décision thérapeutique. Déclaration de liens d’intérêts Les auteurs déclarent ne pas avoir de liens d’intérêts. https://doi.org/10.1016/j.revmed.2018.03.292
A67
M. Martin 1,∗ , A.M. Knapp 2 , L. Vallat 3 , C. Schleiss 3 , D. Ghergus 4 , A.S. Korganow 1 , F. Gros 2 , S. Jung 2 , P. Soulas-Sprauel 2 , T. Martin 1 1 Service d’immunologie, centre national de référence de maladies auto-immunes, CHRU hôpitaux universitaires Strasbourg, Strasbourg, France 2 UPR CNRS 3572, université de Strasbourg, Strasbourg, France 3 Inserm Umr-S1109, université de Strasbourg, Strasbourg, France 4 Service d’hématologie clinique, hospices civils de Lyon, Lyon, France ∗ Auteur correspondant. Adresse e-mail : [email protected] (M. Martin) Introduction L’expression anormale de ZAP-70 par les lymphocytes B (LyB) tumoraux dans la leucémie lymphoïde chronique (LLC) est un facteur pronostique péjoratif [1] et est associée à la survenue de cytopénies auto-immunes (CAI) [2], ces dernières étant par contre dues à des immunoglobulines (Ig) polyclonales issues des LyB non tumoraux. Des données de notre laboratoire montrent qu’une fraction des LyB non tumoraux des patients atteints de LLC ZAP-70+ exprime également anormalement ZAP-70, avec une corrélation positive du niveau d’expression entre les LyB non tumoraux et tumoraux et la survenue de CAI. D’autre part, quelques rares données montrent que l’expression de ZAP-70 peut aussi s’observer dans des LyB non tumoraux issus de patients sains [3]. Toutefois, la signification fonctionnelle de l’expression de ZAP-70 par les LyB non tumoraux reste totalement inconnue, notamment son rôle dans la rupture de tolérance B et son caractère pro-oncogénique. Matériels et méthodes Afin d’étudier les conséquences fonctionnelles de l’expression de ZAP-70 dans les LyB in vivo, un modèle murin double transgénique knock in ZAP-70+/Mb1-Cre+ a été créé, permettant l’expression conditionnelle de ZAP-70 dans les LyB dès le stade proB. Les souris porteuses du transgène Zap70 mais ne l’exprimant pas (Mb1-Cre -) ont été utilisées comme contrôles (CTRL). Un immunophénotypage B complet a été réalisé à 16 semaines. Des numérations formules sanguines ont été réalisés tous les 2 mois jusqu’à l’âge de 22 mois, à la recherche d’une lymphocytose et/ou de cytopénies. L’activation des LyB a été étudiée in vitro sous différents stimulis. Enfin, la production d’immunoglobulines (Ig) et la réponse anticorps in vivo a été analysée par Elisa à l’état basal et après immunisations. Résultats À l’état basal, l’intensité d’expression de ZAP-70 dans les LyB était inversement corrélée à l’apoptose des progéniteurs proB (p = 0,008), préB (p = 0,01) et B immatures (p = 0,01). En périphérie, il était observé un excès de LyB immatures (p = 0,003), un déficit en LyB naïfs (p = 0,001), en LyB matures switchés (p = 0,002) et une tendance pour les plasmocytes médullaires (p = 0,07). Il existait une réduction marquée en LyB de type centre germinatif (p < 0,001) et une hypogammaglobulinémie, observée dès M4 pour les IgG (p = 0,003) et dès M6 pour les IgM (p = 0,03). D’autre part, il était observé un excès de LyB de type zone marginale (p = 0,01) et un défaut de B1a (p = 0,008). Les titres d’IgM anti-ADN natif à M6 étaient supérieurs à ceux des CTRL (p = 0,02) et positivement corrélés à l’intensité de l’expression de ZAP-70 (p = 0,01). Après immunisation, il existait un retard à la production des IgG spécifiques anti-Ovalbumine à j7 et j10 (p = 0,04 et p = 0,02 respectivement). Les données préliminaires des stimulations de LyB spléniques triés ont révélé une réduction de l’expression des marqueurs d’activation précoce (CD69+CD86+) par anti-IgM seule (p = 0,04) ainsi qu’une tendance par anti-IgM + CD40 + IL4, LPS ou encore CpGDNA. Durant le suivi, aucune souris n’a développé de lymphocytose ou de cytopénies et il n’a pas été observé d’adénopathies et/ou de splénomégalie significatives au moment du sacrifice.
CO019
CO020
Krebs von den Lungen-6 (KL-6), un marqueur de fibrose pulmonaire et de sévérité dans la sclérodermie systémique
Expression de ZAP-70 par les lymphocytes B non tumoraux : une nouveau mécanisme de rupture de tolérance B ? Résultats préliminaires in vivo
A. Benyamine 1,∗ , X. Heim 2 , N. Resseguier 3 , D. Bertin 2 , C. Gomez 4 , M. Ebbo 5 , J.R. Harlé 6 , G. Kaplanski 7 , P. Rossi 1 , N. Bardin 2 , B. Granel 1 1 Médecine interne, hôpital Nord, Marseille, France 2 Laboratoire d’immunologie, CHU de la Conception, Marseille, France 3 Laboratoire de santé publique, CHU La Timone, Marseille, France 4 Pneumologie, CHU Nord, Marseille, France 5 Médecine interne, hôpital de la Timone, AP–HM, Marseille, France 6 Médecine interne, 264, rue Saint-Pierre, Marseille, France 7 Service de médecine interne, CHU de la Conception, Marseille, France ∗ Auteur correspondant. Adresse e-mail : [email protected] (A. Benyamine) Introduction Nous avons étudié la pertinence de Krebs von den Lungen-6 (KL-6) dans le diagnostic et l’évaluation de la sévérité de la pneumopathie interstitielle diffuse (PID) chez des patients atteints de sclérodermie systémique (ScS). Patients et méthodes Le KL-6 sérique était dosé par technique immuno-enzymatique chimioluminescente chez 75 patients ScS. Les patients étaient divisés en deux groupes en fonction de la présence d’une pneumopathie interstitielle diffuse sur la tomodensitométrie thoracique. Les épreuves fonctionnelles respiratoires (EFR), les principales manifestations cliniques et la gravité de la maladie (score de Medsger) étaient recueillies. Résultats Les taux de KL-6 étaient plus élevés chez les patients ScS avec PID que chez ceux sans PID (p < 10−4 ) et étaient inversement corrélés avec la capacité vitale forcée, la capacité pulmonaire totale et la mesure du transfert du CO. Un taux de KL-6 supérieur à 872 U/mL correspondait au seuil optimal associé à la PID. Les patients présentant un syndrome restrictif et une dyspnée avaient des taux de KL-6 significativement plus élevés. Les patients ScS avec des anticorps anti-topoisomérase 1 avaient des taux sériques de KL-6 plus élevés que les patients avec des anticorps anti-centromères (p < 10−4 ). La PID et la positivité des anticorps anti-topoisomérase 1 étaient des facteurs indépendamment associés à KL-6 dans l’analyse multivariée. Le taux de KL-6 corrélait positivement avec la sévérité de la maladie. Conclusion Notre étude confirme que KL-6 est un biomarqueur intéressant pour le diagnostic des PID associées à la ScS dans une cohorte franc¸aise de patients. Les niveaux élevés de KL-6 devraient inciter à évaluer la PID par imagerie et EFR. Des études prospectives sont nécessaires pour déterminer l’intérêt de KL-6 comme marqueur d’évolutivité de la PID et sa place dans la décision thérapeutique. Déclaration de liens d’intérêts Les auteurs déclarent ne pas avoir de liens d’intérêts. https://doi.org/10.1016/j.revmed.2018.03.292
A67
M. Martin 1,∗ , A.M. Knapp 2 , L. Vallat 3 , C. Schleiss 3 , D. Ghergus 4 , A.S. Korganow 1 , F. Gros 2 , S. Jung 2 , P. Soulas-Sprauel 2 , T. Martin 1 1 Service d’immunologie, centre national de référence de maladies auto-immunes, CHRU hôpitaux universitaires Strasbourg, Strasbourg, France 2 UPR CNRS 3572, université de Strasbourg, Strasbourg, France 3 Inserm Umr-S1109, université de Strasbourg, Strasbourg, France 4 Service d’hématologie clinique, hospices civils de Lyon, Lyon, France ∗ Auteur correspondant. Adresse e-mail : [email protected] (M. Martin) Introduction L’expression anormale de ZAP-70 par les lymphocytes B (LyB) tumoraux dans la leucémie lymphoïde chronique (LLC) est un facteur pronostique péjoratif [1] et est associée à la survenue de cytopénies auto-immunes (CAI) [2], ces dernières étant par contre dues à des immunoglobulines (Ig) polyclonales issues des LyB non tumoraux. Des données de notre laboratoire montrent qu’une fraction des LyB non tumoraux des patients atteints de LLC ZAP-70+ exprime également anormalement ZAP-70, avec une corrélation positive du niveau d’expression entre les LyB non tumoraux et tumoraux et la survenue de CAI. D’autre part, quelques rares données montrent que l’expression de ZAP-70 peut aussi s’observer dans des LyB non tumoraux issus de patients sains [3]. Toutefois, la signification fonctionnelle de l’expression de ZAP-70 par les LyB non tumoraux reste totalement inconnue, notamment son rôle dans la rupture de tolérance B et son caractère pro-oncogénique. Matériels et méthodes Afin d’étudier les conséquences fonctionnelles de l’expression de ZAP-70 dans les LyB in vivo, un modèle murin double transgénique knock in ZAP-70+/Mb1-Cre+ a été créé, permettant l’expression conditionnelle de ZAP-70 dans les LyB dès le stade proB. Les souris porteuses du transgène Zap70 mais ne l’exprimant pas (Mb1-Cre -) ont été utilisées comme contrôles (CTRL). Un immunophénotypage B complet a été réalisé à 16 semaines. Des numérations formules sanguines ont été réalisés tous les 2 mois jusqu’à l’âge de 22 mois, à la recherche d’une lymphocytose et/ou de cytopénies. L’activation des LyB a été étudiée in vitro sous différents stimulis. Enfin, la production d’immunoglobulines (Ig) et la réponse anticorps in vivo a été analysée par Elisa à l’état basal et après immunisations. Résultats À l’état basal, l’intensité d’expression de ZAP-70 dans les LyB était inversement corrélée à l’apoptose des progéniteurs proB (p = 0,008), préB (p = 0,01) et B immatures (p = 0,01). En périphérie, il était observé un excès de LyB immatures (p = 0,003), un déficit en LyB naïfs (p = 0,001), en LyB matures switchés (p = 0,002) et une tendance pour les plasmocytes médullaires (p = 0,07). Il existait une réduction marquée en LyB de type centre germinatif (p < 0,001) et une hypogammaglobulinémie, observée dès M4 pour les IgG (p = 0,003) et dès M6 pour les IgM (p = 0,03). D’autre part, il était observé un excès de LyB de type zone marginale (p = 0,01) et un défaut de B1a (p = 0,008). Les titres d’IgM anti-ADN natif à M6 étaient supérieurs à ceux des CTRL (p = 0,02) et positivement corrélés à l’intensité de l’expression de ZAP-70 (p = 0,01). Après immunisation, il existait un retard à la production des IgG spécifiques anti-Ovalbumine à j7 et j10 (p = 0,04 et p = 0,02 respectivement). Les données préliminaires des stimulations de LyB spléniques triés ont révélé une réduction de l’expression des marqueurs d’activation précoce (CD69+CD86+) par anti-IgM seule (p = 0,04) ainsi qu’une tendance par anti-IgM + CD40 + IL4, LPS ou encore CpGDNA. Durant le suivi, aucune souris n’a développé de lymphocytose ou de cytopénies et il n’a pas été observé d’adénopathies et/ou de splénomégalie significatives au moment du sacrifice.