Les allohémagglutinines du système ABO

Revue Fran~aise de Transfusion et d'Immuno-h6matologie Tome XX. - - N ° 4. - - 1977

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ENSEIGNEMENT POST-UNIVERSITAIRE

Les allohdmagglutinines du syst4me ABO par Ph. ROUGER

e t Ch.

SALMON

Centre National de Transfusion Sanguine, H6pital Saint-Antoine - PARIS.

ES a n t i c o r p s d u s y s t h m e ABO s o n t e s s e n t i e l l e m e n t d e s a g g l u t i n i n e s ; l ' a g g l u t i n a t i o n e s t la p r i n c i p a l e r n 6 t h o d e d ' 6 t u d e d e l e u r activit4. Le t e r r n e d ' a l l o h 6 m a g g l u t i n i n e s a c t u e l l e r n e n t u t i l i s 4 r e p o s e s u r l e u r p r 6 s e n c e , g 6 n 4 t i q u e r n e n t contr614e a u s e i n d ' u n e rnn4rne esp6ce, l ' e s p h c e h u m a i n e .

L

Des a n t i c o r p s d e rn4rne s p 6 c i f i c i t 6 p e u v e n t 4 t r e d ' o r i g i n e diff6r e n t e . I1 p e u t s ' a g i r d ' a l l o h 4 r n a g g l u t i n i n e s n a t u r e l l e s d o n t la p r 6 s e n c e e s t li4e a u p h d n o t y p e d e l ' i n d i v i d u , d ' a n t i c o r p s i r n r n u n s s e c o n d a i r e s u n e s t i m u l a t i o n c o n n u e o u i n c o n n u e et rn4rne p a r f o i s d ' a u t o anticorps.

I. - -

REPARTITION

DES

DANS

ALLOHEMAGGLUTININES

LE SERUM

Les a n t i c o r p s anti-A et anti-B s o n t p r 6 s e n t s chez t o u s l e s i n d i v i d u s q u i n e p o s s 6 d e n t p a s l ' a n t i g 6 n e c o r r e s p o n d a n t , ces a n t i c o r p s s o n t d i t s ,( n a t u r e l s ,,. Le g r o u p e d ' u n s u j e t e s t d 6 f i n i p a r la p r 4 s e n c e o u l ' a b s e n c e d e s a n t i g 6 n e s A et B h la s u r f a c e d u g l o b u l e r o u g e , m a i s

Article re~u le 1-7-1977.

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ROUGER Ph. et SALMON Ch.

la d 6 t e r m i n a t i o n d u g r o u p e n 6 c e s s i t e la c o n f r o n t a t i o n des caract6r i s t i q u e s g l o b u l a i r e s et s 6 r i q u e s . Les p h f n o t y p e s A f a i b l e s p o s s b d e n t s o u v e n t u n anti-A~ ~ c o n c e n t r a t i o n f a i b l e ; de m 6 m e c e r t a i n s B f a i b l e s p o s s b d e n t u n anti-B ( T a b l . 1). TABLEAU I Allohdmagglutinines sdriques prdsentes en ~onction du phdnotype. PHI~NOTYPE A1

A2 A3 A. Aend

Am Ay Ael B B3

Bx Bm Bel

A~B A~B cis AB 0

Anti-B Anti-B Anti-B Anti-B Anti-B Anti-B Anti-B Anti-B Anti-A+Ai Anti-A+ A1 Anti-A + A1 Anti-A+ Ax Anti-A+A1 Pas d'antieorps

Anti-A1 (dans 1 % des cas) Anti-A1 possible Anti-A1 mais fixation-dlution sur Gr A2 positive Anti-A1 possible Pas d'anti-A Pas d'anti-A Toujours un anti-A1, g6ndralement un anti-A Pas d'anti-B Anti-B faib!e Pas d'anti-B Parfois un anti-B faible

Anti A1 dans 10 h 25 % des cas Souvent anti-B faible (cis A1Ba, cis A~Ba) anti-B et anti-A+A1

JUEL [52] a m o n t r 6 q u e la m a j o r i t 6 des s e r u m s de s u j e t s A2B p o s s d d a i e n t u n anti-A 1 c a p a b l e de r d a g i r avec des h 6 m a t i e s A 1 ficindes (~ 4°C et 18°C); cet a n t i c o r p s 6 t a i t 6 g a l e m e n t c a p a b l e de r 6 a g i r avec les g l o b u l e s r o u g e s A 2 ficinds. SPRINGER [106] a r a p p o r t d l ' o b s e r v a t i o n d ' u n s u j e t A10 e n b o n n e sant6, q u i n e p r d s e n t a i t a u c u n e a c t i v i t 6 s d r i q u e anti-B. A u c u n e struct u r e a n t i g 6 n i q u e B n ' a 6t6 m i s e e n 6 v i d e n c e chez ce s u j e t ; n d a n m o i n s , la r e c h e r c h e d ' u n e a c t i v i t d e n z y m a t i q u e s p d c i f i q u e n ' a v a i t p a s 6t6 r6alisde. L'anti-A ÷ B des s u j e t s O n ' a p a s e n c o r e r e q u d ' i n t e r p r d t a t i o n

A L L O H E M A G G L U T I N I N E S D U S Y S T E M E ABO

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univoque. KABaT [53] 6voque la possibilit6 d'un anticorps ~t r6action crois6e, le site antig6nique sp6cifique 6tant une r6gion plus large que A et B ; p o u r FRAr~KS [34] le site serait plus petit que A et B. DODO [22] s o u l , r e l'hypoth6se d'anticorps li6s p o r t a n t deux sp6cificit6s. Enfin les travaux d'OCATA [71] concluent h u n ph6norn6ne non sp6cifique p a r lequel des mol6cules d ' a n t i c o r p s seraient capables de se fixer sur un complexe antig~ne-anticorps sp6cifique (HOLBUR• [44]. Pour HOLmJRN [44] l'anti (A + B) serait une IgG h forte constante d'association, dirig6e contre un site antig6nique plus petit que AetB. En dehors du s6rum, on retrouve des alloh6magglutinines anti-A et anti-B dans d'autres milieux de l'organisrne. Pt:TKONEN [78] a m o n t r 6 la pr6sence d'anti-A et d'anti-B dans la salive. PROKOP [76] a retrouv6 plus souvent ces anticorps dans la salive des sujets O. HUMMEL [47] p a r une technique sensibilis6e a d6tect6 les anticorps dans t o u s l e s 6chantillons de salive test6s, rnais la salive du sujet O 6tait la plus active. SCnLESINGER [93] a constat6 la baisse des anticorps salivaires d u r a n t la grossesse. JaKOBOWICZ [50, 51] a mis en 6vidence, dans le post-partum, une corr61ation entre la pr6sence ou l'absence d'anti-A et d'anti-B salivaire, et la pr6sence ou l'absence d'anti-A et d'anti-B irnmuns. Les allo-h6magglutinines ont 6t6 6galement retrouv6es darts le liquide d'ascite et darts le lait. Le titre des anti-A et anti-B tend h 6tre plus 61ev6 dans le colostrum que dans le plasma. I1 s'agit s u r t o u t d'IgA contamin6e par un peu d'IgM. Des alloh6magglutinines ont 6t6 rnises en 6vidence dans la glaire cervicale de 20 % de fernmes, s u r t o u t de groupe O ; l'anti-A est plus fr6quent que l'anti-B. PUTKONEN [78] a 6galement retrouv6 ces anticorps darts les larmes et les s6cr6tions lacrymales.

lI. -- PROPRIETES DES

DIFFERENTS

PHYSICO-CHIMIQUES TYPES

MOLECULAIRES

D'IMMUNOGLOBULINES

L'dtude des propri6t6s physico-chimiques des diffdrents types rnoldculaires d'imrnunoglobulines n6cessite de travailler sur des fractions bien purifi6es. Ainsi, l'IgM peut 6tre obtenue ~ p a r t i r d ' u n e filtration sur S E P H A D E X G 200 suivie d'une c h r o m a t o g r a p h i e sur DEAE cellulose ou d'une ultra-centrifugation. L'IgG est au mieux

630

R O U G E R Ph. et S A L M O N Ch.

obtenue par f r a c t i o n n e m e n t sur DEAE cellulose. L'IgA peut 6tre plus s i m p l e m e n t obtenue ~ p a r t i r du colostrum. 1. ETUDE DU POUVOIR AGGLUTINANTEN SOLUTIONSALINE 0,15 M. Les anticorps <> sont essentiellement des IgM ; par contre les IgG, c o m m e les IgA sont faiblement agglutinantes dans l e s conditions standards. Aussi, p o u r obtenir une m6me agglutination, faut-il b e a u c o u p plus d ' I g G on d'IgA que d'IgM. La c o n c e n t r a t i o n minimale agglutinante est 20 fois plus 61ev6e p o u r les IgG (0,2 m g / m l ) que p o u r les IgM (0,01 m g / m l ) [26]. 2. ETUDE DU POUVOIR AGGLUTINANTEN MILIEU SI~RIQUE. Les alloh6magglutinines de type IgG sont plus agglutinantes en milieu s6rique qu'en milieu salin. Par contre, le pouvoir agglutinant des IgM est identique quel que soit le milieu [75]. 3. EFFET DE LA CHALEUR. Le chauffage, 3 heures ~ 56oC, p r o v o q u e une diminution importante de l'activit6 agglutinante des IgM alors que les IgG et les IgA conservent leurs propri6t6s. 4. ETUDE DU POUVOIR HgMOLYTIQUEET DE LA FIXATION DU COMPLI~MENT. POLLEY [75] a m o n t r 6 que t o u s l e s 6chantillons d ' I g G anti-A et h peu prbs 90 % des IgM 6taient h6molysants si le test 6tait suffisamm e n t sensibilis6 (c'est-h-dire si le r a p p o r t s d r u m / h 6 m a t i e s 6tait assez 61ev6. (90 % d'h6molyse si s 6 r u m / h 6 m a t i e s = 40; mais 58 % si s 6 r u m / h d m a t i e s = 20). Des rdsultats semblables sont obtenus si la fixation du compl6m e n t est d6tect6e h l'aide d'une antiglobuline spdcifique. E n a j o u t a n t une antiglobuline anti-compl6ment, ~ des dilutions de s6rum entrain a n t une faible agglutination, on p r o v o q u e une agglutination franche p o u r les IgM voire les IgG, mais on n'influence pas celle des IgA, qui ne fixeraient pas le c o m p l 6 m e n t [2]. 5. R6LES DES ANTIGLOBULINESSP~CIFIOUES. Une anti-IgG ajout6e ~ un syst6me IgG anti-A globule rouge A, p e r m e t d'am61iorer le titrage de plusieurs dilutions par r a p p o r t aux conditions s t a n d a r d s : c'est la base d ' u n e m 6 t h o d e d'6valuation

A L L O H E M A G G L U T I N 1 N E S D U S Y S T E M E ABO

631

de la quantit6 d ' I g G d ' u n s6rum. Pour l'IgA anti-A, le titrage p e u t & r e am61ior6 de 1 ou 2 dilutions. 6.

EFFET D'INHIBITION DES SUBSTANCES DE GROUPE.

Classiquement, les a n t i c o r p s d ' u n s 6 r u m i m m u n sont b e a u c o u p plus difficiles h n e u t r a l i s e r avec la s u b s t a n c e A ou B que les a n t i c o r p s d ' u n s 6 r u m naturel. En r6gle g6n6rale, l'IgM anti-A est plus facilement inhib6e que l'IgG anti-A. L'IgA anti-A est assez facilement inhib6e p a r la s u b s t a n c e A et p e u t ainsi & r e consid6r6e c o m m e interm6diaire e n t r e l'IgG et l'IgM. POLLEY [75] a estim6 que p o u r o b t e n i r une r6duction 6quivalente du titre d'agglutination, le t a u x de s u b s t a n c e A est 20 fois plus 61ev6 p o u r une IgG que p o u r u n e IgM. En fair, l'IgM anti-A est en r6gle b e a u c o u p plus facilement neutralis6e que l'IgG anti-A car le n o m b r e de mol6cules d ' I g M anti-A n6cessaire p o u r p r o d u i r e une agglutination donn6e est b e a u c o u p m o i n s g r a n d que le n o m b r e d ' I g G anti-A. La quantit6 de s u b s t a n c e A n6cessaire p o u r n e u t r a l i s e r la capacit6 h6molytique d'un s 6 r u m i m m u n est bien m o i n d r e que la quantit6 de s u b s t a n c e A n6cessaire p o u r neutraliser la capacit6 d'agglutiner des globules rouges. 7.

EFFET AGGLUTINANT DES GLOBULES ROUGES TRAITI~S PAR, LES ENZYMES PROTI~OLYTIQUES.

Les IgG, peu agglutinantes vis-a-vis de globules rouges n o r m a u x deviennent tr&s agglutinantes lorsque ces globules rouges sont trait6s p a r les enzymes prot6olytiques type bromgline, trypsine. L'agglutinabilit6 des IgM n ' e s t que tr&s 16g&rement augment~e [5, 17, 27]. 8.

EFFETS D'AGENTS RI~DUCTEURS : TYPE 2-MERCAPTO I~THANOL.

Le 2-mercapto gthanol inactive t o t a l e m e n t (activit6 r6siduelle 1 % ) les i m m u n o g l o b u l i n e s de type IgM. Les sous unitgs obtenues ont un potentiel agglutinant tr~s affaibli p a r r a p p o r t ~ l'IgM native, leur c o n s t a n t e d'association est 300 lois plus faible [26]. L ' I g G n ' e s t p a s inactivge et conserve t o t a l e m e n t sa capacit6 agglutinante et h6molysante. L ' a c t i v i t 6 d e l'IgA, e s t r6duite, mais non d6truite p a r ce traitement. 9.

ETUDE DU COMPORTEMENT VIS-A-VIS DE DIFFt~RENTS TYPES CELLULAIRES.

L'anti-A naturel n'agglutine pas les h6maties de p o r c alors que l'anti-A i m m u n les agglutine. Les IgM sont r e s p o n s a b l e s de cette

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R O U G E R Ph. et S A L M O N Ch.

agglutination; en effet, les IgG anti-A se c o n t e n t e n t de se fixer la surface de ces ceilules p o u r les sensibiliser, l'agglutination n'apparait qu'aprSs adjonction d'antiglobuline spdcifique. KONUGRES [55] a, p a r ailleurs, m o n t r d que l'IgG anti-A (d'un sdrum i m m u n ) non inhibable par la substance A poss~de une affinitd particuli~re p o u r les globules rouges de porc. De m~me avec des globules rouges humains, des diffdrences qualitatives et quantitatives sont observ~es selon le type de l'anticorps. Ainsi les anti-A de O rdagissent avec les globules rouges Ax, alors que les anti-A de B ne rdagissent p r a t i q u e m e n t pas m~me s'ils p r o v i e n n e n t d e sdrums stimulds. Des diffdrences de rdactivit6 sont dgalement observ~es au niveau des anti-B. A N 4 identique, les anti-B i m m u n s agglutinent beaucoup mieux des globules B 3, Bx et cis AB, que les anticorps n a t u r e l s ; p a r contre, une IgM pure, auto anti-B, n'agglutine pas les Bx, cis AB ou B a c q u i s [58].

III. - -

CARACTERES DITS

GENERAUX

DES

~ NATURELS

,,

ANTICORPS

Plus les m f t h o d e s de f r a c t i o n n e m e n t directes ou indirectes 6voluent, plus apparait complexe la rdpartition des diffdrents types d'anticorps dans les sdrums naturels. C'est ainsi qu'un sdrum anti-A naturel de sujet B p e u t ~tre compos~ soit d'IgM, soit d'un mdlange p r 6 d o m i n a n t d'IgM et d'IgG, la quantit6 d'IgA est faible et d i v e r s e m e n t appr6cide. Les s6rums de sujets O sont b e a u c o u p moins riches en IgM anti-A on anti-B que les sdrums de sujets A ou B. Chez les sujets O, ABELSON et RAWS0N [1] ont montr~ une p r o p o r t i o n i m p o r t a n t e d'IgG anti-A et anti-B. Ces anticorps n a t u r e l l e m e n t prdsents posent deux problbmes, celui de leur origine, et celui de leurs propri~tds caractdristiques. 1.

ORIGINE DES ANTICORPS NATURELS DU S¥STEME

ABO.

Les anticorps du syst~me ABO, c o m m e toutes les immunoglobulines, sont des prot6ines et de ce fait, sont g6n6tiquement contr616es. I1 n'y a pas encore d'explication univoque h l'apparition de ces anticorps naturels. N6anmoins, il est possible de reconnaitre au moins deux facteurs influenqant cette synthbse: l'environnement et le gdnotype ou plus v r a i s e m b l a b l e m e n t l'antigbne lui correspondant,

ALLOHEMAGGLUTININES DU SYSTEME ABO

633

a) R61e de l ' e n v i r o n n e m e n t . Les a n t i c o r p s anti-A et anti-B seraient p r o d u i t s s e c o n d a i r e m e n t une s t i m u l a t i o n antig6nique p a r des substances e n v i r o n n a n t e s antig6niques et s e m b l a b l e s aux substances de sp6cificit6 A et B. Ces antigbnes ing6r6s ou inhal6s seraient r e s p o n s a b l e s de la p r o d u c t i o n d'une quantit6 d6tectable d'anticorps. Plusieurs o b s e r v a t i o n s de SPRINGER [102, 103, 104] viennent a p p u y e r cette hypoth~se. Chez des poussins ax6niques, a u c u n h6t6ro anticorps c o n t r e les globules rouges h u m a i n s B ne se d6veloppe r a p i d e m e n t aprbs l ' a d m i n i s t r a t i o n orale d ' E s c h e r i c h i a Coli 086. Ces a n t i c o r p s ont des propri6t6s s6rologiques s e m b l a b l e s aux alloh6magglutinines naturelles. N6anmoins, chez les poussins ax6niques, une faible quantit6 d'agglutinines se d6veloppe apr6s le deuxi~me mois, ceci est attribu6 /~ des traces de c o n t a m i n a n t s antigfniques. En 1969, SPRINGER [105] a repris un type d'exp6rience similaire chez l ' h o m m e . Darts une s6rie d'exp6riences, des bacilles Escherichia Coli 086 tu6s mais p o s s 6 d a n t t o u j o u r s une sp6cificit6 B de g r o u p e sanguin, 6talent donn6s ~ ing6rer /a des n o u r r i s s o n s au cours des p r e m i e r s mois de la vie. Une 616vation significative du titre des anticorps a 6t6 observ6e chez onze des seize n o u r r i s s o n s p r ~ s e n t a n t des diarrh6es, m a i s s e u l e m e n t chez un des sept enfants i n d e m n e s de signes digestifs. De m 6 m e chez l'adulte u n e 616vation significative du titre des anti-B a 6t6 observ6e chez la totalit6 des sujets pr6sentant des s y m p t 6 m e s digestifs et chez certains sujets indemnes. Dans une s6rie d'exp6riences utilisant des pulv6risations nasales d'Escherichia Coli 086, SPRINGER a not6 une 616vation significative du titre des anti-B dans un tiers des cas. On note cependant, que l'616vation du titre des anti-B est b e a u c o u p plus fr6quente chez les sujets A que chez les sujets O. b) R 6 l e du g ~ n o t y p e et de l'antig~ne circulant. Les t r a v a u x de WURMSER et de SALMON ont a p p o r t 6 de n o m b r e u x a r g u m e n t s sur le r61e du g6notype e t / o u des antig6nes circulants. Nous e x a m i n e r o n s s u c c e s s i v e m e n t ces diff6rents a r g u m e n t s . En p r e m i e r lieu, WURMSER [30, 32, 115] et son 6quipe ont m o n t r 6 que dans leur p r o p r e technique, les propri6t6s t h e r m o d y n a m i q u e s de l'anti-B 6taient identiques chez tous les sujets d'un g6notype donn6 qu'il soit A10, A1A1, A20, OO, m a i s diff6rent d'un g6notype

R O U G E R Ph. et S A L M O N Ch.

634

l'autre. Cette diff6rence conclut que l'anti-B dit ,, n a t u r e l ,, est reli6 au gdnotype de l'individu. SALMON [88], en utilisant la m 6 m e mdthodologie, a r6alis6 une s6rie d'exp6riences chez u n enfant 6 r y t h r o b l a s t o p 6 n i q u e de g r o u p e A v Ce s u j e t avait re~u 25 t r a n s f u s i o n s de sang A. L'anti-B circulant avait les p r o p r i f t 6 s t h e r m o d y n a r n i q u e s a t t e n d u e s d ' u n sujet de g6notype A10. Apr~s t r a n s f u s i o n de globules O lav6s, la c o n s t a n t e d'affinit6 h 25°C corrnrne h 37°C dirninue et t e n d vers la valeur a t t e n d u e d ' u n s u j e t de g r o u p e O sans c e p e n d a n t a t t e i n d r e les valeurs connues. Ainsi, et sur deux ann6es, ces a u t e u r s ont observ6 des variations d'affinit6 e x p 6 r i r n e n t a l e m e n t r6versibles : apr6s t r a n s f u s i o n de globules A10 l'affinit6 a u g m e n t e ; apr6s t r a n s f u s i o n de globules O lav6s elle diminue. Mais, fair i m p o r t a n t , la chaleur de rdaction reste s e n s i b l e m e n t c o n s t a n t e p o u r les six rnesures effectu6es ( m o y e n n e 14 Kcal/rnole), de telle sorte qu'il semble que les v a r i a t i o n s des p r o p r i 6 t f s t h e r m o d y n a m i q u e s de l'alloh6magglutinine ne c o n c e r n e n t que les valeurs de l'entropie. De eette exp6rience, on conclut circulant j o u e u n r61e d ' i n f o r m a t i o n g r o u p e sanguin ABO et la s t r u c t u r e de et n o n le gbne du locus ABO c o m m e

que la n a t u r e de l'antig6ne et que la relation entre le l ' a n t i c o r p s concerne l'antig~ne le p e n s a i t WURMSER.

I1 f a u t r a p p r o c h e r de cette o b s e r v a t i o n les modifications observ6es chez certains sujets leuc6miques. Q u a n d l'antig~ne ABH est d6prim6, l'affinit6 de l'anti-B produit, ainsi que les v a r i a t i o n s d'enthalpie calcul6es, c h a n g e n t parall~lement. Lh, encore sont correldes les v a r i a t i o n s t h e r m o d y n a m i q u e s de l ' a n t i c o r p s et les m o d i f i c a t i o n s acquises de l'antig~ne [89]. Bien que l ' e n v i r o n n e m e n t soit le rn6me p o u r les sujets A20 et A2B, on n o t e selon les auteurs, la prdsence d'un anti-A 1 chez 10 h 25 % des sujets A2B, alors qu'il n ' e s t prdsent que chez 1 % des sujets A 2. Les sujets A 2 et A2B ne diff6rent que p a r leurs s t r u c t u r e s antig6niques circulantes ; ce qui vient c o n f i r m e r l'hypoth~se pr6cddente. 2.

PROPRII~Tt~S

CARACTI~RISTIOUES

DES

ANTICORPS

DITS

~( N A T U R E L S ~

DU

SYST~ME ABO : - - ils sont c o n s t a n t s en fonction du g r o u p e du s u j e t ; ils sont s p o n t a n d m e n t agglutinants en solution saline (NaC1 0,15 M) ;

635

ALLOHEMAGGLUTIN1NES DU SYSTEME ABO

--leur activitd agglutinante n ' e s t pas a u g m e n t 6 e en milieu s6rique ; - - i l s n ' o n t pas de p o u v o i r h 6 m o l y s a n t dans les conditions standards ; - - leur o p t i m u m t h e r m i q u e d'activit6 est ~t 4°C, ils c o n s e r v e n t une activitd agglutinante h 37°C; - - ils ne sont p a s o p s o n i s a n t s ; - - i l s sont neutralisables p a r les s u b s t a n c e s solubleS dans les conditions s t a n d a r d s ; - - ils sont t h e r m o l a b i l e s h 10' fi 70°C (ou une h e u r e h 63°C); --ils sont faits d'un mdlange d'IgM, d ' I g G voire d ' I g A ; m a i s l'IgM d o m i n e ; - - ils poss6dent des capacit6s agglutinantes particuli~res vis-h-vis des v a r i a n t e s antig6niques faibles ; - - leurs valeurs de c o n c e n t r a t i o n relative s'inscrivent dans cer. taines limites ; - - i l s p a r a i s s e n t homog~nes darts les conditions techniques de l'6tude t h e r m o d y n a m i q u e de WURMSER, ils r 6 p o n d e n t h un concept d'hdtdrog6n6it6 limitde dans d ' a u t r e s techniques [84].

IV.-

CARACTERES DE

GENERAUX

DES

ANTICORPS

STIMULATION

1. CIRCONSTANCES DE SURVENUE. Des a n t i c o r p s d ' i m m u n i s a t i o n p e u v e n t a p p a r a i t r e dans des circonstances tr6s vari6es. L'6tude du s 6 r u m de sujets a y a n t requ du sang i n c o m p a t i b l e dans le syst~me ABO, a p e r m i s de n o m b r e u s e s constatations. Quelle que soit la quantit6 de globules rouges i n c o m p a t i b l e s transfusds, le m a x i m u m d'616vation du titre d'agglutination se situe aux environs du 10e j o u r [68]. L ' a m p l i t u d e d u p i c est r e l a t i v e m e n t en r a p p o r t avec la quantit6 de globules rouges incompatibles inject6s. WIENER [112] a montr6, en i n j e c t a n t de faibles quantit6s de globules rouges, que c h a q u e s u j e t poss6dai.t.une capacit6 p r o p r e h r 6 p o n d r e ~t une m 6 m e stimulation. Ndanmoins, cette capacit6 de r6ponse s e m b l e p e u 61ev6e chez les sujets de groupe O [23]. L'injection i n t r a m u s culaire de globules rouges semble s u r t o u t capable d'61ever le p o u v o i r h6molytique du s6rum. L'injection de s d r u m h u m a i n p e u t p r o v o q u e r une rdponse i m m u n i t a i r e sp6cifique, m a i s faible, t r a d u i s a n t la p r 6 -

636

ROUGER

Ph. et S A L M O N

Ch.

sence de substances A ou B k une faible concentration. Des cryopr6cipit6s et des concentr6s de facteur IX peuvent 61ever la concentration d'anti-A et p r o b a b l e m e n t d'anti-B (Mc Sr~INE [67]). L'injection de substances sp6cifiques de groupe stimule la production d'anticorps. On peut utiliser des substances d'origine h u m a i n e c o m m e la substance A de kyste de l'ovaire, ou des substances purifi6es de m 6 c o n i u m h u m a i n ou des substances salivaires; on peut 6galement utiliser des substances d'origine animale c o m m e la substance A d ' e s t o m a c de porc, ou les substances A et B d ' e s t o m a c de cheval. L'injection IV ou IM (modalit6s variables selon les auteurs), entralne une 616vation i m p o r t a n t e du taux d ' a n t i c o r p s sp6cifiques ( m f t h o d e s quantitatives et semi-quantitatives). ALLEN et KARAT [3] ont m o n t r 6 que douze mois plus tard, il persistait un taux i m p o r t a n t d'anticorps (jusqu'h 50 % de la valeur maximale). Apr6s stimulation p a r substances sp6cifiques, plusieurs auteurs ont m o n t r 6 une nouvelle r6partition des diffdrents types mol6culaires d'anticorps. En r~gle g6ndrale, la fraction IgG et m~me IgA a u g m e n t e [21]. L'616vation du titre des alloh6magglutinines p e n d a n t et apr~s certaines grossesses, est classique. Le cas le plus fr6quent est reprdsent6 p a r u n foetus de groupe A et une m~re de groupe O. Dans plus de 80 % de ces incompatibilitds on observe une 616vation significative du titre des anticorps entre le 5~ et le 20e j o u r apr6s l'accouchement. SMITH [96] a m o n t r 6 que dans tous les cas de stimulation. les enfants 6taient s6crfteurs de substances A ou B salivaires. L'activit6 A de l'anatoxine diphtdrique est due /~ la pepsine p r f s e n t e dans les extraits d ' e s t o m a c de porc, utilis6s p o u r sa prdparation [70, 72], il e n e s t de m6me p o u r l'anatoxine t6tanique. L'616. vation du titre des anticorps et leur caract6re i m m u n semblent a p p a r a i t r e assez r a p i d e m e n t apr~s la vaccination et persistent plusieurs ann6es. I1 en est de mfime p o u r le s6rum antit6tanique lorsque la pepsine porcine est utilis6e p o u r sa purification. DAVIDSOI~N [18] a m o n t r 6 le r61e du s6rum de cheval dans l'apparition d'anti-A ou d'anti-B immuns. L'injection du vaccin ,, antigrippal,, est responsable de la p r o d u c t i o n d'anti-A immun. La substance ,~ A like ,, est pr6sente d a n s le c y t o p l a s m e de l ' e m b r y o n de poulet sur lequel est cultiv6 le virus [101]. L'infection p a r Toxacara Canis entraine une 616vation significative du titre des allohdmagglutinines; des extraits de ce parasite peuvent inhiber les anti-A ou les anti-B.

ALLOHEMAGGLUTININES 2.

637

DU SYSTEME ABO

CARACT~RES DISTINCTIFSDES ANTICOI~PSDU SYST]~MEABO SECONDAIRES A UNE STIMULATIONCONNUE: ils sont inconstants et apparaissent dans des conditions bien particuli6res de s t i m u l a t i o n ; -ils sont agglutinants en solution saline; --mais leur activit~ agglutinante est largement augment6e en milieu sdrique ; - - ils sont h6molysants dans les conditions s t a n d a r d s ; - - leur activit6 est conserv6e, voire augment6e ~t 37°C; -ils sont difficilement neutralisables p a r les substances solubles, dans les techniques s t a n d a r d s ; - - ils r6sistent ~t la chaleur 1 h h 63°C, 10 m n h 70°C; -ils sont faits d'un m61ange d ' I g G et d'IgM avec une augmentation relative de la quantit6 d'IgG par r a p p o r t au sdrum naturel ; - - ils possbdent des capacitds agglutinantes particuli6res vis-h-vis des variantes antig6niques faibles. (Its reconnaissent les globules Bx, B acquis, cis AB); - - l e u r s valeurs de concentrations relatives s'inscrivent audessus des limites normales ; - - ils apparaissent tr6s h~t6rog~nes dans les conditions techniques de l'6tude t h e r m o d y n a m i q u e de WIJRMSUR. Leur constante d'association est s u r t o u t plus 6levee que celle des alloh f m a g g l u t i n i n e s dites , naturelles ,,. --

V.

--

CARACTERES DU

GENERAUX

DES

SYSTEME

ABO

AUTOANTICORPS

Les auto-anticorps dans le syst6me ABO sont tr6s rares. Ils a p p o r t e n t cependant des informations fondamentales p o u r la compr6hension de la genhse des auto-anticorps et donc de l'auto-immunit6 en g6n6ral. 1. AUTO-AGGLUTIXINESET AUTO-IMMUNITt~. Peu de cas d'auto-anticorps ont 6t~ s u f f i s a m m e n t &udi6s [59, 60, 82]. N6anmoins, dans le cas d'un anti-B [60] une ~tude thermod y n a m i q u e et enzymatique complete a ~t6 r6alis6e. L'antig6ne B du sujet p r o d u c t e u r poss~de, selon la m6thode de WURMSER, des

638

R O U G E R Ph. et S A L M O N Ch.

propri6t6s t h e r m o d y n a m i q u e s normales. Les propridt6s de l'enzyme de type B (galactosyl transfdrase) sont normales. Tous ces 616ments sont en faveur de la normalit6 de la s t r u c t u r e antig6nique B de ce sujet A1B, et milite en faveur d'une th6orie ~( centrale ,, de l'autoimmunit6. Aucun ddsordre i m p o r t a n t de la s6rie a u t o - i m m u n e n'a 6t6 rapport6 dans les principaux cas 6tudi6s. N6anmoins, BIRD [13] a m o n t r 6 un possible 61argissement de la spdcificit6 ; un auto anti-B (23-9-68) devenant u n auto anti-I + BI (26-8-70). 2.

CARACTERESDISTINCTIFSDES AUTO'ANTICORPSDU SYSTJ~MEABO. --ils

apparaissent dans des circonstances impr6cises.

- - le caractbre auto est d6montr6 p a r le test de Coombs direct positif, et p a r les tests d ' a b s o r p t i o n et d'61ution sur les propres h6maties du s u j e t ; - - i l s sont agglutinants en solution saline c o m m e en milieu s6rique ; - - ils n ' o n t pas de pouvoir h6molysant ,, p r o p r e ,,. - - i l s poss~dent une amplitude t h e r m i q u e 6 t r o i t e : il s'agit d'agglutinines froides ; ils sont neutralisables p a r les substances solubles dans les conditions standards ; - ces anticorps sont des IgM, p a r a i s s a n t tr~s homog~nes ; - ils poss~dent des capacit6s agglutinantes particuli6res vis-5-vis des variantes antig6niques faibles; - - ils paraissent homogbnes dans les conditions techniques de l'6tude t h e r m o d y n a m i q u e de WI~RMSER. Ces anticorps sont trbs exothermiques et poss6dent des valeurs semblables aux auto anti-I. La variation d'enthalpie p a r r a p p o r t 5 des globules rouges B n o r m a u x est trbs 61ev6e ( A H = - - 36.000 cal/ mole (59) A H ---- 27.000 cal/mole, (60)). --

Un autre

type d ' a u t o - a n t i c o r p s : les auto-anticorps

compos6s.

Ces anticorps compos6s sont dirig6s/~ la lois contre les antig6nes du syst~me ABH et ceux du systbme Ii. Les 6preuves d'61ution, de r661ution, d ' a b s o r p t i o n et d'6tude de fragments Fab ont m o n t r 6 qu'il ne s'agissait pas d ' u n m61ange d'anticorps, mais de macromol6cules (IgM) complexes p o r t a n t des sp6cificit6s multiples (par exemple antiAI + HI). L'anti-I (A + B) d6crit p a r DOINEL [19] se r6v61e 6tre un anticorps capable de reconnaltre un d 6 t e r m i n a n t qui c o m p r e n d I

639

A L L O H E M A G G L U T I N I N E S D U S Y S T E M E ABO

et une partie c o m m u n e de A et B, 616ment qui 6tablit une relation t 0 p o c h i m i q u e entre ces divers antig6nes. Ces anticorps compos6s ne sont pas en r6gle inhibds p a r les substances solubles classiques.

VI. - - L E S M E T H O D E S

DE DOSAGE

DES ALLOHEMAGGLUTININES

On connait actuellement deux types de mdthodes de dosage des anticorps du syst6me A B O : d ' u n e part, des m6thodes conduisant h des mesures relatives, d ' a u t r e p a r t des m6thodes c o n d u i s a n t h des mesures absolues. Le dosage de l'azote anticorps selon la m6thode d'HEIDELBERGER et KABAT [42] et la m6thode utilisant le m a r q u a g e radio-actif de l'anticorps ddvelopp6 p a r BOURNSELL [15] HUGHESJONES [45] et MASSOUREOIS [61] p e r m e t t e n t d'6tablir des mesures absolues de c o n c e n t r a t i o n d'anticorps. La inesure relative des concentrations d'alloh6magglutinines peut 6tre d6termin6e p a r la m 6 t h o d e du N 4 raise au point par l'6quipe de WURMSER et par la m6thode de WILKIE et BECKER.

Les m e s u r e s q u a n t i t a t i v e s a b s o l u e s .

1. MESURE DU CONTENUEN AZOTE DES ANTICORPS. HEIDELBERGER et KABAT [42] ont utilisd p o u r ce dosage la m6thode de dosage au micro-Kjeldahl. Il suffit alors d'effectuer deux mesures : d ' u n e part, la m e s u r e de la quantit6 d'azote contenue dans l'antig~ne et d ' a u t r e part, la m e s u r e de la quantit6 d'azote contenue dans le complexe antig~ne-anticorps spdcifique. La diff6rence entre ces deux mesures exprime la quantit6 d ' a n t i c o r p s fix6s sur l'antigbne sachant que la teneur m o y e n n e en azote des prot6ines est d'environ 16 %. Cette m 6 t h o d e est difficilement applicable aux globules rouges du fait que l'antigbne p r o p r e m e n t dit n'est pas isoM, il se trouve au sein de s t r u c t u r e s prot6iques a b o n d a n t e s (m6me apr6s avoir 61imin6 1'h6moglobine). 2. DOSAGE DES ALLOHI~MAGGLUTININESPAR MI~THODES ISOTOPIOUES. La m 6 t h o d e consiste h m a r q u e r l'anticorps p a r u n compos6 radio-actif tel que l'iode 131 ou l'iode 125. Ce m a r q u a g e n'altbre en

640

R O U G E R Ph. et S A L M O N Ch.

rien les propri4t6s anticorporales et physicochimiques des immunoglobulines. L'emploi des m a r q u e u r s radio-actifs p e r m e t en plus d'6tudiet l'6tape de fixation de l'anticorps sur l'antig6ne. I1 est possible de r6aliser ces dosages sur s6rum total ou mieux sur globulines purifi6es. N6anmoins, ces m6thodes se r6v61ent d'utilisation p r a t i q u e difficile et d ' i n t e r p r 6 t a t i o n d61icate, voire impr4cise. A l'oppos6, les m6thodes quantitatives relatives se f o n d e n t sur la propridt4 d'agglutination de ce type d ' a n t i c o r p s ; elles r6alisent donc un dosage partiel et incomplet des anticorps du systbme ABO en ne consid6rant que les alloh6magglutinines.

Les m e s u r e s quantitatives relatives. A. - - LA MI~THODE D U N 4 DE WURMSER [29]. Le N 4 ddfinit le h o m b r e maximal d'hdmaties agglutinables par un s6rum ~ 4°C dans les conditions standards. P o u r m e s u r e r le N 4 deux m6thodes peuvent 6tre utilis6es :

1. La m d t h o d e ~ anticorps constant. On m e t en presence une dilution donn6e du s6rum avec un n o m b r e croissant d'h6maties (2 volumes de s6rum p o u r u n volume de globules rouges). Apr6s un temps de r6action suffisant p o u r que l'6quilibre soit atteint (2 heures h 4°C darts le syst6me B-anti-B), on m e s u r e ~ l'aide d ' u n h6matim~tre le n o m b r e des hdmaties libres p o u r en d4duire le n o m b r e des hdmaties agglutin6es. On constate q u ' a u fur et h m e s u r e q u ' a u g m e n t e le n o m b r e des globules rouges mis en r6action, le n o m b r e des h6maties agglutin6es a u g m e n t e 6galement, mais seulement j u s q u ' h u n m a x i m u m ; ce m a x i m u m dans le syst6me B anti-B se situe au taux d'agglutination ( n o m b r e d'h6maties a g g l u t i n 6 e s / n o m b r e d'h6maties raises en rdaction) de 0,40. Le N 4 est alors calcul6 par le p r o d u i t du n o m b r e d'h6maties agglutin4es h ce m a x i m u m p a r la dilution du s6rum. MAVRIDES [64] a m o n t r 4 que dans le syst~me A anti-A le taux m a x i m u m d'agglutination est de 0,25.

2. La m d t h o d e ~ antigone constant. Si Yon utilise une suspension globulaire (celle du m a x i m u m pr6c4dent) h laquelle on ajoute un s4rum anti-B h diffdrentes

A L L O H E M A G G L U T I N I N E S D U S Y S T E M E ABO

641

dilutions, selon le m 6 m e protocole, on obtient un m a x i m u m identique avec un taux d'agglutination de 0,40 dans le syst~me B anti-B. Le N 4 repr6sente ainsi une caract6ristique de l'alloh6magglutilline sp6cifique test6e ~t savoir sa c o n c e n t r a t i o n en valeur relative. Cette valeur peut 6tre reli6e ~t la c o n c e n t r a t i o n molaire de l'agglutinine p a r l'interm6diaire d'ull coefficient ~0 qui, calcul6 ~t p a r t i r du dosage de l'azote anticorps, est de l'ordre de 1014 [53]. La m6thode du N 4 appr6cie le taux relatif d'anticorps par une m e s u r e d'agglutination. Un r i s q u e : ne p r e n d r e en c o m p t e qu'ui1 certain type d'anticorps dans les conditions d'6tude de ~vVURMSER. B. --

LA Mt~THODE DES PROBITS.

Cette m d t h o d e fut mise au point p a r WILKIE et BECKER [113, 114]. Elle consiste h d 6 t e r m i n e r le taux d'agglutination en m61angeant une quantit6 constante d'h6maties (de l'ordre de 15.000/ram ~) avec des dilutions croissantes d'un s6rum donn6. Dans ces conditions, le taux d'agglutination qui varie de 0 ~t 100 %, en fonction du logarithme de la dilution du s6rum, donne une courbe d'allure sigmoide. De ce fait, la concentration du s6rum n6cessaire p o u r agglutiner 50 % des h6maties pr6sentes constitue une zone privil6gi6e p o u r le dosage de l'alloh6magglutinine, car, dans cette r6gion (celle du point d'inflexion), la r6action est tr6s sensible : h une faible variation de concentration ell s6rum c o r r e s p o n d une grande variation du p o u r c e n t a g e d'agglutination. Ainsi, ces auteurs ont choisi cette c o n c e n t r a t i o n agglutinant 50 % des globules rouges p o u r exprimer la c o n c e n t r a t i o n relative du s6rum, c'est le HD 50, c'est-5-dire hemagglutinating dose 50 %. I1 est possible de lin6ariser cette relation en rempla~ant le taux d'agglutination p a r sa valeur en probit. On obtient aillsi une relation lin6aire qui p e r m e t une d6termination plus pr6cise de HD 50. La pellte de la droite de r6gression probit en fonction du logarithme des dilutions du s6rum n'a pas encore de signification univoque et semble d6pelldre de llombreux facteurs. Sur le plan m6thodologique, plusieurs techniques peuvent 6tre utilis6es : a) Comptage des h6maties non agglutin6es soit h l'aide d ' u n h6matim~tre, soit h l'aide d ' u n c o m p t e u r de particules avec discrim i n a t e u r d ' a m p l i t u d e et coup16 ~t un analyseur multicanaux.

642

R O U G E R Ph. et S A L M O N Ch.

b) Mesure du p o u r c e n t a g e d ' h d m o l y s e apr6s s4paration des deux p o p u l a t i o n s cellulaires, cette s6paration p o u v a n t se faire soit p a r ddcantation, soit p a r c e n t r i f u g a t i o n diffdrentielle. Cette m 6 t h o d e p e u t 6tre appliqu6e h l ' a u t o a n a l y s e u r Technicon en utilisant des globules rouges b r o m e l i n d s et de la m6thyl cellulose. Les r6sultats o b t e n u s ~t p a r t i r de cette derni6re m d t h o d e mont r e n t [83] : --

que la c o n c e n t r a t i o n m o y e n n e en allohdmagglutinines anti-B n ' e s t pas diff6rente chez les sujets A s e t A 2 d ' u n e p a r t et chez les sujets 0 et A d ' a u t r e part. La m 6 d i a n e est plus 61evde chez les sujets A 2 que chez les sujets A 1, et plus 61ev6e chez les sujets O que chez les sujets A1;

- - que la c o n c e n t r a t i o n m o y e n n e en anti-A-t-A~ est plus 61evde chez les sujets O que chez les sujets B. E n v i r o n 25 % des sujets O ont une c o n c e n t r a t i o n 61evde en anti-A d - A r La c o m p a r a i s o n des m e s u r e s effectudes p a r la m 6 t h o d e du N 4 de WURMSER et la technique utilisant la b r o m e l i n e et la m6thyl cellulose m o n t r e que cette derni6re donne des rdsultats plus 41ev6s. Cette 16g6re distorsion r6sulte en grande p a t t i e du fait que la m d t h o d e du N 4 de WURMSER p r e n d essentiellement en c o m p t e les IgM, (et p e u les IgG), alors que la m d t h o d e appliqude 5 l ' a u t o a n a l y s e u r dose non s e u l e m e n t les IgM m a i s 6galement les IgG, car elle a recours l'agglutination artificielle en utilisant des globules rouges b r o m e lin6s, de la mdthyl cellulose, du s 4 r u m AB.

VII.

-DES

ETUDE

THERMODYNAMIQUE

ALLOHEMAGGLUTININES

a) La m 6 t h o d e t h e r m o d y n a m i q u e de WURMSER [28, 29, 30, 115, 116] : du fait de la rdversibilit6 de la fixation de l'alloh6magglutinine sur l'antig6ne sp6cifique il est possible d ' a p p l i q u e r la loi d'action m a s s e h un tel syst6me. WURMSER a ainsi 6tabli u n e 4quation qui p e r m e t la d d t e r m i n a t i o n de la c o n s t a n t e intrinsbque d'dquilibre (K0) ~t une t e m p 4 r a t u r e donnde : Nt 6 1017 Nf

m

K 0 N' 4

A L L O H E M A G G L U T I N 1 N E S D U S Y S T E M E ABO

643

avec N t :

c o n c e n t r a t i o n en globules r o u g e s ( G R / m m 3) dans le mdlange rdactionnel N4: c o n c e n t r a t i o n r e l a t i v e en a l l o h 6 m a g g l u t i n i n e s raises en rdaction ; N'4: c o n c e n t r a t i o n r e l a t i v e en a l l o h 6 m a g g l u t i n i n e s l i b r e s h l'6quilibre Nf : N-4N'4 : c o n c e n t r a t i o n r e l a t i v e en a l l o h 6 m a g g l u t i n i n e s fix6es l'6quilibre m : n o m b r e de g r o u p e s agglutinogbnes p a r hdmatie. L ' d q u i l i b r e est a t t e i n t en 90 m i n u t e s darts le s y s t 6 m e B anti-B. Nt La r e p r d s e n t a t i o n de - en f o n c t i o n de N' 4 d o n n e u n e d r o i t e qui Nf p a s s e p a r l ' o r i g i n e et d o n t la p e n t e est i n v e r s e m e n t p r o p o r t i o n n e l l e g la c o n s t a n t e d ' a s s o c i a t i o n . SALMON [87] a t r a n s f o r m 6 c e t t e 6 q u a t i o n de telle s o r t e q u e : N4

m K 0 Nt --1

N' 4

N4 La r e p r 6 s e n t a t i o n de - -

+ 6 . 1 0 lz

en f o n c t i o n de Nt est une d r o i t e d o n t

N' 4

l ' e x t r a p o l a t i o n p a s s e p a r le p o i n t d ' o r d o n n 6 e 1, et d o n t la p e n t e est p r o p o r t i o n n e l l e g K 0. C o n n a i s s a n t la c o n s t a n t e d ' a s s o c i a t i o n i n t r i n s ~ q u e (ou les p e n t e s ) p o u r deux t e m p e r a t u r e s diff~rentes, l ' ~ q u a t i o n de Van t ' H o f f p e r m e t de d ~ t e r m i n e r la v a r i a t i o n d ' e n t h a l p i e A H : K2 __ A H = 4,575 l o g - K1 (cal/mole)

T1. T2 × T2- T1

Rdsultats. Cette m 6 t h o d e p e r m e t d ' 6 t u d i e r les p a r a m ~ t r e s de la f o r m a t i o n du c o m p l e x e antigbne a n t i c o r p s c'est-h-dire t o u t ce qui se p a s s e d a n s 1'association des m o l 6 c u l e s elles-m6mes et dans le solvant. Dans la f o r m u l a t i o n de WURMSER, la p e n t e est i n v e r s e m e n t prop o r t i o n n e l l e h la c o n s t a n t e d ' 6 q u i l i b r e : elle est d ' a u t a n t plus a b r u p t e que l'affinit6 de l ' a g g l u t i n i n e p o u r un m 6 m e agglutinog6ne s e r a p l u s faible.

R O U G E R Ph. et S A L M O N

644

Ch.

Un 616ment f o n d a m e n t a l de ces t r a v a u x s u r des s 6 r u m s n o r m a u x r 6 s i d e d a n s l ' e x i s t e n c e d ' u n e r e l a t i o n e n t r e la c h a l e u r de r6action des a l l o h 6 m a g g l u t i n i n e s n o r m a l e s et le g d n o t y p e d u s u j e t qui les synthdtise. Les

droites

obtenues

avec t o u s l e s

s6rums

normaux

p r o v e n a n t d ' u n m 6 m e g6notype o n t la mfime p e n t e et c e t t e p e n t e c a r a c t d r i s e le g6notype (FIG. 1).

Na/ ~ nti B

(A20)

20

I5

/

°~° °°k J

IO

anti B (~0)

n

f

B (Ax)

, "302, 'i 't, ii

U 2

~aAnti

ti B (0)

4

6

8

Nt . I0 -5

Fro. 1 . - Etudes thermodynamiques des anti-B des A10, A20, Ax et O/~ 25°C (fixation r6alis6e contre des globules rouges B normaux).

Si les 6tudes sur l'anti-B r6alis6es p a r l ' 6 q u i p e de WURMSER et de SALMON o n t m o n t r 6 des c o n s t a n t e s d ' 6 q u i l i b r e ~ p e u pr6s identiques, les donndes de MAVRIDES [65] p o u r l'anti-A s o n t d i f f 6 r e n t e s : la c o n s t a n t e d ' 6 q u i l i b r e c a r a c t 6 r i s a n t l'anti-A1 (GRA 1) e s t 20 fois

645

A L L O H E M A G G L U T I N I N E S DU SYSTEME ABO

25°C e t 40 fois h 37°C p l u s p e t i t e q u e la c o n s t a n t e d ' 6 q u i l i b r e c a r a c t 6 r i s a n t l ' a n t i - A ( G R A I ) ; t e s t 6 c o n t r e les g l o b u l e s A 2 ce f a c t e u r e s t d e 4 h 25°C. Les v a r i a t i o n s d ' e n t r o p i e e t d ' 6 n e r g i e l i b r e s o n t o b t e n u e s g r a c e h la d d t e r m i n a t i o n p a r u l t r a c e n t r i f u g a t i o n d u p o i d s m o l 6 c u l a i r e m o y e n e t d e la c o n s t a n t e 9 p o u r c h a c u n e d e s a g g l u t i n i n e s . Les m e s u r e s e n v a l e u r s r e l a t i v e s s u f f i s e n t e n r 6 a l i t 6 p o u r 6 t a b l i r q u e les s 6 r u m s n o r m a u x c o r r e s p o n d a n t ~t u n p h 6 n o t y p e d o n n 6 , se c o m p o r t e n t c o m m e h o m o g b n e s a u p o i n t d e v u e d e l ' a f f i n i t 6 m o y e n n e d e s alloh6magglutinines. Discussion.

Plusieurs points m6ritent d'6tre discut6s : 1° L ' d v a l u a t i o n d e s p a r a m b t r e s d ' u n e m e s u r e d e f i x a t i o n e s t e f f e c t u d e ~t l ' a i d e d ' u n e m d t h o d e (le N 4) f o n d d e e l l e - m 6 m e s u r 1'agglut i n a t i o n . Q u a n d o n s a l t les d i f f 6 r e n c e s d e r 6 p a r t i t i o n i n d i v i d u e l l e

Nf / N4 6.iO5 Nt

anti B (~A I) ~

~ x~ " ~ - anti B (~O)

anti B (O0) x

~

37° C

\

-

\ o

AI

0,5

I

Nf / N4

FIc. 2. Repr6sentation selon SCATCHARD des r6sultats thermodynamiques des anti-B de AIO, A1A1 et O 37°C. -

-

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Ch.

des esp6ces rnol6culaires d'anticorps, ne peut-il p a s s e p r o d u i r e une sorte de ,, fractionnernent ,> en fonction de la capacit6 agglutinante des anticorps p a r exernple ? 2° Les concentrations d'antig6nes utilis6es sont 61ev6es (Nt de 300.000 ~t 900.000) et il n'existe q u ' u n facteur 3 entre les concentrations extremes. Ce facteur associ6 h de fortes concentrations d'antigbnes, ne perrnet pas de faire a p p a r a i t r e l'h6t6rog4n6it6 rnod6r6e des anticorps naturels. C'est c e p e n d a n t uniquernent dans ces lirnites de c o n c e n t r a t i o n que sont apparues des caract6ristiques biologiques significatives. 3° I1 n ' y a seulement q u ' e n v i r o n 10 % de sites antig6niques occup6s, aussi l'utilisation de ces r4sultats dans la repr6sentation de S c a t c h a r d (FIG. 2 ) p o u r l'6valuation du n o m b r e de sites n'est-elle pas valable, dans ces conditions d'exc6s d'antig6nes. Par contre, il est possible d'6tudier la valence de l'anticorps qui c o r r e s p o n d r a i t ~t une population hornog6ne. 4° Si, j u s q u ' h rnaintenant, ces 4tudes ont 6t6 rnen6es sur s6rurn total ou sur 61uat, l'4tude d ' a n t i c o r p s purifi6s est en cours. 5° Cette rn6thode n'est pas utilisable p o u r 6tudier les anticorps secondaires h une stimulation antig6nique ; la r4partition des affinit6s dans le surnageant est diff4rente de celle du s6rum total. b) ROUTER [84] a r6alis6 une 6rude t h e r m o d y n a r n i q u e des alloh6rnagglutinines anti-A et anti-B selon une rn6thode se r a p p r o c h a n t de la rn6thode de WURMSER, mais les mesures de concentrations sont r6alis6es h l'aide d ' u n autoanalyseur. Les r6sultats sont repris selon l'6quation de WURMS~R. I1 ressort de ces travaux que : 1° Chaque s6rum poss6de une individualit6 p r o p r e cornme le rnontrent les valeurs des constantes d'association rnesur6es h 25°C et ~t 37oC. Ainsi, c o n t r a i r e m e n t ~t WURMSER les droites obtenues p o u r des sdrums p r o v e n a n t d'un rn6me g6notype n ' o n t pas la rn6rne pente. 2° Ainsi, chaque s6rurn a une variation d'enthalpie propre, mais les v a r i a t i o n s d'enthalpie" rnoyenne diff6rent d ' u n g6notype ~t l'autre. Les variations d'enthalpie rnoyenne sont proches des r4sultats obtenus p a r WUt~MSER et MAV~IDES p o u r les sujets A10, A20 et B. 3° Les variations d'enthalpie sont correl4es au logarithme de la p r o p o r t i o n d'IgM contenue dans le s6rurn.

ALLOHEMAGGLUT1NINES DU SYSTEME ABO

647

c) Les autres mdthodes thermodynamiques. Dans les t r a v a u x de GIBBS et co11. [37], les m e s u r e s d ' a n t i c o r p s sont r6alisdes selon la m 6 t h o d e de WILKIE et BECKER, et l'essentiel des rdsultats repr6sentds dans les coordonn6es de Scatchard. D e c e s t r a v a u x sur les propri6t6s t h e r r n o d y n a m i q u e s des anticorps, les conclusions suivantes p e u v e n t 6tre tir6es : les basses c o n c e n t r a t i o n s en globules rouges (3.103 h 40.103/ rnm 3) influent sur la valeur a p p a r e n t e et la distribution des affinit6s de liaison des a n t i c o r p s dans u n s6rurn naturel. Cet effet a 6t6 d6rnontrd t a n t p o u r des s6rums naturels de sujets O et A, que p o u r des s6rurns de sujets imrnunis6s p a r les substances A et B ; -

-

- - l'hdt6rog6n6it6 ainsi mise en 6vidence t r a d u i r a i t une h6t6rog6n6it6 des sites agglutinog6nes associ6e h une h6t6rog6n6it6 des alloh6rnagglutinines. N6anrnoins, et dans le syst6me globules rouges B anti-B, un s 6 r u m nature1, aprbs absorption-61ution, contient une p o p u l a t i o n d ' a n t i c o r p s a p p a r a i s s a n t cornme homog6ne p o u r leur affinit6 de liaison dans les lirnites de c o n c e n t r a t i o n s cellulaires utilis6es. ECONOMIDOU [26] a 6tudi6 les aspects quantitatifs de la fixation de diff6rentes factions ~'G et yM des agglutinines anti-A et anti-B. I1 utilise h cet effet des a n t i c o r p s et des antiglobulines r a d i o m a r q u 6 e s . ;I

L'6tude de la ~,M anti-A d ' u n sujet n o r m a l non immunis6, en a p p l i q u a n t u n e technique h l'antiglobuline a rnontr6 qu'elle 6tait constitu6e de plusieurs p o p u l a t i o n s de rnol6cules v a r i a n t 6 n o r m 6 m e n t dans leur affinit6 p o u r les globules rouges A 1. Les propri6t6s des fractions yM et yG, qu'elles p r o v i e n n e n t du lapin ou qu'elles soient d'origine h u m a i n e (sujet irnmunis6) sont a p p a r u e s c o m m e trbs proches. Ainsi, la c o n s t a n t e de vitesse de dissociation est seulernent 3 ~ 4 lois plus petite, et la c o n s t a n t e d'6quilibre 2 fois plus grande p o u r les a n t i c o r p s ~'M que p o u r les a n t i c o r p s yG. La similitude ( f a c t e u r 2 h 4) des valeurs des constantes d'6quilibre avec ces deux fractions suggbre que le m o d e de liaison des •M anti-A ou anti-B ]a s u r f a c e d u globule r o u g e p e u t 6tre le m~rne que celui des rnol~cules d ' a n t i c o r p s ~,G (c'est-h-dire a t t a c h e m e n t p a r 2 sites). L'affinit6 des sous-unit6s univalentes yM obtenues p a r r6duction et alkylation de l'anticorps natif, est environ 200 h 300 fois plus petite que celle de la ~rM native anti-B. A c e point de vue, la c o n s t a n t e d'6quilibre est du m6rne o r d r e que celle observ6e e n t r e la vG anti-A de lapin

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Ch.

et ses f r a g m e n t s univalents o b t e n u s p a r t r a i t e m e n t p a r la pepsine. Ce type d'expdrience est en f a v e u r du caract~re m u l t i f o n c t i o n n e l des anticorps. L'dtude c o m p a r a t i v e de la ~G anti-A de lapin et h u m a i n e a r6v616 des propridtds t h e r m o d y n a m i q u e s tr~s proches. Cette similitude des deux a n t i c o r p s est r e m a r q u a b l e si l'on consid~re les diff6rences de source des a n t i s d r u m s et la diff6rence des procddds de s t i m u l a t i o n antig6niques (grossesse et s u b s t a n c e s de groupes). HUMMEL et coll. [46] ont 6tudi6 certaines propridtds thermod y n a m i q u e s des fractions 7S et 19S de s6rums i m m u n s anti-A d'origine h u m a i n e . Deux c o n s t a t a t i o n s essentielles r e s s o r t e n t de ces travaux : - - D e s exp6riences de fixation sur u n h o m b r e c r o i s s a n t de globules rouges s e m b l e n t m o n t r e r que la f r a c t i o n 7S est m o i n s e x o t h e r m i q u e que la f r a c t i o n 19S. m Contre des h d m a t i e s trypsin6es, la p u i s s a n c e d'agglutination de la f r a c t i o n 7S croit, alors que celle des a n t i c o r p s 19S reste p r e s q u e identique. A 4°C les a n t i c o r p s 7S ont ainsi plus d'affinit6 que les a n t i c o r p s 19S, de m ~ m e ~ 37°C (saul p o u r de faibles c o n c e n t r a t i o n s en antig~nes).

VIII.

--

DES

NIVEAU

D'HETEROGENEITE

ALLOHEMAGGLUTININES

Actuellement, la notion d'homogdnditd et d'hdtdrogdnditd des alloh6magglutinines est tr~s discut6e ; aussi, nous 6tudierons les donndes fournies p a r les p r i n c i p a u x auteurs. P o u r l'dquipe de WURMSER [32] l'homogdn6it6 des allo-hdmagglutinines naturelles rdsulte des trois c o n s t a t a t i o n s s u i v a n t e s : 1. Les points r e p r d s e n t a n t N t / N f en fonction de 1/N' 4 se disposent sur u n e m 6 m e droite p o u r t o u s l e s s6rums donn6s a p p a r t e n a n t une m 6 m e classe. 2. L'allohdmagglutinine n o n fix6e h 37°C, ainsi que l'agglutinine 61ude ~ p a r t i r d ' u n agglutinat f o r m 6 h 37°C d o n n e n t le m 6 m e r a p p o r t N4/N37 que le s 6 r u m total. 3. Les m e s u r e s de pentes effectudes apr~s a b s o r p t i o n d'une p a t t i e de l'agglutinine du s d r u m ou sur des fractions obtenues

A L L O H E M A G G L U T I N I N E S D U S Y S T E M E ABO

p a r 41ution, m o n t r e n t que celles-ci sont identiques effectuTes sur s d r u m total.

649 aux m e s u r e s

Cette homog6n4it6 des agglutinines naturelles, raise en 6vidence dans les conditions d'dtude de WURMSER, s ' o p p o s e ~t l'hTtdrog6nTit4 des agglutinines i m m u n e s h u m a i n e s (WuRMSER a travaill4 sur des a n t i c o r p s i m m u n s trhs puissants). L'Ttude t h e r m o d y n a m i q u e de la r4action entre l'agglutinine anti-A (s4par6e de l'anti-A 1 en le fixant /~ 4°C sur s t r o m a A 2 puis en 61uant Nt. N' 4 /t 52°C), et l'antighne A m o n t r e que le p r o d u i t varie selon Nf qu'il s'agisse d ' u n 61uat de p r e m i 6 r e ou de seconde absorption, et p o u r un m ~ m e dluat suivant la valeur de Nt. Ainsi, l'41uat des agglutinines i m m u n e s anti-A fix4es sur s t r o m a A 2 p a r a i t 4tre un m41ange h4t4rog6ne. De m 6 m e , en 4tudiant le s 4 r u m total et le surnageant, l'agglutinine i m m u n e anti-A a p p a r a i t h4tTrog6ne vis-a-vis de globules rouges A 2 [31]. Des t r a v a u x r4cents [84] p e r m e t t e n t de conclure ~t une h4t4rog4n4it4 limit4e des alloh4magglutinines anti-A et a n t i - B : les points r e p r 4 s e n t a n t s N t / C f en fonction de 1/C'40 4quivalent de 1/N' 4 se disposaient sur des droites diff4rentes p o u r t o u s l e s s t r u m s , apparten a n t ~ une m ~ m e classe. Par ailleurs, et t o u j o u r s avec la re@me m 4 t h o d e de dosage, l'affinit4 des a l l o h 6 m a g g l u t i n i n e s fix4es est plus 41ev4e que celle des h6magglutinines n o n fix4es. Dans ces conditions il semble que les diff4rences observTes entre les t r a v a u x de ROU6ER et de WURMS~R sont dues en p a r t i e ~t une v a r i a t i o n darts la distrib u t i o n des affinit4s et des classes mol4culaires des anticorps. P o u r OWEN [73], l'anti-B d ' u n s 4 r u m n a t u r e l est h4t4rog6ne en f o r m e et en degr6 de sp4cificitT. Ces a n t i c o r p s sont fractionnables p a r a b s o r p t i o n sur des globules rouges animaux. A cet effet, il a utilis4 des globules rouges d e lapin, de porc, d ' o p o s s u m , de h a m s t e r , de poulet, de mouton... E n plus d'une diversit4 consid4rable des sp4cificit4s des a n t i c o r p s n a t u r e l s ~t l'int6rieur d ' u n s4rum donn4, il a not4 des diffTrences p a r m i les s t r u m s d'individus du m ~ m e groupe, et de groupes diff4rents. Les s t r u m s i m m u n s d'origine a n i m a l e p r 4 s e n t e n t des p o p u l a t i o n s d ' a n t i c o r p s avec divers degr4s de sp4cificit4s et de rTactions crois4es. Ainsi, OWEN dans cette sTrie de travaux, a p p o r t e une d 4 m o n s t r a t i o n simple de l'hTt4rogTn4it4. GOODMAN [38] a 6tudi4 l'h6tTrogdn4it6 des allohdmagglutinines

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R O U G E R Ph. et S A L M O N Ch.

h u m a i n e s n o n fractionndes p a r dlution therrnique sur une colonne de c h r o m a t o g r a p h i e et p a r a b s o r p t i o n sur des hdmaties de diffdrents g r o u p e s et sous-groupes. I1 eonclut que les alloh6magglutinines se c o m p o s e n t d ' u n large s p e c t r e d ' a n t i c o r p s diffdrents p a r le degr6 de c o m p l d m e n t a r i t 6 p o u r u n m ~ m e d d t e r m i n a n t antig6nique. ECONOMIDOU [26] a 6tudi6 u n e IgM anti-A naturelle en a p p l i q u a n t une t e c h n i q u e h l'antiglobuline radio-marqude. Cette dtude a m o n t r 6 que la c o m p o s a n t e IgM de cet anti-A n a t u r e l dtait constitude de diff6rentes p o p u l a t i o n s de mol6cules v a r i a n t d n o r m d m e n t dans leur degrd d'affinit6 p o u r l'antig6ne A. P a r des techniques d ' a b s o r p t i o n 61ution, une sdparation s61ective des diff6rentes p o p u l a t i o n s d'anticorps p e u t ~tre obtenue. L'h6t6rogdndit6 des c o n s t a n t e s de vitesse de dissociation des IgM naturelles i m p l i q u e une h6tdrogdn6itd de la c o n s t a n t e d'dquilib r e e n t r e l'IgM et l'agglutinog~ne. Les 6tudes de cindtique et de t h e r m o d y n a m i q u e ont dgalement confirmd l'hdtdrogdnditd a t t e n d u e des fractions IgG et IgM de sdrums i m m u n s h u m a i n s et de s6rums i m m u n s a n i m a u x (Cette h6tdrogdndit6 a dtd confirm6e p a r J.P. CARTRON p o u r u n e IgG anti-A de lapin t e s t f e contre t o u s l e s sousg r o u p e s de A sur une 6chelle de c o n c e n t r a t i o n antig6nique de 102. L'indice d'h6tdrogdn6it6 varie de 0,4 h 0,9 en fonction des sous groupes testds). Les t r a v a u x de GIBBS [37] a p p o r t e n t des a r g u m e n t s en f a v e u r de t'hdtdrog6nditd des allohdmagglutinines naturelles. E n faisant rdagir plusieurs dilutions d ' u n s d r u m anti-B avec une c o n c e n t r a t i o n donnde (et faible) de globules rouges B, la r e p r 6 s e n t a t i o n en coordonn6es de S c a t c h a r d donne u n e droite d o n t la p e n t e varie si l'on fair varier la c o n c e n t r a t i o n globulaire. En g r a n d exc~s d ' a n t i c o r p s la reprdsentation selon S c a t c h a r d p r e n d un aspect curviligne tdmoin de l'inhomogdn6it6 de liaison due h l'hdtdrog6nditd des a n t i c o r p s n a t u r e l s (et selon r a u t e u r h l'hdt~rogdndit6 des antig6nes). MORENO et KABAT [69] ont 6tudi6 l'hdtdrogdndit6 du c o m p o r t e m e n t des a n t i c o r p s i m m u n s anti-A q u a n t aux propridt6s de leur site c o m b i n a n t . Ces a n t i c o r p s ont d ' a b o r d 6t6 fixds sur un i m m u n o a b s o r b a n t ( s u b s t a n c e A) puis 61uds p a r le GalNac, pui s ARL 052 ( p e n t a s a c c h a r i d e s ) ; les 61uats ont ensuite dtd fractionnds en IgG et IgM. Ces fractions ont dt6 test6es p a r des 6preuves de pr6cipitation, d'agglutination, de fixation du c o m p l 6 m e n t , d'hdmolyse, d'inhibition et de dialyse h l'dquilibre. Les a n t i c o r p s dluds p a r la N-acdtylgalacto-

ALLOHEMAGGLUTININES DU SYSTEME ABO

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s a m i n e s o n t i n h i b 6 s p a r le N - a c 6 t y l g a l a c t o s a m i n e a u s s i b i e n q u e p a r les o l i g o s a c c h a r i d e s a l o r s q u e les f r a c t i o n s 61u6es p a r A R L 052 n e s o n t i n h i b 6 e s q u e p a r les o l i g o s a c c h a r i d e s , ce q u i i m p l i q u e q u e l'61uat d e la N - a c d t y l g a l a c t o s a m i n e p o s s ~ d e d e s a n t i c o r p s a u site c o m b i n a n t d e p e t i t e taille, p a r r a p p o r t a u x a n t i c o r p s 61u6s p a r l ' o l i g o s a c c h a r i d e . Les c o n s t a n t e s d ' 6 q u i l i b r e ( f a i b l e , d e l ' o r d r e d e 104) d e s 61uats A R L 052, s o n t 1 6 g b r e m e n t p l u s 61ev6es q u e c e l l e s d e s a u t r e s 61uats. P a r a i l l e u r s , l'61uat A R L 052 n e p o s s b d e q u e d a n s u n c a s s u r t r o i s , u n e I g M ( s e u l e m e n t 18 %), a l o r s q u e l'61uat N a c G a l p o s s b d e u n e I g M d a n s les t r o i s c a s (30 % e n m o y e n n e ) . L e s I g G d e l'61uat G a l N a c s o n t e n m o y e n n e m o i n s a g g l u t i n a n t e s q u e les I g G d e l'61uat A R L 052 vis-h-vis d e g l o b u l e s r o u g e s A r Les I g M f o r m e n t e n m o y e n n e d e m e i l l e u r s a g e n t s a g g l u t i n a n t s . T o u s ces r 6 s u l t a t s t 6 m o i g n e n t d ' u n i m p o r t a n t d e g r 6 d ' h 6 t 6 r o g 6 n 6 i t 6 e n p a r t i e li6 h la s t r u c t u r e d u s i t e a n t i c o r p s c o m b i n a n t . E n d i s c u t a n t la r 6 p a r t i t i o n d e s a f f i n i t 6 s ( f o n c t i o n n e l l e s ) , il s e m b l e p r o b a b l e q u e les a l l o h 6 m a g g l u t i n i n e s n a t u r e l l e s r 6 p o n d e n t h u n c o n c e p t d ' h d t 6 r o g 6 n 6 i t 6 l i m i t 6 e , et q u e les a n t i c o r p s i m m u n s c o r r e s pondent ~ une h6t6rog6n~it6 plus large. Docteur P. ROUGER,

Centre National de Transfusion Sanguine, Service d'Immunologie, 53, b o u l e v a r d Diderot, 75571 PARIS Cedex 12.

BIBLIOGRAPHIE [1] ABELSONN. M. and RAWSON A.T. - - Studies of blood group antibodies. V. F r a c t i o n a t i o n of examples of anti-B, anti-AB, anti-M, anti-P, anti-Jk a, anti-Le a, anti-D, anti-CD, anti-K, anti-Fya a n d anti-Good. Transfusion (Philad.), 1, 116, 1961. [2] ADINOLFIA., MOLLISON P.L., POLLEY J. and ROSE M. - - y A b l o o d group antibodies. J. Exp. Med., 123, 951, i966. [3] ALLEN P.Z. and KABAT E.A. - - Persistance of circulating antibodies in h u m a n subjects i m m u n i z e d w i t h dextran, levan and b l o o d group substances. J. Immunol. 80, 495, 1958. [4] ALLEN F.H., ISSlTT P.D., DEGNAN T.J., JACKSON A.V. REIHART K., KNOWLIN R.J. and ADEBAHR M. - - F u r t h e r observations on the Matuhasi-Ogata phenomenon. V o x Sang., 16, 47, 1969. [5] AHO K. a n d CFIRISTIAN C. - - Studies of incomplete antibodies I, effet of papaYn on r e d cells. Blood, 27, 662, 1966. [6] ANDR~ A., DREYFUS B., SALMON Ch. et MALASSENETR. - - Les donneurs universels dangereux. Recherches sur les causes d ' i m m u n i s a t i o n c o n t r e l'antig~ne A. Rev. Hdmat., 7, 604, 1952.

652

ROUGER Ph. et SALMON Ch.

[7] ANDRI~A., DREYFUS B., SALMON Ch. MALASSENET R. et FOSTER M.B. - Recherche Bur les causes d ' i m m u n i s a t i o n contre l'antig~ne A. Rev. H~mat., 7, 606, 1952. [83 ANDR~ R. et SALMON Ch. - - Leuc6mie lymphoide et iso-anticorps. Nouv. Rev. frang. Hdmatol., 1, 768, 1961. [9] BAUMGARTEN A., KRUCHOK A . H . a n d WEIRICH F. - - High frequency of IgG anti-A a n d B antibody in old age. Vox Sang., 30, 253, 1976. [10] BELL C.E. a n d FORTWENGLER H.P. - - Salivary anti-A and anti-B activity of group O males. Vox Sang., 21, 493, 1971. [11] BIRD G.W.G. - - Observations on h a e m a g g l u t i n i n ~ linkage ~ in relation to isoagglutinins a n d auto agglutinins. Brit. J. Exp. Path., 34, 131, 1953. [12] BIRD G.W.G. - - The hypothetical factor C of the ABO system of blood groups. Vox Sang. (O.S.), 4, 66, 1954. [133 BIRD G.W.G. a n d WINGHAMJ. - - Changes in specificity of erythrocyte autoagglutinins. Vox Sang., 22, 364, 1972. [14] BOETTCHER B. - - ABO Blood group agglutinins in saliva. Acta Haemat., 38, 351, 1967. [15] BOURNSELL J.C., COOMBS R.R.A. and RISK V. - - Studies with m a r k e d antisera. Quantitative studies with antisera m a r k e d with iodine 1~1 isotope and their corresponding red cell antigens. Biochem. J., 55, 745, 1953. [16] BOVE J.R., HOLBURN A.M. a n d MOLISON P.L. - - Non specific b i n d i n g of IgG to a n t i b o d y coated red ceils (The Matuhasi-Ogata p h e n o m e n o n ) . Immunology, 25, 793, 1973. [17] COOK G.W.G., HEARD D.H. a n d SEAMAN G.V.F. - - A sialomucopeptide liberated by t r y p s i n from the h u m a n erythrocyte. Nature, 188, 011, 1960. [18] DAVlDSOHN I. - - I s o a g l u t i n i n titers in s e r u m disease, in leukemias, in infectious mononucleosis a n d after blood transfusions. Amer. J. Clin. Pathot., 8, 179, 1938. [19] DOINEL C., ROPARS C. a n d SALMON Ch. - - Anti-I (A + B ) : an autoa n t i b o d y detecting an antigenic d e t e r m i n a n t of I a n d a c o m m o n p a r t to A and B. Vox Sang., 27, 515, 1974. [20] DODD B.E. - - Linked anti-A anti-B antibodies from group O sera. Brit. J. Exp. Path., 33, 1, 1952. [21] DODD B.E. - - F u r t h e r studies of antibody molecules having both A a n d B specificity. Trans. 6th Congre. europ. Soc. Haemat., 733, 1958. [22] DODD B.E., LINCOLN P.J. a n d BOORMAN K.E. - - The cross-reacting antibodies of group O s e r a : i m m u n o l o g i c a l studies a n d possible explanation of the observed facts. Immunology, 12, 39, 1967. [23] DUNSEORDI. - - Group A blood weaker ill reaction t h a n AD. Bull. Centr. Lab. Bloedtr. Dienst., 2, 209, 1952. [24] ECONOMIDOU J.Ph.D. - - Thesis London University (1966). [25] ECONOMIDOU J., HUGHES-JONES N.C. and GARDNER B. - - Quantitative m e a s u r e m e n t s concerning A and B antigens sites. Vox Sang., 12, 321, 1967.

ALLOHEMAGGLUTININES DU SYSTEME ABO [26] ECONOMIDOU J., HUGHES-JONES N.C. and GARDNER B. - -

653

The functional activities of IgG and IgM anti-A and anti-B. Immunology, 13, 227, 1967. [27] EYLAR E.H., MADOFE M.A., BRODY O.V. and ONCLEY J.L. - - The contrib u t i o n of sialic acid to the surface charge of the erythrocyte. J. Biol. Chem., 237, 1992, 1962. [28] FILITTI-WURMSERS., JACQUOT-ARMANDY., AUBEL LESURE G. and WURMSER R. - - Physicochemical study of h u m a n isohaemagglutination. Ann. Eugen. (Lond.), 18, 183, 1954. [29] FILITTI-WuRMSER S. and JACOUOT-ARMANOY. - - E t u d e quantitative de l'isoh6magglutination. Rdversibilit6 de l'isoh6magglutination. Arch. Sc. Physiol., 1, 151, 1947. [30] FILITTI-WuRMSER S., JACQUOT-ARMANDY. and WURMSER R. - - Sur la combinaison des isohdmagglutinines avec des groupes agglutinoghnes. J. CAirn. Phys.; 47, 419, 1950. [31] FILITTI-WuRMSER S. and JACQUOT-ARMANDY. - - E t u d e quantitative de l'h4tdrogGnGit6 des agglutinines anti-A ou anti-B i m m u n e s des sGrums humains. Rev. Hdmat., 15, 25, 1960. [32] FILITTI-WURMSER S. JACQUOT-ARMANDY. and WURMSER R. - - Sur les isohGmagglutinines naturelles du systGme ABO. RGponse h des critiques parues dans un livre de E.A. Kabat. Rev. Hdmat., 15, 201, 1960. [33] FILITTI-WURMSER S. Classement des agglutinines ~, naturelles ~ anti-B en deux sortes d ' i m m u n o g l o b u l i n e s IgM selon le gdnotype A10 ou OO donneur. C.R. Acad. Sc. (Paris), 272, 2612, 1971. [34] FRANKS D. and LISKE R. - - The specificity of the cross-reacting antibodies in blood group O sera wh i ch p r o d u ce mixed agglutination. Immunology, 14, 433, 1968. [35] GERBAL A., HOMBERG J.C., ROCHANT H., PERRON L. et SALMON Ch. - Les a u t o a n t ic o r p s d'anGmies hGmolytiques acquises. Nouv. Rev. franG Hdmat., 8, 155, 1968. [36] GERSHOWITZ H., BEHRMAN S.J. and NELL J . V . . . Hemagglutinins in uterine secretions. Science, 128, 719, 1958. [37] GIBBS M.B. and TORO H.A. - - The binding of naturally occuring anti-B isohemagglutinins to the B antigens of h u m a n erythrocytes. J. of Immunol., 98, 461, 1967. [38] GOODMANH.S. - - Analysis of the i m m u n e agglutination of red cells. Transfusion (Phil.), 2, 327, 1962. [39] GREENBURY C.L., MOORE D.H. and NUNN L.A. - - Reaction of 7S and 19S c o m p o n e n t s of i m m u n e rabbit antisera with h u m a n group A and B red cells. Immunology, 6, 421, 1963. [40] GREENBURY C.L., MOORE D.H. and NUNN L.A. - - The reaction with red cells of 7S rabbit antibody its subunits and their recombinants. Immunology, 8, 420, 1965. [41] GRUNDBACHERF.J. - - Quantity of hemolytic anti-A and anti-B individuals of a h u m a n p o p u l a t i o n : correlations with iso-agglutinins and effects of the individual's age and sex. Zft. Immunitiitsforsch., 134, 317, 1967. [42] HEIDELBERGER M. and KABAT E.A. - - Chemical studies on bacterial agglutination reaction m e c a n i s m and q u a n t i t a t i v e theory. J. Exp. Med., 56, 885, 1937. -

-

654

ROUGER Ph. et SALMON Ch.

[43] HEISTO H . a n d UGGERUD B . - - Seasonal fluctuations in blood group antibodies hemoglobin c o n c e n t r a t i o n a n d s e d i m e n t a t i o n rate in M a n : negative findings. J. Osto City Hosp., 22, 17, 1972. [44] HOLBURN A.M. - - R a d i o i m m u n o a s s a y studies of the cross-reacting a n t i b o d y of h u m a n group O sera. Brit. J. Haemat., 32, 589, 1976. [45] HUGHES-JONES N.C., GARDNER B. a n d TELFORD R. - - The exchange of lalI-lahelled lipid a n d 131I labelled p r o t e i n between red cells a n d serum. Biochem. ]., 85, 466, 1962. [46] HUMMEL K. u n d GOTZE O. - - Quantitative Studien Uber die Bindungs u n d Agglutinations fahigkeit yon A - I m m u n a n t i k o r p e r n des TG- u n d TM-Typs bei verschiedener T e m p e r a t u r (4 °, 37°C). Zft. I m m u n i tatsfors. Aller. und. Ktin. Immunot., 131, 50, 1966. [47] HUMMEL K. a n d SCHOCI-I~. - - U n t e r s u c h u n g e n fiber die Ausscheidung yon anti-A u n d anti-B H S m a g g l u t i n i n e n i m menschlichen Mundspeichel.Zft. Immunitatsfors. ~tler und Klin. ImmunoI., 133, 80, 1967. [48] ISHIZAKAK., ISHIZAKAT., LEE E.H. a n d FUDENBERG H.H. - - I m m u n o chemical properties of h u m a n TA isohemagglutinin. I. Comparisons with TG a n d TM globulin antibodies. J. Immunot., 95, 197, 1965. [49] JACQUOT-ARMAN3Y. - - Etude des isohdmagglutinines anti-A pr6sentes dans les s6rums h u m a i n s de groupe O. Rev. Hdmat., 13, 305, 1958. [50] JAKOBOWICZ R., GRAYDON J.J. a n d SIMMONS R.T. - - Observations on saliva agglutinins. Med. J. Aust., 1, 399, 1966. [51] JAKOBOWlCZR., EHRLIEH M~ a n d GRAYOON3. - - Cross reacting antibody a n d saliva agglutinin. Vox Sang., 12, 340, 1967. [52] JUEL E. - - Anti-A agglutinins in sera from A2B individuals. Acta Path. Microbiol. Scand., 46, 91, 1959. [53] KABAT E.A. - - The blood group Substances, p. 267, Acad. Press, New York, 1956. [54] KAaATE.A. - - B l o o d Group Substances. Their chemistry and i m m u n o chemistry. Acad. Press, New York, 1956. [55] KONUGRESA. and COOMBSR.R.A. - - Studies on an h u m a n anti-A sera with special reference to so-called ,, i m m u n e ,, anti-A. Brit. J. Haemat., 4, 261, 1958. [56] LANDSTEINERK. a n d WITT D.H. - - Observations on the h u m a n blood groups. Irregular reactions. Iso-agglutinin in sera of group 4. The factor At. J. Immunol., 11, 221. 1926. [57] LINCOLN P.J. a n d DODD B.E. - - Antigen-antibody studies in the ABO blood group system with p a r t i c u l a r reference to cross-reacting antibodies in group O sera. Immunology, 16, 301, 1969. [58] LOPEZ M. - - C o m m u n i c a t i o n personnelle. [59] LOPEZ M., BANOPOULOSH., LIBERGE G. and SALMON Ch. - - A cold autoagglutinin of anti-B spectificity in an A1B patient. Vox. Sang., 28, 5, 1975, [60] LOPEZ M., BADETJ., SACHS V. a n d SALMON Ch. - - F u r t h e r investigation on auto antibodies with anti-B specificity (en preparation). [16] MASS0UREDIS S.P. - - Ractions of F al trace labelled h u m a n antiRho (D). J. CIin. Invest., 38, 279, 1959.

ALLOHEMAGGLUTININES DU SYSTEME ABO

655

[62] MATUHASIT. and UsuI M. - - F u r t h e r studies on non specific antibody adhesion onto the antigen-antibody complex. Proc. Ist Asian Congres. Blood Transl. Hakone, Japan, 1963, 209, 1963. [64] MAVRIDESS. - - S u r l'agglutinog6ne A et les isohdmagglutinines anti-A C.R. Acad. Sc., 236, 1212, 1953. [65] MAVRIDES S. - - Donn6es t h e r m o d y n a m i q u e s relatives aux 6quilibres en t r e isoagglutinines et agglutinog6nesA. J. Chim. Phys., 52, 1, 1955. [66] MAVEDAK. - - Study of the seasonal v ar i at i o n of naturally occuring anti-A a n d anti-B antibodies of man. Amer. J. Med. Tech., 32, 187, 1966. [67] McSHIRE R.L. and KUNST V.A.J.M. - - The s t i m u l a t i o n of i m m u n e antibodies anti-A and anti-B patients after t r e a t m e n t w i t h cryoprecipitate and f a c t o r I X c o n c e n t r a t e (P.P.S.B. according to Soulier). Vox Sang., 18, 435, 1970. [68] MOLLISONP.L. - - Blood Transfusion in Clinical Medicine. Fifth edition, (second printing). Blackwell Sientific Publications, 1974. [69] MORENO C. and KABAT E.A. - - Studies on h u m a n antibodies. V I I I Properties and association constants of h u m a n antibodies to blood group A substance purified w i t h insoluble specific adsorbants and fractionnaly eluted w i t h m o n o and oligossacharide. J. Exp. Med., 129, 871, 1969. [70] MOULLEC J. - - S u b s t a n c e A des hdmaties humaines et anatoxine diphtdrique. C.R. Soc. Biol., 141, 20, 1974. [71] OGATAT. and MATUHASIT. - - Problems of specific and cross reactivity of blood group antibodies. Proc. 8th Congr. int. Soc. Blood Transl., Tokio, 1960, 208, 1962. [72] OTTENSOOSERF. - - Uber die G r u p pen su b st an z A des Peptons u n d des Diphtherietoxins. Klin. Wschr., 41, 1716, 1932. [73] OWEN R.D. - - H e t e r o g e n e i t y of antibodies to the h u m a n blood in n o r m a l and i m m u n e sera. J. Immunol., 73, 29, 1954. [743 PARISH W.E., CARRON-BROWN J.A. and RICHARDS C.B. - - The detection of antibodies to s p e r m a t o z o a and to b l o o d group antigens in cervical mucus. J. Reprod. Fertil., 13, 469, 1967. [75] POLLEY M.J., ADINOLFI M. and MOLLISON P.L. - - Serological characteristics of anti-A r e l a t e d to type of antibody p r o t ei n (7ST or 19ST). Vox Sang., 8, 385, 1963. [76] PROKOP O. - - Studies on the excretion of antibodies in saliva. Cong. Leg. Med., Vienna, 1961. [77] PROKOP O., BUNDSCHUH G. and GESERICK G. - - Uber Blutgruppenreaktionen in der Tranenflussigkeit. Dtsch. Ges. Wesen, 27, 1162, 1963. [78] PUTKONEN T. - - Uber die gruppenspezifischen Eigenschaften verschiedener Korperflussigkeiten. Acta Soc. Med. [emm., ~ D u o d e c i m ~, A, 14, 113 (1930). Translations published by the Blood Transfusion Division, U.S. Army Medical Research Laboratory, F o r t Knox, Kentucky, 40121. [79] RACE R.R., SANGER Ruth. - - Blood Groups in Man. Sixth Edition. Blackwell Scientific Publications, 1975. [80] RAWSON A.J., ABELSON N.M. and NEVA M. - - Studies of blood group antibodies. IV Physicochemical differences b e t w e e n iso-anti-A, B and iso-anti-A or iso-anti-B. J. Immunol., 85, 640, 1960.

ROUGER Ph. et SALMON Ch.

656

[81] ROCHANT H., GERBAL A., NAJMAN A., SALMON D., GREMY F., SALMON Ch. et CAROLI J . Analyse des conditions d ' a p p a r i t i o n des anticorps au cours des cirrhoses h6patiques. Nouv. Rev. fran G Hdmat., 7, 415, 1967. [82] ROEHANT H., TONTHAT H., ETIEVANT M.F., INTRATOR L., SYLVESTRE R. et DREYFUS B . - - Larnbda cold agglutinin with anti-A1 specificity in a p a t i e n t w i t h r e t i c u l o s a r c o m a . Vox Sang., 22, 45, 1972. [83] ROUGER Ph. - - Rdsultats personnels. -

-

[84] ROUGER Ph. and SALMON Ch. - - T h e r m o d y n a m i c studies of anti-A and anti-B antibodies (~a paraitre). [85] ROSENFIELD R.E. - - AB h e m o l y t i c disease of the newborn. Prog. Amer Ass. of Blood Banks. Also (1955) AB hernolytic disease of the n e w b o r n - analysis of 1,480 cord b l o o d specimens, with special reference to the direct antiglobulin test and to the role of the group O m o th e r . Blood, 10, 17, 1953. [86] ROSENFIELD R.E. and OHNO G. - - A-B hernolytic disease of the newborn. Rev. Hemat., 10, 231, 1955. [87] SALMON Ch. et HAUTENAUVEM. - - E t u d e t h e r r n o d y n a m i q u e de l'anticorps anti-B des sujets de ph6notype Ax. Nouv. Rev. fr. Hemat., 1, 847, 1961. [88] SALMON Ch., SALMON Denise et SAINT-PAuL B. - - Relation en t r e 1'antigOne ABH des h6rnaties et la s t r u c t u r e de l'isoh6rnagglutinine r6v616e par des rnodifications r6versibles d'affinit6. Nouv. Rev. franG Hdmat., 5, 95, 1965. [89] SALMON Ch. and SALMON D. - Anornalies t h e r m o d y n a m i q u e s de l'anticorps anti-B chez un leuc6rnique avec antigone A rnodifi6. Nouv. Rev. frang. Hdmat., 3, 653, 1963. [90] SALMON Ch. LOPEZ M., GERBAL A., BOUGUERRAA. and CARTRON J.P. - C u r r e n t genetic p r o b l e m s in the ABO blood group system. Biomed., 18, 375, 1973. [91] SALMONCh., LOPEZ M., CARXRONJ.P. and BOUGUERRAA. - - Quantitative and t h e r m o d y n a m i c studies of e r y t h r o c y t i c ABO antigens. Transfusion (Philad.), 16, 580, 1976. [92] SCHIFFMAN G. and Howe C. - - The specificity of blood group A-B cross-reacting antibody. J. lmmunol., 94, 197, 1965. [93] SCHLESINGER D. and OSINKA M. - - The influence of p r eg n an cy on salivary secretion of group iso-antibodies. Arch. I m m u n . Terap. Losveiad., 12, 297, 1964. [94] SHAW D.H. STONE ~/.H. - - Seasonal v ar i at i o n of n at u r al occuring isoantibodies of man. Trans. 6th Congr. europ. Soc. Hernat., 724, 1957. [95] SHRAND H. - - Visceral larva rnigrans - Toxocara canis infection. Lancet, 1, 1357, 1964. [96] SMITH G.H. - -

Isoagglutinin

titres

in

heterospecific

pregnancy.

J. Path. Bact., 57, 113, 1945. [97] SOLISH G.L., GERSHOWITZ H. and BEHRMAN S.J. - - Occurence and titer of isohemagglutinins in secretions of the h u m a n u t er i n e cervix. Proc. Soc. Exp. Biol. Med. (N.Y.), 108, 645, 1961.

ALLOHEMAGGLUTININES DU SYSTEME ABO

657

[98] SOLOMONJ.M., GIBBS M.B. and BOWDLERA.J. - - Methods of quantitative h e m a g g l u t i n a t i o n Part I. Vox Sang., 10, 54. 1965. [99] SOLOMONJ.M., GIBBS M.B. and BOWBLERA.J. - - Methods of quantitative h e m a g g l u t i n a t i o n Part. II. Vox Sang., 10, 133, 1965. [I00] SOMERS H. and KUHNS W.J. - - Blood group antibodies in old age. Proc. Soc. Exp. Biol. Med., 141, 1104, 1972. [101] SPRINGER G.F. and TRITEL I--I. Influenza virus vaccine and blood group A-like substances. J. Amer. Med. Ass., 182, 1341, 1962. [102] SPRINGER G.F., HORTON R.E. and FORBES M. I m m u n o g e n e t i c origin of anti-human blood-group agglutinins in (, g e r m f r e e ,, chicks. Fed. Proc., 17, 535, 1958. [103] SPRINGER G.F., HORTON R.E. and FORBES B. - - Origin of anti-human blood group B agglutinins in w h i t e Leghorn chicks. ]. Exp. Med., 110, 221, 1959. [104] SPRINGER G.F., HORTON R.E. and FORBES M. - - Origin of a n t i h u m a n blood group B agglutinins in g e r m f r e e chicks. Ann. N.Y. Acad. Sci., 78, 272, 1959. SPRINGER G.F. and HORTON R.E. - - Blood group isoantibody stimulation in m a n by feeding blood group active bacteria. J. Ctin. Invest., 48, 1280, 1969. -

-

-

-

[ 1 0 5 ]

[106] SPRINGER G.F. and TEGTMEYER H. Absence of B antibody in a blood group A1 person. Vox Sang., 26, 247, 1974. [107] THOMSEN O. and KETTEL K. - - Die S t a r k e der menschlichen Isoagglutinine u n d e n t e p r e n c h e n d e r B l u t k o r p e r c h e n r e z e p t o r e n in verschiedenen Lebensaltern. Zft. Immun-Forsch, 63, 67, 1929. [108] TOIVENEN P. and HIRVONEN T. - - Iso and heteroagglutinins in h u m an fetal and neonatal sera. Scand. J. Haemat., 6, 42, 1969. [109] TOVEY L.A.D., TAVERNER J.M. and LONGSTER G.H. - - The effect of e n v i r o n m e n t on ABO antibodies. Vox. Sang., 19, 64, 1970. -

-

[110] WIENER A.S. Blood Groups and Transfusion, 3 rd edition, Thomas, Springfield, 1943. [111] WIENER A.S., SOBLER and POLIVKAH. - - Simple m e t h o d of preparing potent blood grouping sera. Proc. Soc. Exp. Biol. Med. (N.Y.), 58, 310, 1965. [112] WIENER A.S., SAMWICK A.A., MORRISON H. and COHEN L. - - Studies on i m m u n i z a t i o n in man. I the blood group substances A and B Exp. Med. Surg., 11, 267, 1953. [113] WILKIE M.H. and BECKER E.L. - - Quantitative studies in haemagglutination. I assay of anti-B isohaemagglutination. J. Immunol., 74, 192, 1955. [114] WILKIE M.H. and BECKER E.L. - - Quantitative studies in haemagglutination. II. Effect of certain variable upon the isohemagglutination assay. J. ImmunoI., 74, 199, 1955. [115] WURMSER R. and FILITTI-WURMSER S. T h e r m o d y n a m i c study of the isohemagglutinins. In ,, Progress in Biophysics ,, (Butler and Noble Ed.) Vol 7, p. 87, Pergamon, Oxford, 1957. -

-

-

-

[116] WURMSER R. T h e r m o d y n a m i c study of antigen-antibody reactions. I n ,, e x p e r i m e n t a l Methods in Biophysical Chemistry ~,. (Nicolau Ed.), p. 613, WILEY (London, 1972). -

-