Nouvelles de la corata

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NOUVELLES DE LA CORATA II faut remarquer du reste que la radioimmunologie est la facette la plus visible d'un ensemble plus vaste represente par la radioanalyse consacree aux dosages par liaison (tableau I)..

La Societe Franqaise de Biophysique et de Medecine Nucleaire a confie en mars 1986 une mission B la CORATA, elaborer un document de reference en temoignant de I'acquis RIA au niveau de la qualite analytique. La CORATA a reuni un groupe de travail comprenant les membres suivants : M. BAUD (Besanqon), D. BELLET (Villejuif), J.C. BESNARD (Tours), C.-A. BIZOLLON (Lyon), P. BRUNELLE (Rouen), R. COHEN (Lyon), N. COLASLINHART (Clichy), G. CROUZAT-REYNES(Tours), C. CUEUILLE-FERRIERE (Cergy-Pontoise), M. DELAAGE (Marseille - Luminy), D. DUCASSOU (Bordeaux), J. FlET (Paris), P. FRAGU (Villejuif), G. GAILLARD (Clermont-Ferrand), J. GRENIER (Fresnes), J. GUERIS (Paris), J. INGRAND (Paris), P. JALLET (Angers), F. MOAT1 (Bicetre), J.-P. NICOLAS (Nancy), G. ROSSELIN (Paris), J.-C. RYMER (Creteil), J.-M. SCHERMANN (Paris), R. SCHOLLER (Fresnes) et J.-N. TALBOT (Paris). Le calendrier des reunions de travail pour 1986 a ete fix6 au 17 septembre (Deauville) et au 27 novembre (Angers). Le document final prendra en compte les suggestions et corrections proposees par les biologistes concernes. Trait D'union reproduit le projet de texte d'introduction soumis B discussion. PROJET DE TEXTE D'INTRODUCTION (Redacteur : J. INGRAND) Toute analyse a besoin de reactifs, d'un signal mesurable, d'un capteur. En Biologie clinique, oO 1'6tude de milieux complexes est la regle, I'obtention d'analyses de qualite passe par I'utilisation de reactifs specifiques et d'un signal facile B produire et B mesurer. L'emergence de la radioimmunologie B partir de 1959 est le fruit de I'association d'un signal stable, preforme et d'un element de la reaction antigeneanticorps. La radioimmunologie a conquis ses lettres de noblesse en hormonologie 00 elle a permis d'aborder des domaines dont I'exploration restait incomplete faute de techniques de dosages assez sensibles. B6nBficiant des recherches menees dans le monde entier par des scientifiques issus de toutes les disciplines de la Medecine et de la Biologie, aboutissant B d'innombrables applications, elle est devenue - de par sa standardisation - une methode sinon de reference au sens strict du terme mais B tout le moins une methode B laquelle sont confrontees les nouvelles techniques visant ZI fournir des resultats dans le domaine explore.

TABLEAU I Dosages par liaison utilisant un signal isotopique 1. Mesure d'une capacite de liaison 1.1 Test de transfert de la triiodothyronine (T3) 1.2 Capacite de fixation du fer 1.3 Etude des recepteurs hormonaux 2. Dosages en defaut de proteine liante utilisant un ligand marque Dosages de la vitamine B12 (A I'aide du facteur intrinseque), des folates (lactoglobuline) etc. 3. Dosages en defaut d'anticorps utilisant un antigene (Ag) (ligand) marque Dosages radioimmunologiques <( conventionnels s (RIA). Toutes mol6cules, de I'haptene a la proteine de poids moleculaire tres 6levee. 4. Dosages en exces d'anticorps utilisant un anticorps marque Dosages dits immunoradiometriques (IRMA) et techniques a deux anticorps (ligand pris en sandwich).

Remaraue : Ces doiages font partie des techniques immunochimiques dans lesquelles le deroulement de la reaction Ag-Ac est associe B une variation mesurable au niveau d'un reactif marque fournissant un signal ; il peut s'agir soit de la proportion de signaux distribues entre deux phases, soit de la modification globale de I'intensite du signal dans le milieu reactionnel. L'utilisation de rayonnements issus de desintegrations radioactives (insensibles aux variations de I'environnement physicochimique) conduit B des dosages dits en phase heterogene s 00 une ¶tion des phases liees (B) et libres (F) est necessaire ; il n'y a pas, comme avec les marqueurs enzymatiques ou fluorescents, de possibilite d'un dosage en phase homogene (ex. : techniques EMIT(R), techniques en polarisation de fluorescence). ((

Au cours des dix annees qui viennent de s'6couler, plusieurs phenomenes importants sont Venus secouer le monde de I'immunoanalyse avec marqueur: I'introduction des anticorps monoclonaux d'une part, I'insertion progressive en Biologie Clinique des immunodosages I'aide d'enzymes (EIA), de fluorescents (FIA), ou de luminescents (LIA). L'emploi des anticorps monoclonaux laisse entrevoir standardisation et fiabilite B long terme pour des reactifs jug& pr4ponddrants. L'apparition de nouveaux systemes analytiques, mis A la disposition de nombreux laboratoires avec des

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contraintes reglementaires reduites, decoule de recherches m6thodologiques intensives, tant au niveau des reactifs que des appareils destines B fournir et & mesurer de maniere reproductible un signal discernable du bruit de fond. L'enzymoimmunologie, en phase homogene ou heterogene, presente des acquis indiscutables ; la fluoroimmunologie remet 8 I'honneur I'emploi d'un signal considere encore recemment comme difficile a maitriser. C'est dans ce contexte qu'est ne le projet d'elaboration d'un document en langue franqaise destine 3 temoigner de I'acquis en radioimmunologie dans le domaine des analyses biologiques visant une haute sensibilite et une grande specificite. En effet, I'immunoanalyse avec marqueur est devenue un carrefour ou se cotoient des cc ecoles de pensee utilisant des definitions ou des demarches parfois differentes (voir bibliographie generate). En France, actuellement : ))

- o n peut remarquer d'une part une cc tradition RIA D largement inspiree des travaux anglosaxons (Berson et Yalow, Ekins, Rodbard, Abraham, Youden, Levey, Jennings, etc.) et developpee dans notre pays par les enseignants de I'1.N.S.T.N. et par differents responsables (Rosselin, Valleron, Bizollon, Crouzat-Reynes, Oustrin, Bohuon, Milhaud, Savoie, Renault, Dray, Gueris, Scholler, etc.). L'influence de I'equipe lyonnaise, sous I'impulsion . -;#' de Ch.-A. Bizollon, a ete decisive. On doit 3 cette equipe notamment, la tenue de colloques internationaux (1972, 1974,1976,1978,1981, 1984) et la mise en place des 1977 d'un programme de contrble de qualite national franqais en radioimmunologie. Par ailleurs, on doit au Pr Bizollon I'organisation en 1980 a 131.N.S.T.N.de Journees d'Etude sur les criteres de qualite et de contrble de qualite des dosages par liaison. ,$

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- d'autre part, il existe des textes de standardisation et des guides de recommandations elabores par les Societes savantes nationales et tout particulierement la Societe Fran~aisede Biologie Clinique. I1faut signaler notamment les travaux de Commissions comme celle de validation de techniques (President : A. Vassault) et celle d'immunoanalyse (President 1986 : R. Masseyeff). Dans ce domaine de recherche de qualite des analyses, il faut egalement mentionner les travaux de IIAssociation Franqaise de Normalisation (AFNOR), en relation avec I'organisation Internationale de Normalisation (ISO), ceux du C.E.R.M.A.B. (Centre d'Etudes des Reactifs et Materiels pour IIAnalyse en Biologie Clinique), structure associative regroupant Biologistes et Fabricants. On releve enfin au Journal Officiel des textes techniques sous la forme d'instructions (ex. : Instruction du 31 mai 1983 relative aux bonnes pratiques de laboratoire - B.P.L.) dans le domaine de la toxicologie experimentale.

logie ou en Biologie Clinique, ces documents ou bien ne sont pas redig& en franqais ou bien ont eu une diffusion aupres d'un public specialise ou bien comportent des notions parcellaires, inadaptees ou perimees en raison de I'evolution des tehniques. La Societe Fran~aisede Biophysique et de M6decine Nucleaire a tree en 1983 une commission spdcialisee, la Commission de Radioanalyse et Techniques Associees (CO.RA.T.A.), en lui fixant deux objectifs principaux :

- faire le point en radioimmunologie et dans les techniques dites associees (rdcepteurs cellulaires, proteines liantes)

- informer les biologistes interesses par 1'6volution de I'immunoanalyse, tous marqueurs confondus. La C0.RA.T.A. a juge utile I'elaboration d'un document de travail qui reponde en 1986 aux objectifs (detailles dans les tableaux I1et Ill), qui concernent essentiellement la standardisation des termes et des protocoles utilises pour la validation (ou la selection) des techniques et le contrble de qualite des analyses. TABLEAU ll Objectifs generaux du groupe de travail cc Fondernents de la qualite des dosages radioirnrnunologiques s Remarque preliminaire

Le terme de cc systeme analytique H recouvre la notion d'ensemble capable d'executer une analyse, qu'il s'agisse de reactifs (associes ou nondans une trousse) utilises dans un protocole experimental manuel ou d'instruments assurant de maniere plus ou moins automatisee des fonctions d'analyse et de contrdle.

1. Faire le point sur la maitrise de la qualite en radioimmunologie. 1.1 Lors de la selection d'un systeme analytique a partir de criteres de fiabilite

1.2 Par I'exercice d'actions correctives sur les reactifs et le protocole de dosage 1.3 Par I'instauration d'un contrble de qualit6 des analyses effectuees

2. Contribuer rS. la standardisation de I'immunoanalyse au sein de la Biologie Clinique

N.B. : ces objectifs concernent tous les biologistes, les fabricants de reactifs ou d'appareils ainsi que les organismes publics de regulation et de contrble (introduction de reactifs sur le marche, validation de techniques, etc.).

En r6sum6, s'il existe de nombreux documents concernant la qualit6 des dosages en radioimmunoTrait dlUnion no 3 - page 48

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NOUVELLES DE LA CORATA

TABLEAU Ill Objectifs intermediaires du groupe de travail 1. Au moment d'aborder les modalites de selection d'un systeme analytique A partir de criteres de fiabilite (acceptabilite). 1.1 Decrire les caracteristiques des dosages radioimmunologiques. 1.2 Relever les definitions des criteres utilises dans le contrble de qualite. 1.3 Decrire les methodes d'evaluation des differents types de manquement B la fiabilite. 1.4 Proposer des methodes pour comparer les performances de systemes analytiques. 2. Afin d'identifier I'origine d'une erreur et avant d'envisager une action corrective. 2.1 Apprecier le degre d'optirnisation du systeme analytique (cc assay design s). 2.2 Juger de I'influence de la qualit6 intrinseque des reactifs. 2.3 Relever I'ensemble des causes d'erreur. 2.4 Signaler les pieges courants en immunoanalyse. 2.5 Connaitre les performances des dosages radioimmunologiques en regard des criteres de praticabilite en appreciant une influence eventuelle sur la qualite des analyses. 2.6 Determiner I'interQt de I'automatisation. 2.7 Apprecier le degre d'optimisation des methodes de calcul. 3. Lors du contrdle des analyses.

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au long cours de la qualite ))

Le texte, soumis par le groupe de travail aux differents collegues pour critiques et amendements, a 6t6 conqu pour constituer un ouvrage de synthese, de lecture rapide, destine repondre A des preoccupations concretes. Sa mise en forme finale ne sera entreprise qu'apres le delai necessaire pour apporter les modifications proposees par la communaute scientifique.

COLLOQUE CORATA 1986 Ce colloque sur les actualites en immunoanalyse a ete annonce dans le no 2 de Trait d'Union. II est organise A Angers les 27 et 28 novembre 1986 conjointement par la Societe de MBdecine Nucleaire de I'ouest de la France et la CORATA. Place sous le haut patronage de M. le Directeur General de la Sante, il beneficie du parrainage des Societes Franqaises de Biologie Clinique, d'lmmunologie, de Therapeutique et Pharmacologie Clinique. Le programme comprend des sessions scientifiques, des ateliers, la presentation des posters (voir synopsis). Pour toute question relative au colloque, s'adresser aux secretariats : CORATA : Mme Y. FULLA Radio-analyse, HQpital Cochin 27, rue du Faubourg Saint-Jacques 75764 PARIS CEDEX 14 Tel. : 16 (1) 42.34.1 1.35 SMN OUEST : Mme F. GALLAND C.H.U. - 49040 ANGERS CEDEX TeI. : (16) 41.88.69.51

3.1 D6crire les methodes du contrdle permanent intralaboratoire. 3.2 D6crire les modalites du contrdle interlaboratoire. 3.3 Discuter sur des exemples concrets des performances de dosages radioimmunologiques en regard des critbres d'efficacite. 3.4 Contribuer I'etude du probleme des valeurs usuelles (normes de laboratoire).

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NOUVELLES DE LA CORATA ACTUALIT~SEN IMMUNOANALYSE = ANGERS

SYNOPSIS DU JEUDl 27.11.86

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LE MATlN

9h

ALLOCUTIONS D'OUVERTURE

IOh

ATELIER 6 selection de reactifs

1 SESSION EXPLORATION FONCTIONNELLE

debutants Ilh

12h

ATELIER 7 qualite des analyses au quotidien ATELIER 415 courbes d'etalonnage

recepteurs

DE LA

hormonaux

ATELIER 10 debutants anticorps monoclonaux

ATELIER 8 Seuil de decision en Biologie ,

' .$

13h

THYRO~DE

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SYNOPSIS DU VENDREDI 28.1 1.86

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LE MATlN

9h

ATELIER 3 Sl DA

SESSION

VlSlTE DE L'EXPOSITION SClENTlFlQUE PRESENTATION DES POSTERS

IOh METABOLISME PHOSPHOCALCIQUE

ATELIER 1 FIVETE

SESSION ATELIER 2 HEPATITE

1h

DOSAGE DES

MEDICAMENTS 2h

SESSION LA PAROLE EST AUX FABRICANTS

3h

Synthbse g6n6rale du colloque

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