Säulenchromatographische Trennung von Ornithin und Lysin

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NOTES

GHR.OM* 3584 SSiulenchromatagraphische

Trennung

von Ornithin

und Lysin

Bei dcr s&ulenchromatographischen Auftrennung basischer Aminosauren an Amberlite CG x20 nach der Methode von MOORE und Mitarb.l, sind Ornithin und Lysin in clen gleichen Fraktionen lokalisiert. Zur quantitativen Analyse dieser Aminosauren in Proteinhydrolysaten bei bestimmten biochemischen Fragestellungen beschrieb W~~NSCH~ein Verfahren mit ansteigendem Temperaturund pH-Gradienten. Wir trennen Ornithin und Lysin bei konstanter Temperatur (50”) auf einer Amberlite CG rzo-S&de mit Na-Citrat/HCl-Puffer pH 4.58 und pH 5.23. Pufferwechsel erfolgt nach Durchfluss von 50 Fraktionen zu je I ml. Folge undTrennsch&rfe der Aminosauren nach dieser Methode sind aus Fig. x ersichtlich. Die Trennscharfe von Ornithin und Lysin lcann je nach Beschaffenheit der Amberlite-S&ule clurch Variation der Fralctions-Nummer fiir den Pufferwechsel beeinflusst werden.

Fig. I. Trcnnun~ cincs Ornithin- und Lysin-haltifq.zll Aminos~iure-Tcstgcmischcs CG 120 SZuIc niit Na-CitraC/I-ICI-Puffer PI-I 4.55 ulicl pH 5.23 bei 50~.

Skzcle. Amberlite

an cincr Ambcrlite . ..

CG IZO (Fluka AG, Buchs SG), 40-60 ,U Korngrosse, 16.5 cm 5o”, Durcl~flussgescl~windiglceit bei 40-50 Torr uberclruck 20-25 mI/Std. Die auf p1-l 4.58 eingestellte Skule wird mit 5 mg hydrolysiertem Protein, gel&t in I- 2 ml Puffer pH 2.2, bescllickt und dreimal mit je 0.3 ml Puffer pH 4.58 nachgewaschcn, Puflcr. Na-Citrat/HCl-Puffer pH 2.2, pH 4.25 und pH 5.23 nach MOORE und Mitarb.l, Puffer pH 4,58 clurch Mischen der Puffer pH 4.25 und pH 5.23 ini Volumverhaltnis I :2.

Liimge, 0.9 cm Durchmesser,

J S.A!toon~,D. 2 A. WUxsc11,

Eingegangen J. Clwornatog.,

1-L SPACICBIAN UND W.E-I.STEI~,A~~~Z.C~~~~~~.. 30(1958) J. CIwowratog~. 30 (1907) 225.

am 19, November 39 (1969)

5oG

1968

1155.