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O4-6 Comparaison de deux séparateurs cellulaires pour le prélèvement de cellules souches périphériques
Session 4 - Nouvelles m6thodes de pr6paration des produits sanguins labiles qui nous ont s e r v i a appr6cier la stabilit6 d u plasma sont m a i n t e n u s au b o u t d ' u n a n apr6s cong61ation. Ces 6tudes m o n t r e n t que le plasma o b t e n u avec ce type de s6parateur est conforme aux sp6cifications d u plasma frais congel6 telles que d6finies d a n s les caract6ristiques. Des 6tudes compl6mentaires ont m o n t r 6 l'absence d'activation de certains facteurs de l'h6mostase et u n e b o n n e stabilit6 d u plasma d 6 m o n t r a n t qu'il conserve ses propri6t6s h6mostatiques essentielles.
04-5
75S
Moyenne
Mddiane Ecart-type
24,3 252 59 8 556 173 192 22,5 11.7 70 6 3,46 41,6 10,68
17,8 217 39 8 023 177 164 22,7 7 69 4 2,25 36,4 10,8
12,8 156 57 1 611 8 115 7,3 10 19 7,8 3,23 22,9 5,15
30,6 220 54 8 629 191 176 15,1 6.3 53,9 3.4 2,47 37,4 11,97
24,7 188 43 8 043 193 147 13,3 5 47,7 1,2 1,87 33,1 15,8
14,8 127 41 1 633 10 87 13 4,5 23,1 6.4 1,93 16,8 7,73
CMN dI GB (109/L) Pr6c plaq (109/L) CD34 (10s/L) Vol trait6 (mL) TPS manip (ran) Post plaq (109/L) Perte plaq (%) RDT GB (%) RDT C mono (%) Cont gran (%) CD34 (106/kg) RDT CD34 (%) CFUGM 104/kg AutoPBSC J2 Volume de cellules 3 mL
Prdl~vements de cellules souches sanguines sur Spectra Cobe F Villard, P C a b r e , M D h a u s s N P Bilcke, JJ H u a r t ETS Nord-Pas-de-Calais, BP 2018, 21, rue Camille-Gudrin, 59012 Lille cedex
La version 6 de la Spectra COBE n o u s d o n n e ta possibilit6 de pr61ever des cellules souches sanguines de faqon automatique. II n o u s a sembl6 int6ressant de p o u v o i r comparer, chez u n m 6 m e patient, u n premier recueil (J 1) avec l'ancien p r o g r a m m e (cellules mononuc166es) et u n deuxi~me recueil (J2) avec le n o u v e a u p r o g r a m m e AutoPBSC. Matdriel et mdthode 1 - Le recueil de cellules mononuc166es est r6alis6 de fa~on semi-automatique, sans modification d u facteur de s6paration ( p r o g r a m m e ~t500) avec l ' a n n e a u simple 6tage. La prog r a m m a t i o n : d6bit de pr61~vement, v o l u m e h traiter (2 vo16mies) et vitesse de c e n t r i f u g a t i o n est propos6e par la Spectra apr6s introduction d u poids, de la taille, d u sexe et de l'h6matocrite d u patient. Seule la couleur de la t u b u l u r e de collecte des cellules est surveill6e avec le colorgramme (H6matocrite 2 %) et ajust6e par des modifications d u d~bit de la p o m p e ~t plasma. 2 - Le recueil AutoPBSC est a u t o m a t i q u e avec u n a n n e a u d o u b l e 6tage. Pour la p r o g r a m m a t i o n , il est n6cessaire d ' i n troduire aussi le n o m b r e de globules blancs et le pourcentage de cellules mononuc166es. La collecte des cellules se fait par d6bordements (3 h 12) selon le n o m b r e de cellules mononuc166es d u patient. Deux parambtres p e u v e n t 6tre modifi6s le v o l u m e de pr616vement : p r o g r a m m e a 3 mL ( p r o g r a m m a b l e de 1 a 5) dans cette s6rie et le v o l u m e de r6cup6ration des cellules 7 mL ( p r o g r a m m a b l e de 2 ~t 20). Rdsultats
Transfus Clin Biol 1998 ; 5 (Suppl 1)
GB (10V/L) Prec plaq (109/L) CD34 (106/L) Vol trait6 (mL) TPS manip (ran) Post plaq (109/L) Perte plaq (~.) RDT GB (%) RDT C mono (%) Cont gran (c~) CD34 (1(P/kg) RDT CD34 (%) CFUGM (104/kg) n = 10 (CFUGM 104/kgn = 7)
Conclusion. Le p r o g r a m m e AutoPBSC apporte u n certain confort par son a u t o m a t i s m e et par la r6duction d u v o l u m e extracorporel (168 mL au lieu de 284 mL). Le v o l u m e de collecte est r6duit (10 mL x n o m b r e de d6bordements), avec le p r o g r a m m e cellules mononuc166es, il est a 150 mL. La perte en plaquettes est m o i n d r e p o u r le patient. Le temps de m a n i p u l a t i o n est 16gbrement a u g m e n t 6 (+15 minutes). Le r e n d e m e n t en CD 34 (moyenne) est h 41,6 % p o u r le p r o g r a m m e cellules mononuc166es et~ 37,4 % p o u r le prog r a m m e AutoPBSC. I1 serait int6ressant de continuer l'6tude en p r o g r a m m a n t u n v o l u m e de pr616vement a 4, voire ~ 5 mL afin de parfaire la comparaison.
04-6
Comparaison de deux sdparateurs cellulaires pour le prdl~vement de cellules souches pdriphdriques J S e b b a h 1, M A t a s s i 2, D O r a b i 2, F M o r i n 1, F C o u r t o i s 2 IETS AP-HP, site d'Avicenne, 125, route de Stalingrad, 93009 Bobigny ; 2ETS AP-HP, site de Beaujon, Clichy
76s
Session 4 - Nouvelles m6thodes de pr6paration des produits sanguins labiles
N o u s avons, d a n s cette 6tude r6trospective, compar6 deux s 6 p a r a t e u r s c e l l u l a i r e s , AS104 (Fr6s6nius) et Spectra (Cobe), p o u r le pr616vement de cellules souches p6riph6riques (CSP) collect6es en v u e d'autogreffe chez des patients atteints de pathologies h6matologiques. Matdriel : 31 patients (18 l y m p h o m e s , 11 my61omes, 2 leuc6mies aigu6s) d a n s deux centres de collecte de CSP sont pr61ev4s entre janvier et d6cembre 1997, soit u n total de 71 s6ances. Le groupe I est pr61ev6 sur AS104 (16 patients ; 33 s6ances) avec u n p r o g r a m m e automatique, le groupe II sur Spectra (15 patients ; 35 s6ances) avec u n p r o g r a m m e semiautomatique. Le c o n t e n u des CSP est 6valu6, dans u n centre u n i q u e , par le typage des cellules CD34+ en cytom6trie de flux et la culture des prog6niteurs (CFU-GM). Mdthode : les patients sont pr61ev6s en sortie d'aplasie apr6s mobilisation par chimioth6rapie et facteur de croissance (G-CSF). Le recueil des CSP d a n s les deux centres est standardis6 : les cytaph6r6ses sont d6but6es lorsque les cellules CD34+ circulantes sont sup6rieures ou 6gales a 20/~tL ; elles sont i n t e r r o m p u e s lorsque les cellules CD34+ collect6es sont suffisantes p o u r u n e ou deux autogreffes (seuil minimun pour une autogreffe : CD34+ sup6rieures 2 x 106/kg).
Nbre de masses trait6es Volume collect6 (mL) Rdt Lo+Mono (%) Poly Neutr (%) CD34+ (106/kg) CFU-GM (104/kg)
Groupe I 2,5 (l,5-3,8) 196 (101-290) 34,7 (14,5-58,2) 24,3 (9-76,9) 3,18 (0,06-16,3) 28.1 (0,1-201)
Groupe II 2,4 (1,2-3,1) 188 (96-225) 38 (12,1-60) 27,1 (3,5-56) 3,39 (0,33-25,3) 26,3 (0,9-296)
Conclusion : les deux s6parateurs cellulaires, utilis6s selon les m~mes crit6res standardis6s d a n s les deux centres, perm e t t e n t u n e collecte de CSP c o m p a r a b l e en termes de CD34+ et CFU-GM.
34, bd Jean-Monnet, BP 91115, 44011 Nantes cedex I ; 2Baxter, Biotech, Fenwal Trois cent quatre-vingt six CPA ont 4t6 pr61ev6s sur le site de Nantes sur u n s6parateur de cellules A m i c u s chez des d o n n e u r s a y a n t u n pr6compte de plaquettes compris entre 180 x 109/L et 388 x 109/L. Objectifs : 6tudier la fiabilit6 de la pr6vision d u postcompte de plaquettes chez le d o n n e u r ; 6tudier la fiabilit6 de la pr6vision de la quantit6 de plaquettes d a n s le CPA ; 6tudier le n o m b r e de CPA a y a n t u n n o m b r e de globules blancs r6siduels inf6rieur/t 1 106. N o u s avons s6par6 les d o n n e u r s en quatre groupes en fonction de leur n u m 6 r a t i o n de plaquettes :
Nombre de donneurs Prdcplaq(109/L) Temps (min) Vol sanguin trait4 (mL) Postc plaq (10~/L) Nbre pl cibl6es 10H Nbre plaq 10H 1,5 ~ 3,5 x 1()II % 3,5/t5,5 x 10" % >5,5x 1()II%
52 180/~200 91 4 491 130 5.0 4,9 8 90 2
69 201'h219 83 4 225 143 5.0 4.7 10 88 2
110 220h250 71 3 731 164 " 5,0 5,0 7 90 3
155 >250 60 3 276 201 5,3 5,1 4 85 11
Le temps est adapt6 en fonction d u n o m b r e de plaquettes d u d o n n e u r et d u d6bit ; ceci rend compte des diff6rences de temps m o y e n de chaque groupe. Conclusion : les d o n n e u r s a y a n t u n pr6compte entre 180 et 200 x 109/L p e u v e n t d o n n e r en aph6rbse au prix d ' u n temps plus long et d ' u n r e n d e m e n t inf6rieur. Le temps de collection et le v o l u m e a traiter d i m i n u e n t si le pr6compte plaquettaire d u d o n n e u r est 61ev6. La pr6diction de collection est fiable ; 97 % des CPA ont u n n o m b r e de globules blancs r6siduels inf6rieur ~ 1 x 106.
P4-2
Difficultds de mise au point d'un syst~me de collecte par aphdr~se P4-1
Comparaison des rdsultats de CPA prdIevds sur le sdparateur Amicus en fonction des prdcomptes plaquettaires des donneurs c Adjou 1, M MoyoW, C Thomas 2, A Denis 2, JY M u l l e r 1 lETS Loire-Atlantique-Vendde, site de Nantes,
M Sandu, V H a f n e r Centre municipal de transfusion sanguine, 24, A, sector 1, str Braziliei, 71221 Bucarest, Roumanie Le n o u v e a u cadre legislatif r o u m a i n , concernant la collecte et l'utilisation de sang, a permis de profonds c h a n g e m e n t s d a n s le syst6me transfusionnel. La poche plastique se substitue totalement au r6cipient de collecte en verre, le d6pis-
Transfus Clin Bio11998 ; 5 (Suppl 1)
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Moyenne
Mddiane Ecart-type
24,3 252 59 8 556 173 192 22,5 11.7 70 6 3,46 41,6 10,68
17,8 217 39 8 023 177 164 22,7 7 69 4 2,25 36,4 10,8
12,8 156 57 1 611 8 115 7,3 10 19 7,8 3,23 22,9 5,15
30,6 220 54 8 629 191 176 15,1 6.3 53,9 3.4 2,47 37,4 11,97
24,7 188 43 8 043 193 147 13,3 5 47,7 1,2 1,87 33,1 15,8
14,8 127 41 1 633 10 87 13 4,5 23,1 6.4 1,93 16,8 7,73
CMN dI GB (109/L) Pr6c plaq (109/L) CD34 (10s/L) Vol trait6 (mL) TPS manip (ran) Post plaq (109/L) Perte plaq (%) RDT GB (%) RDT C mono (%) Cont gran (%) CD34 (106/kg) RDT CD34 (%) CFUGM 104/kg AutoPBSC J2 Volume de cellules 3 mL
Prdl~vements de cellules souches sanguines sur Spectra Cobe F Villard, P C a b r e , M D h a u s s N P Bilcke, JJ H u a r t ETS Nord-Pas-de-Calais, BP 2018, 21, rue Camille-Gudrin, 59012 Lille cedex
La version 6 de la Spectra COBE n o u s d o n n e ta possibilit6 de pr61ever des cellules souches sanguines de faqon automatique. II n o u s a sembl6 int6ressant de p o u v o i r comparer, chez u n m 6 m e patient, u n premier recueil (J 1) avec l'ancien p r o g r a m m e (cellules mononuc166es) et u n deuxi~me recueil (J2) avec le n o u v e a u p r o g r a m m e AutoPBSC. Matdriel et mdthode 1 - Le recueil de cellules mononuc166es est r6alis6 de fa~on semi-automatique, sans modification d u facteur de s6paration ( p r o g r a m m e ~t500) avec l ' a n n e a u simple 6tage. La prog r a m m a t i o n : d6bit de pr61~vement, v o l u m e h traiter (2 vo16mies) et vitesse de c e n t r i f u g a t i o n est propos6e par la Spectra apr6s introduction d u poids, de la taille, d u sexe et de l'h6matocrite d u patient. Seule la couleur de la t u b u l u r e de collecte des cellules est surveill6e avec le colorgramme (H6matocrite 2 %) et ajust6e par des modifications d u d~bit de la p o m p e ~t plasma. 2 - Le recueil AutoPBSC est a u t o m a t i q u e avec u n a n n e a u d o u b l e 6tage. Pour la p r o g r a m m a t i o n , il est n6cessaire d ' i n troduire aussi le n o m b r e de globules blancs et le pourcentage de cellules mononuc166es. La collecte des cellules se fait par d6bordements (3 h 12) selon le n o m b r e de cellules mononuc166es d u patient. Deux parambtres p e u v e n t 6tre modifi6s le v o l u m e de pr616vement : p r o g r a m m e a 3 mL ( p r o g r a m m a b l e de 1 a 5) dans cette s6rie et le v o l u m e de r6cup6ration des cellules 7 mL ( p r o g r a m m a b l e de 2 ~t 20). Rdsultats
Transfus Clin Biol 1998 ; 5 (Suppl 1)
GB (10V/L) Prec plaq (109/L) CD34 (106/L) Vol trait6 (mL) TPS manip (ran) Post plaq (109/L) Perte plaq (~.) RDT GB (%) RDT C mono (%) Cont gran (c~) CD34 (1(P/kg) RDT CD34 (%) CFUGM (104/kg) n = 10 (CFUGM 104/kgn = 7)
Conclusion. Le p r o g r a m m e AutoPBSC apporte u n certain confort par son a u t o m a t i s m e et par la r6duction d u v o l u m e extracorporel (168 mL au lieu de 284 mL). Le v o l u m e de collecte est r6duit (10 mL x n o m b r e de d6bordements), avec le p r o g r a m m e cellules mononuc166es, il est a 150 mL. La perte en plaquettes est m o i n d r e p o u r le patient. Le temps de m a n i p u l a t i o n est 16gbrement a u g m e n t 6 (+15 minutes). Le r e n d e m e n t en CD 34 (moyenne) est h 41,6 % p o u r le p r o g r a m m e cellules mononuc166es et~ 37,4 % p o u r le prog r a m m e AutoPBSC. I1 serait int6ressant de continuer l'6tude en p r o g r a m m a n t u n v o l u m e de pr616vement a 4, voire ~ 5 mL afin de parfaire la comparaison.
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Comparaison de deux sdparateurs cellulaires pour le prdl~vement de cellules souches pdriphdriques J S e b b a h 1, M A t a s s i 2, D O r a b i 2, F M o r i n 1, F C o u r t o i s 2 IETS AP-HP, site d'Avicenne, 125, route de Stalingrad, 93009 Bobigny ; 2ETS AP-HP, site de Beaujon, Clichy
76s
Session 4 - Nouvelles m6thodes de pr6paration des produits sanguins labiles
N o u s avons, d a n s cette 6tude r6trospective, compar6 deux s 6 p a r a t e u r s c e l l u l a i r e s , AS104 (Fr6s6nius) et Spectra (Cobe), p o u r le pr616vement de cellules souches p6riph6riques (CSP) collect6es en v u e d'autogreffe chez des patients atteints de pathologies h6matologiques. Matdriel : 31 patients (18 l y m p h o m e s , 11 my61omes, 2 leuc6mies aigu6s) d a n s deux centres de collecte de CSP sont pr61ev4s entre janvier et d6cembre 1997, soit u n total de 71 s6ances. Le groupe I est pr61ev6 sur AS104 (16 patients ; 33 s6ances) avec u n p r o g r a m m e automatique, le groupe II sur Spectra (15 patients ; 35 s6ances) avec u n p r o g r a m m e semiautomatique. Le c o n t e n u des CSP est 6valu6, dans u n centre u n i q u e , par le typage des cellules CD34+ en cytom6trie de flux et la culture des prog6niteurs (CFU-GM). Mdthode : les patients sont pr61ev6s en sortie d'aplasie apr6s mobilisation par chimioth6rapie et facteur de croissance (G-CSF). Le recueil des CSP d a n s les deux centres est standardis6 : les cytaph6r6ses sont d6but6es lorsque les cellules CD34+ circulantes sont sup6rieures ou 6gales a 20/~tL ; elles sont i n t e r r o m p u e s lorsque les cellules CD34+ collect6es sont suffisantes p o u r u n e ou deux autogreffes (seuil minimun pour une autogreffe : CD34+ sup6rieures 2 x 106/kg).
Nbre de masses trait6es Volume collect6 (mL) Rdt Lo+Mono (%) Poly Neutr (%) CD34+ (106/kg) CFU-GM (104/kg)
Groupe I 2,5 (l,5-3,8) 196 (101-290) 34,7 (14,5-58,2) 24,3 (9-76,9) 3,18 (0,06-16,3) 28.1 (0,1-201)
Groupe II 2,4 (1,2-3,1) 188 (96-225) 38 (12,1-60) 27,1 (3,5-56) 3,39 (0,33-25,3) 26,3 (0,9-296)
Conclusion : les deux s6parateurs cellulaires, utilis6s selon les m~mes crit6res standardis6s d a n s les deux centres, perm e t t e n t u n e collecte de CSP c o m p a r a b l e en termes de CD34+ et CFU-GM.
34, bd Jean-Monnet, BP 91115, 44011 Nantes cedex I ; 2Baxter, Biotech, Fenwal Trois cent quatre-vingt six CPA ont 4t6 pr61ev6s sur le site de Nantes sur u n s6parateur de cellules A m i c u s chez des d o n n e u r s a y a n t u n pr6compte de plaquettes compris entre 180 x 109/L et 388 x 109/L. Objectifs : 6tudier la fiabilit6 de la pr6vision d u postcompte de plaquettes chez le d o n n e u r ; 6tudier la fiabilit6 de la pr6vision de la quantit6 de plaquettes d a n s le CPA ; 6tudier le n o m b r e de CPA a y a n t u n n o m b r e de globules blancs r6siduels inf6rieur/t 1 106. N o u s avons s6par6 les d o n n e u r s en quatre groupes en fonction de leur n u m 6 r a t i o n de plaquettes :
Nombre de donneurs Prdcplaq(109/L) Temps (min) Vol sanguin trait4 (mL) Postc plaq (10~/L) Nbre pl cibl6es 10H Nbre plaq 10H 1,5 ~ 3,5 x 1()II % 3,5/t5,5 x 10" % >5,5x 1()II%
52 180/~200 91 4 491 130 5.0 4,9 8 90 2
69 201'h219 83 4 225 143 5.0 4.7 10 88 2
110 220h250 71 3 731 164 " 5,0 5,0 7 90 3
155 >250 60 3 276 201 5,3 5,1 4 85 11
Le temps est adapt6 en fonction d u n o m b r e de plaquettes d u d o n n e u r et d u d6bit ; ceci rend compte des diff6rences de temps m o y e n de chaque groupe. Conclusion : les d o n n e u r s a y a n t u n pr6compte entre 180 et 200 x 109/L p e u v e n t d o n n e r en aph6rbse au prix d ' u n temps plus long et d ' u n r e n d e m e n t inf6rieur. Le temps de collection et le v o l u m e a traiter d i m i n u e n t si le pr6compte plaquettaire d u d o n n e u r est 61ev6. La pr6diction de collection est fiable ; 97 % des CPA ont u n n o m b r e de globules blancs r6siduels inf6rieur ~ 1 x 106.
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Difficultds de mise au point d'un syst~me de collecte par aphdr~se P4-1
Comparaison des rdsultats de CPA prdIevds sur le sdparateur Amicus en fonction des prdcomptes plaquettaires des donneurs c Adjou 1, M MoyoW, C Thomas 2, A Denis 2, JY M u l l e r 1 lETS Loire-Atlantique-Vendde, site de Nantes,
M Sandu, V H a f n e r Centre municipal de transfusion sanguine, 24, A, sector 1, str Braziliei, 71221 Bucarest, Roumanie Le n o u v e a u cadre legislatif r o u m a i n , concernant la collecte et l'utilisation de sang, a permis de profonds c h a n g e m e n t s d a n s le syst6me transfusionnel. La poche plastique se substitue totalement au r6cipient de collecte en verre, le d6pis-
Transfus Clin Bio11998 ; 5 (Suppl 1)