Quelques effets a moyen terme du. Lindane sur les enzymes microsomales du foie chez le rat

Fd Cosmn.

Toxicol.

Vol. 13. pp. 43740.

Pcrgamon

Press 1975. Printed

in Great

Britain

QUELQUES EFFETS A MOYEN TERME SUR LES ENZYMES MICROSOMALES CHEZ LE RAT

DU. LINDANE DU FOIE

M. A. P~LISSIER, PH. MANCHON, S. ATTEBA et R. ALBRECITT Laboratoire

de Biologie du Conservatoire National des Arts et MCtiers et Imtitut Technique de I’Alimentation, 75 141 Paris Cedex 03, France (Recu

le 6 dkcembre

Scientijique

et

1974)

R&um&Nous incorporons dam le rigime de rats m%les du lindane a raison de 120 ou 240ppm. Nous mesurons aprbs 4 ou 8 semaines de traitement I’activite de plusieurs enzymes microsomales. Les substrats de ces enzymes sont g la fois de type I ou II, hydro- ou liposolubles, subissant une oxydation ou une reduction. Le lindane est un inducteur de ces enzymes. Nous constatons que I’ivolution de I’induction et son amplitude, au tours du temps de traitement, varient avec le substrat utilist. Ces modifications enzymatiques sont assoc%es g des augmentations du poids du foie et des reins et pourraient i%trele reflet d’un mtcanisme de dbtoxication. . Abstract-The activities of several microsomal enzymes have been determined in male rats fed a diet containing 120 or 240 ppm Iindane for 4 or 8 wk. The substrates were of type I or II, water- or liposoluble, undergoing oxidation or reduction. Lindane acted as an inducer of these enzymes and it was shown that the development and extent of the induction during the treatment period varied with the substrate used. These enzymatic changes were associated with increases in the weights of the liver and kidneys and may have been a reflection of a detoxication mechanism.

INTRODUCTION une alimentation Cquilibrke dont nous connaissons la Le lindane (isomire gamma de l’hexachlorocyclocomposition. Le choix des substrats, dont nous hexane) est surtout utilik pour la protection des ttudions le mktabolisme, repose sur diverses consemences et des sols contre divers parasites soutersidkrations. Les substrats des enzymes microsomales rains. Ce pesticide a une toxicit& modtrke pour les sent class& en deux types suivant le genre de mod& mammiferes. A long terme, la dose saris effet nocif cation qu’ils exercent sur le spectre d’absorption du (no-effect leuel) se situerait entre 25 et 50ppm dans P-450 (Remmer, &he&man, E&brook, Sasame, Gill’alimentation chez le rat (Herbst et Bodenstein, 1972). lette, Narasimhulu, Cooper et Rosenthal, 1966). Nous On sait que de trts nombreuses substances’ont la utilisons done g la fois des substrats de type I (aminopropriCt& d’induire (parfois d’inhiber) les enzymes res- pyrine) et de type II (aniline). D’autre part, un travail ponsables du mCtabolisme des molCcules exogknes et antkrieur nous suggkrait que l’orientation du mktabode certains constituants physiologiques (Albrechf lisme, sous l’effet d’un traitement, pouvait dtpendre du w-act&e de solubilitk de la moltcule exogkne 1972; Conney, 1967). En particulier, il est bien itabli que divers insecticides organochlor&s induisent les (Albrecht, Manchon et Lowy, 1973). Nous choisisenzymes microsomales likes au cytochrome P-450 sons des substrats hydrosolubles (aminopyrine, Bor(Albrecht et Manchon, 1974; Fouts, 1970; Street, deaux S) et liposolubles (BHT, Jaune de Beurre). En&, nous Ctudions des rtactions d’oxydation 1969). Ainsi, une dose unique de 60mg de lindane/kg (aminopyrine, aniline, BHT) et de rkduction (Bora&l&e les mCtabolismes du paraoxon, de la phtna&tine, de la nikkthamide et de l’hexobarbital dans un deaux S, Jaune de Beurre). surnageant postmitochondrial de foie chez le rat (Ghazal, Koransky, Portig, Vohland et Klempau, 1964). Plus rtcemment, Chadwick, Cranmer et PeoMETHODES EXPERlMENTALES ples (1971) ont montrk que le traitement quotidien Animaux et traitement de rats au sevrage avec 2 mg de lindane per OS penNous travaillons avec des rats miles de souche dant 14 jours (soit probablement environ 15 mg/kg/ jour) induit la O-dkmkthylase du p-nitroanisole et Wistar CF provenant d’un tlevage g flore contrblke. Nous recevons les animaux au sevrage B 18-19 jours. l’hydrolyse oxydative de I’EPN (&thyl-0-(4-&oPendant une semaine, nous leur donnons une prophtnyl) ph&nylphosphonothioate) dans un homogknat vende commerciale (biscuits “Extralabo”) puis durant total de foie. Les exp&riences que nous prtsentons dans cet deux semaines un rkgime semisynthktique Cquilibrk afticle constituent un travail prkliminaire pour une que nous prtparons au laboratoire contenant 18,2x (w/w) de protkines (Albrecht et Manchon, 1973). Les ttude prkcise de l’influence du lindane sur le m&&oanimaux sont ensuite trait& pendant 4 ou 8 semaines lisme des substances exogknes dans les microsomes par du lindane. Nous incorporons alors le pesticide hkpatiques. On sait l’importance de l’ttat nutritionnel sur l’intensitk de ce m&abolisme (Sosa-Lucero, de la dans le rkgime huilibrb I raison de 120 ou 240ppm de lindane pur. Ces quantitbs sont calculks de Iglesia, Lumb et Feuer, 1973); nos animaux rewivent 437

438

M. A. PBLIWER, PH. MANCHON, S. AI-EEA et R. ALBRECHT

maniereque chaquerat ingereenviron 5 ou IV/, de la DLs,, per OSpar jour. Le produit contient 99% de lindane; lesimpuretessont constitutespar divers isomeresde I’HCH dont le principal est l’alpha (Socitte Pepro, Lyon). Aprts 16-18h de jeQne,nous pesonset sacrifions les animaux par decapitation.Les foie, coeur, reins et surrenalessont preleves,laves et peds. Nous homogtneisons le foie, avectrois volumesde saccharose (425M), refroidi a l“Ultra Turrax”, pendant 45 sec.Nous centrifugeonsa 125OOgpendant 15min a +2”C. Nousrecueillonsle liquide surnageantqui est exemptde mitochondries.Nous obtenonsensuitedes microsomes par coprecipitationavec des ions Ca’+ et centrifugations,selonla techniquequ nous avons d&rite (Albrecht, Pelissier, Manchon et Rospars, 1973).Nous determinonsla teneur en proteinesde cettepreparationen appliquantla methodede Lowry, Rosebrough,Farr et Randall (1951).

6,66mM-Cl,Mg; 25 mM-glucose-6-phosphate; 91 mr+ NADP; 30,8mu-KCI; 1mM-EDTA; 43 UI de glucose-6-phosphate d­drogenase/ml. Les concentrations de colorantssont 0,2mu pour le Bordeaux S et 902 mu pour le Jaunede Beurre.La quantite de surnageantpostmitochondrialequivauta 33,3mg foie/ml (BordeauxS) ou 6,7m&nl (Jaunede Beurre).L’incubation a 37°Cest men&ependant 45min en enceinte ouverte pour le Jaunede Beurreet 30min en anabobiose stricte pour le Bordeaux S. Apres defecation par de l’acide trichloracktique, nous mesuronsla quantite de colorant disparupar spectrophotometrie ii 52Onm. Riductase

NADPH-cytochrome c. Nous determinonsl’activite de cette enzymeselonla technique que nousavonsdecrite (Albrecht et Manchon, 1973). La quantite de microsomes Bquivauta 1,l mg foie/ml. Analyse statistique

Les tableaux qui prtsentent nos &ultats sont Ctablispar desm&odes derides de l’analysede la variance(Schwartz, 1966).Ils indiquent des resultats moyenssuivisdune valeui estimeede l&art type sur la moyennecalculCa partir de la variancecommune a l’ensembledes groupes de l’exptrience. Pour diminuer au mieux la varianceresiduellenous utilisonsla methodedesblocs completsavec repetition. Le calcul du poids relatif moyen desorganeset de leur &cart-typeest obtenu par analysede la covariante. Nous comparonsles moyennesdesrats trait& au lindane a cellesdes temoins de la maniere suivante: (1) Comparaisondesdeux moyennes(120/240ppm) chezles trait& et (2) si ces moyennesne different pas signilicativement (P > 0,05),nouscomparonsl’ensembledesanimaux trait& (120+ 240ppm)aux temoins.

Activitt! enzymatiques

Toutes les me&es d’activites enzymatiquessont effechkesen doubleou en triple. OxygPnases microsomales. Nous mesuronsl’activite .des oxygenasesapres incubation de 15min avec agitation dun milieu contenant: 83,5mM-tampon PO&,Na/PO.+HK, a pH 7,4; 8,35mM-nicotinamide; 6,66n-n+Cl,Mg; 2,5mM-glucose-6-phosphate; 1muNADP; I,2 UI de glucosed-phosphatedeshydrogenase/mlou “fraction soluble”correspondanta 17mg foie/ml.Lesconcentrationsdessubstratssent 1,33mu pour l’aminopyrineet le BHT et 5 mu pour l’aniline. La quantite de microsomeshtpatiques Cquivaut a 25mg foie/ml. Nous incubonsa 37°C avec une vive agitation pendant 15min. La N-demethylation de l’aminopyrine est dttermincepar la formation de Caminoantipyrine(Gilbert et Golberg, 1965).Nous mesuronsl’activite de l’oxydasedu BHT par l’apparition de BHT-alcool (Gilbert et Golberg, 1967).Nous tvaluons l’hydroxylation de RESULTATS l’anilinepar la formation de p-aminophenol(Imai, Ito Caractckstiques des animaux et Sato, 1966). Azort!ductases du Bordeaux S et du Jaune de Beurre. Quatre semaines d’administrationde lindaneabaisNous mesuronsl’activite de l’azorkluctase apres sentleg&ementla croissance ponderaledesrats (Tabincubation de surnageant postmitochondrial leau l), particulibrementchez ceux qui recoivent la (125009) dans un milieu contenant: 50mWampon plus forte quantite (11% du poids au sacrifice).Le P04H2Na/P04HK2 a pH 7,5; 20rnr+nicotinamide; poids relatif du foie est augment6de manitre a peu Tableau 1.

Poids

corporel

et poids

relatif

DurC du lraitemenl (semaines) Poids corporel

(g)

4 8

Poids relalif du foie (g0OOg) du coew (g/loOg) des reins (g/lOOg) dcs surrhal&

(m&w

Concn des prolCines foie)

g)

(g/lOOg

-

4 8 4 8 4 8 4 8 4 8

des organes

des rats

nourris

0 (l6moins) Nombre d’animaux..

avec

un rPgime

contenant

du lithne

I20

240

I2

6’

6

291.3 f 1.21 376 f IO,4

292 f IO.2 374 * 14.8

265 f 10,2* 360 f 14.8

.

4, I6 3.66 0.32 0.30 0.92 0.80 8.66 7.79 3,23 4.87

f f f * f f f f f i

0.070 0,079 0,006 0,005 0,020 0,077 0,490 0,401 0,089 0,116

4.47 f O.lW 3.99*0.111* 0.33 f 0,084 0.32 f 0,067 LO&+ 0.029** d94 I6109** 8.80 i 0,693 ‘8.91 i 0,568 3.41 f 0.125 4,59 f 0,164

4.80 4.34 0.32 0.31 I.21

f f f f f

OJOO0, I 1 I0,084 0,067 0.029.’

9.04 8.84 3,ll 5.03

f 0.693 zk 0,568 f 0,125 * 0,164

I;06I 0.109**

tMoyenne, &art-type sur la moyenne calouk a partir de la variance commune; les valeurs marqkes avec des astkrisques diRerentsignificativement destbmoins:*g < 405;.**P < 401.

Effets du lindane sur les enzymes microsomales Tableau 2.

Activite’

des oxygPnases

microsomales

des rats nourris

avec un rbgime

Activitk

Duke du waitemcnt (semaines)

Enzymes

Nombre d’animaux..

Oxydas

de I’aminopyrine

0 (ICmoins)

120

I2

6

de 4-nminoantipyrine/lOO . 23.6 f 2.85 51.8 17.4 f 1.09 27.0 nmoles de BHT-alcuol/lOO f 10.9 271 145.5 f 5.16 184.2

4

8

du BHT

228

4

8

nmoles de p-aminoplhol/lOO Hydroxylase

de l’anilinc

4

24.0 + 238 16.7 f I.25

8

contenant

du lindane

enzymatiquet chcz les rats trait& lindane (ppm)

amols

N-Dkn6thylaw

439

au

240 6

.

me

micmsomnlalmin

pmlhes f 4& 59.0 + f 1,5435.5 + m g pmtdiies micmsomnles/min + 15.4. 306 + + 7.30.. 195.7 f m g pr&iner

4.03** 1.54**

*

15.4.. 7.30..

micmsomales/nh

36.3 f 3.36.. 28.2 f 1.77’.

425 f 3.36” 27.5 f 1.779.

tMoyenne, &art-type sur la moyenne calculi B partir de la variance commune; les valeurs marqutes avec des asttrisques difkent significativement des tkmoins: *P < 405; **P < 0.01.

prks identique aprtk 4 et 8 semainespour chacune L’acctltration du mktabolismede ces substances desdoses.Now remarquonsque cette hypertrophie exogknesestassocike21une induction de la rtductase est fonction de la quantitk de lindane ingkrke pour NADPH-cytochrome c microsomale(Tableau 3): 4 une duke de traitement donrke: aprks 4 semaines, semaines, 23%; 8 semaines, 24% L’augmentationserl’augmentationest de 7% avec 120ppm et 15%avec ait peut Ctre encore plus importante avec la dose 24Qppm;apres8 semaines respectivement9 et 19%. ClevCede lindane. Nous retrouvons lesmi?mes effets sur le poids relatif Le pesticideinduit l’azorkdu&asedu Bordeaux S desreins (k 4 semaines,15% avec 120ppm et 32% (Tableau3) seulementapr&s4 semaines de traitement . avec 240 ppm; g 8 semaines:17%avec 120 ppm et (30%). L’azorkductasedu Jaunede Beurre serait peu in32%avec 240 ppm). Le lindane ne parait modifier sensiblementni le fluenckepar le lindane(Tableau3). Nousremarquons poids du coeur et des surrknalesni la concentration ‘cependantune diminution (18%) aprks 8 semaines avec la dosela plus faible; ce rksultat devrait ttre desprotkinesmicrosomales du foie (Tableau 1). Activite’s enzymatiques confhm~. La N-dkmkthylasede l’aminopyrine(Tableau2) est trts fortement induite par le traitement au pesticide. DlSCUSSlON Aprts 4 semaines, Paugmentationest de 135%et ne diffkre pas suivant les doses.Aprks 8 semaines,l’inA moyenterme,le lindaneincorporkdansle rkgime duction s’intlkchit d’autant plus que la quantitk de g des dosescorrespondantg 10% (240ppm) et 5% lindanedu rkgimeest faible(120ppm, 55%; 240ppm, (120ppm) de la DL,, modfie plusieurscaractkres biologiqueschezle rat. 104%). Avec nos conditions expkrimentales,nous confirNous notons que l’oxydase du BHT (Tableau 2) est induite de man&e k peu prks semblableaprks monsquele lindaneest un inducteurdes“oxygCnase$ 4 (27%) et 8 semaines(31%) de traitement. L’aug- g fonction mixte” danslesmicrosomeshtpatiques.II mentationd’activitk enzymatiquene dkpendpassen- acdltre le mktabolismeti la fois d’un subs&atde type I (aminopyrine)et de type II (aniline). 11auginente siblementde la dose. Nous observonsCgalementune induction de l’hyd- la vitessed’oxydation de mokculesliposoluble(BHT) roxylase de l’aniline (Tableau 2): 4 semaines,640/,; et hydrosoluble(aminopyrine).Cependant,l’kvolution 8 semaines,67%. Commepour l’oxydase du BHT, au tours du temps de l’induction des oxygknases I’augmentationd’activitk ne para^itpaslike g la quan- differesuivant lessubstrats.Alors que l’augmentation tit& de lindanedansle rkgirne. d’activitk de la N-dkmtthylase de l’aminopyrine est Tableau3.

ActivitP

de la rdductase

NADPH-cytochrome

c et des azoriductases du lindane Activili:

D&e du traitement (semaines)

Enzymes

R6ductas

NADPH-cytochrome

Azoriductase

du Bordeaux

AzorCductas

du laune

c

4

8

S

4

de Bcurre

4 8

8

des rats nourris

enzymatiquet chez les rats trail& lindane (ppm)

0 (ICmoins) Nomhrc d’animaux...

I2 pm&s de cyioehmme 7.41 f 0,471 4.24 f 0.254 nmoles I55 f 922 f 173 -I 119.5 f

de colorant 15.8 8.8 I 13,3 5.88

avec un rPgime

contenant

au

I20

240

6

6

rdduit/lOO m g protdiaes 8.50 f 0.665 4,76 f 0,359

metabolisd/lOO I87 f 89 f 209 f 97.8 f

m g pmtdines 224 I25 18.9 8.32’

miem~~mnles/mio 9.70 f 0.665” 5.74 * 0,359.’ micmmnulcs/min 216 f 224’ 105 * 12.5 202 f IS.9 128.3 k 8.32

tMoyenne,&art-type surla moyenne calculbBpartir dela variancecommune; lesvaleursmarqukes avecdesasttrisques dif&ent significativement destkmoins:*P -Z 405; **P c 0,Ol.

440

M.

A. P~LLWER,

PH.

MANCHON,

S. AXEBA et R. ALBRECHT

REFERENCES maximumavant 4 semaines de traitementpuisdecroit d’autantplusvite quela quantite de lindaneest faible, Albrecht, R. (1972). Quelques aspects des processus biochil’induction de l’oxydasedu BHT ou de l’hydroxylase miques intervenant au niveau des enzymes microsomales de l’aniline demeurea peu presconstanteentre 4 et hepatiques. Thhrapie, 27, 75 I. 8 semaines;de plus elle est peu dependantede la Albrecht, R. et Manchon, Ph. (1973). Influence de la teneur en vitamines hydrosolubles du regime et dun traitement quantite d’insecticide. Nos resultatsconcernantla reductiondesazoiques par un barbituriquesur quelqueseffetsdescolorants azdiques.Anrl.Nutr. Aliment. 27, 191. sont moinsclairs. Le lindane ne serait inducteur de l’azoreductasedu Bordeaux S qu’a court terme et Albrecht, R. et Manchon, Ph. (1974). Influence de I’environnement sur le metabolisme des molecules exogenes dans peutttre inhibiteur de l’azoreductasedu Jaune de les microsomes du foie. Ann. Nutr. Aliment. 28. 351. Beurre. Albrecht, R., Manchon, Ph. et Lowy. R. (1973). Influence Nous remarquons que la reductase NADPHde la teneur en proteines du regime sur quelques egets cytochrome c, bien qu’induite par le traitement au du Bordeaux S et du Jaune de Beurre chez le rat. Fd lindane,ne parait pas pouvoir expliquer a elle seule Cosrnrr. Tosicol. 11, 383. l’accelerationdu metabolismedessubstratsexogenes Albrecht, R., Pelissier, M. A., Manchon, Ph. et Rospars, J. P. (1973). Obtention de microsomes par coprecipidans les microsomes.Ainsi, la formation d’aminotation avec Cal+ et mise en evidence d’induction enzyantipyrine, a partir de l’aminopyrine, est dotiblee matique par le phenobarbital. Cr. S&UC. Sot. Biol. 167, alors que la reduction du cytochrome c3+ par le 1552. NADPH estseulementaugmentee de 30%.Le lindane Chadwick, R. W., Cranmer, M. F. & Peoples, A. J. (1971). moditie vraisemblablementd’autres composantsdu Comparative stimulation of yHCH metabolism by presystememicrosomalde transport d’electrons.Nous treatment or rats with yHCH, DDT and DDT + yHCH. nousproposonsd’ailleursd’etudierulterieurementplus Toxic. appl. Pharmnc. 18, 685. finement le mecanismede l’induction enzymatique Chadwick, R. W. & Freal, J. J. (1972). Comparative accelpar le lindane.SelonChadwicket al. (1971)et Kolmoeration or lindane metabolism to chl’orophenols by pretreatment of rats with lindane or with DDT and lindane. din-Hedman(1972),l’insecticideaugmentela quantite Fd Cosmet. Tosicol. 10, 789. deP-450danslesmicrosomes du foie maisil pourrait aussiinduire la reductaseNADPH P-450,augmenter Conney, A. H. (1967). Pharmacological implications of microsomal enzyme indtiction. Pharmac. Rev. 19, 317. la liaisondessubstratsau P-450 etc. Fitzhugh, 0. G., Nelson, A. A. & Frawley. J. P. (1950). D’autre part, il serait interessantde determinerla The chronic toxicities of technical benzene hexachloride quantite minimumde lindane faisantapparaitre une and its alpha, beta and gamma isomers. J. Pharmac. exp. modificationde l’activite desenzymesmicrosomales. Ther. 100, 59. Sagit-il effectivementdune dosebien inferieurea la Fouts, J. R. (1970). Some effects or insecticides on hepatic microsomal enzymes in various animal species. Reuue no-effect level commesemblel’indiquer le travail de can. Biol. 29, 377. Kolmodin-Hedman(1972)? Le lindaneaugmentele poids relatif du foie. Nous Ghazal, A., Koransky, W., Jr., Portig, J., Vohland, H. N. u. Klempau, I. (1964). Beschleunigung von Entgiftungsconfirmonsainsilesobservationsde Fitzhugh, Nelson reaktionen durch verschiedene Insecticide. Naunynet Frawley (1950);maiscontrairementa cesauteurs, Schmiedebergs Arch. exp. Path. Pharmak. 249, I. nousnotonsaussiune augmentationdu poids relatif Gilbert, D. & Golberg, L. (1965). Liver response tests. III. des reins. Nous constatonsque ces hypertrophies Liver enlargement and stimulation of microsomal prodependentde la quantite d’insecticideajoutte dans cessing enzyme activity. Fd Cosmet. Toxicol. 3, 417. le regime,donede la quantitejournalitre ingeree.Le Gilbert, D. & Golberg, L. (1967). BHT oxidase. A liverphtnomenedoit &tre prtcoce car les augmentations microsomal enzyme induced by the treatment of rats with butylated hydroxytoluene. Fd Costnet. Toxicol. 5, de poids evoluent peu entre 4 et 8 semainespour 481. chacunedesdoses. Nous pensonsque l’on peut considererl’hypertro- Herbst, M. et Bodenstein. G. (1972). La toxicologic du lindane. In Lindane. Edited bv E. Ulman. p. 25. Verlag phie du foie, provoquee par le lindane, comme un K. Schillinger, Freiburg. mecanisme de dttoxication. En effet, on observeune Imai.Y.. Ito. A. & Sato.R. 119661 Evidencefor biochemiproliferationdu reseauendoplasmique sansalteration caily different types or vesicles in the hepatic microsomal histopathologique(Herbstet Bodenstein,1972).L’hyfraction. J. Biochem. Tokyo 60, 417. pertrophie est associeea une induction des “oxy- Kolmodin-Hedman, B. (1972). Effets biologiques observes genases a fonction mixte” desmicrosomessansqu’il chez des travailleurs exposes professionnellement a y ait de modificationde l’activite de la glucosed-phos- divers insecticides chlorts. Symposium international du lindane. p. 62. CIEL, Bruxelles. phatase(resultat non publie). Selon Gilbert et Golberg (1965)ces faits caracterisentbien une hepato- Lowry, 0. H., Rosebrough, Nira J., Farr, A. L. 8~ Randall, Rose J. (1951). Protein measurement with the Folin megaliepar hyperfonctionnement.De plus,Chadwick phenol reagent. J. biol. Chern. 193, 265. et al. (1971)et Chadwick et Freal (1972)montrent Remmer. H.. Schenkman. J.. Estabrook. R. W.. Sasame. que l’administrationcontinue de lindane conduit a H., Giilettk, J., Narasimhulu, S., Cooper, D. Y. ‘& Rosen: une accelerationde sonpropre mttabolismepar oxythal, 0. (1966).Drug interactionwith hepaticmicrosodation. ma1 cytochrome. Molec. Pharmac. 2, 187. Si I’on admet done que l’augmentationdu poids Schwartz,D. (1966).Mtthodes statistiques a I’usagedes du foie constitue une adaptation physiologique,on medecins et des biologistes. Ed. Flammarion, Paris. remarqueraqu’a court terme (moins de 4 semaines Sosa-Lucero, J. C., de la-Iglesia, F. A., Lumb, G. & Feuer, G. (1973). Nutritional influences on drug metabolism. de traitement)cette rtponse est encoremoduleepour Revie can. Biol. 32 suppl., 69. desquantitesdelindaneaussiimportantesque 510% Street, J. C. (1969). Organochlorine insecticides and the de la DL5c par jour. stimulationof liver microsome enzymes. Ann. N.Y: Acad.

Sci. 160, 274.