- Email: [email protected]
Podwyższona ekspresja genu PIM-2 jest czynnikiem wysokiego ryzyka u pacjentów z ostrą białaczką szpikową (OBS)
144
acta haematologica polonica 46s (2015) 139–146
FLT3-ITD was detected in 42/140 (30%) patients. Compared with FLT3-ITD negative patients, FLT3-TD positive patients had higher median white blood cells count at diagnosis (71x109/l vs. 28x109/l, p <0.001). At three years, relapse incidence (RI) following allo-HSCT in AML patients with intermediate/normal karyotype was significantly higher in those FLT3-ITD positive than FLT3-ITD negative (52.9 vs. 20.4%, p=0.002). A borderline difference in three-year leukemia-free survival (LFS) was found between intermediate/normal karyotype patients who were FLT3-ITD positive and those negative, respectively, as 44.7% and 67.6%, p=0.06. Additionally, patients with mild chronic GvHD (cGvHD) had significantly lower RI compared to patients with moderate or severe grade cGvHD or those not experiencing cGvHD, respectively, as 4.8% vs. 36.0% vs. 27.8%, p=0.032. We did not observe any differences in LFS in accordance to overall incidence of cGvHD, but we found that mild cGvHD may positively influence LFS when comparing to the group of patients with no cGvHD or moderate/severe grade of cGvHD, respectively, as 88.4% vs. 67.5% vs. 61.7%, p=0.06. We observed that FLT3-ITD was harboring a poor prognosis in AML patients who underwent alloHSCT with myeloablative conditioning in first CR, mainly in those with intermediate or normal karyotype and significantly increased risk of relapse. Therefore, patients with high molecular risk AML may not be curable even following alloHSCT, unless they develop symptoms of mild cGvHD and concomitant GvL which may decrease RI. http://dx.doi.org/10.1016/j.achaem.2015.07.184
Podwyższona ekspresja genu PIM-2 jest czynnikiem wysokiego ryzyka u pacjentów z ostrą białaczką szpikową (OBS) K. Kapelko-Słowik 1,*, T. Owczarek 2, D. Urbaniak-Kujda 3, K. Grzymajło 2, B. Jaźwiec 4, M. Słowik 5, K. Kuliczkowski 1, M. Ugorski 2 1 Katedra i Klinika Hematologii, Chorób Rozrostowych Krwi i Transplantacji Szpiku UM we Wrocławiu, Polska 2 Katedra Biochemii, Farmakologii i Toksykologii Uniwersytet Przyrodniczy we Wrocławiu, Polska 3 Katedra i Klinika Hematologii, Chorób Rozrostowych Krwi i Transplantacji Szpiku UM Wrocławiu, Polska 4 Katedra i Klinika Hematologii, Chorób Rozrostowych Krwi i Transplantacji Szpiku UM Wrocław, Polska 5 Katedra i Klinika Okulistyki UM we Wrocławiu, Polska *Autor prezentujący i do korespondencji. Adres email: [email protected] Słowa kluczowe: PIM-2, ostra białaczka szpikowa, apoptoza Wstęp: Gen PIM-2 koduje kinazę serynowo-treoninową, która odgrywa rolę w przenoszeniu różnych sygnałów. Wysoką ekspresję PIM-2 stwierdzono w nowotworach litych oraz w białaczkowych i chłoniakowych liniach komórkowych, co ma związek z jego rolą w procesie transformacji nowotworowej. Znaczenie ekspresji PIM-2 w OBS jest niejednoznaczne. Celem badań była ocena ekspresji PIM-2 jako markera prognostycznego w OBS oraz zbadanie jego wpływu na na apoptozę i proliferację komórek białaczkowych. Pacjenci: Do badań włączono 91 chorych na OBS oraz 24 osoby zdrowe. Szpik pobierany był przy rozpoznaniu, u 20 pacjentów także w fazie CR. Metody: Ekspresja PIM-2 oceniona poprzez RNAseq i zaprezentowana jako z-score została pobrana z cBioPortal. Ekspresję mRNA PIM-2 u chorych zbadano metodą RQ-PCR. Pomiar apoptozy i proliferacji blastów wykonano przy użyciu standardowych metod. Zablokowanie PIM-2 w linii białaczkowej HL-60 wykonano metodą RNA i oceniono apoptozę komórek HL-60/ PAC-GFP i HL-60/PAC-GFP-shPIM-2. Ekspresję białek: PIM-2, BAD, 4E-BP1 p-BAD, p-4E-BP1 zbadano przy użyciu Western blot. Wyniki: Mediana ekspresji PIM-2 u chorych na OBS była wyższa niż w grupie kontrolnej. Pacjenci z wysoką ekspresją wykazywali krótszy LFS (leukemia free survival) niż chorzy z niższą ekspresją. Analiza przeżycia Kaplana-Mayera potwierdziła, że wysoka ekspresja PIM-2 jest związana ze złą prognozą. Chorzy, którzy osiągnęli CR, wykazywali niższy wyjściowy poziom ekspresji PIM-2 w porównaniu z pacjentami bez CR. Ekspresja genu normalizowała się w fazie CR. Wykazaliśmy także nadekspresję kinazy PIM-2 oraz jej czynników docelowych: BAD, 4E-BP1, p-BAD i p-4E-BP1. Ponadto ujawniliśmy ujemną korelację pomiędzy ekspresją genu PIM-2 a odsetkiem komórek blastycznych w całkowitej apoptozie. Cytometryczna analiza linii HL-60/PAC-GFP i HL-60/PAC-GFP-shPIM-2 wykazała zwiększony odsetek komórek apoptotycznych po zahamowaniu PIM-2. Wnioski: Nasze badania wykazały, że podwyższona ekspresja genu PIM-2 jest złym czynnikiem prognostycznym w OBS, co może wynikać z oporności komórek białaczkowych na apoptozę indukowaną przez cytostatyki. Możemy wysunąć hipotezę, że pacjenci z OBS, którzy wykazują podwyższoną ekspresją PIM-2, mogą rozwijać oporność na terapię indukcyjną, co negatywnie wpływa na całkowite przeżycie. http://dx.doi.org/10.1016/j.achaem.2015.07.185
acta haematologica polonica 46s (2015) 139–146
FLT3-ITD was detected in 42/140 (30%) patients. Compared with FLT3-ITD negative patients, FLT3-TD positive patients had higher median white blood cells count at diagnosis (71x109/l vs. 28x109/l, p <0.001). At three years, relapse incidence (RI) following allo-HSCT in AML patients with intermediate/normal karyotype was significantly higher in those FLT3-ITD positive than FLT3-ITD negative (52.9 vs. 20.4%, p=0.002). A borderline difference in three-year leukemia-free survival (LFS) was found between intermediate/normal karyotype patients who were FLT3-ITD positive and those negative, respectively, as 44.7% and 67.6%, p=0.06. Additionally, patients with mild chronic GvHD (cGvHD) had significantly lower RI compared to patients with moderate or severe grade cGvHD or those not experiencing cGvHD, respectively, as 4.8% vs. 36.0% vs. 27.8%, p=0.032. We did not observe any differences in LFS in accordance to overall incidence of cGvHD, but we found that mild cGvHD may positively influence LFS when comparing to the group of patients with no cGvHD or moderate/severe grade of cGvHD, respectively, as 88.4% vs. 67.5% vs. 61.7%, p=0.06. We observed that FLT3-ITD was harboring a poor prognosis in AML patients who underwent alloHSCT with myeloablative conditioning in first CR, mainly in those with intermediate or normal karyotype and significantly increased risk of relapse. Therefore, patients with high molecular risk AML may not be curable even following alloHSCT, unless they develop symptoms of mild cGvHD and concomitant GvL which may decrease RI. http://dx.doi.org/10.1016/j.achaem.2015.07.184
Podwyższona ekspresja genu PIM-2 jest czynnikiem wysokiego ryzyka u pacjentów z ostrą białaczką szpikową (OBS) K. Kapelko-Słowik 1,*, T. Owczarek 2, D. Urbaniak-Kujda 3, K. Grzymajło 2, B. Jaźwiec 4, M. Słowik 5, K. Kuliczkowski 1, M. Ugorski 2 1 Katedra i Klinika Hematologii, Chorób Rozrostowych Krwi i Transplantacji Szpiku UM we Wrocławiu, Polska 2 Katedra Biochemii, Farmakologii i Toksykologii Uniwersytet Przyrodniczy we Wrocławiu, Polska 3 Katedra i Klinika Hematologii, Chorób Rozrostowych Krwi i Transplantacji Szpiku UM Wrocławiu, Polska 4 Katedra i Klinika Hematologii, Chorób Rozrostowych Krwi i Transplantacji Szpiku UM Wrocław, Polska 5 Katedra i Klinika Okulistyki UM we Wrocławiu, Polska *Autor prezentujący i do korespondencji. Adres email: [email protected] Słowa kluczowe: PIM-2, ostra białaczka szpikowa, apoptoza Wstęp: Gen PIM-2 koduje kinazę serynowo-treoninową, która odgrywa rolę w przenoszeniu różnych sygnałów. Wysoką ekspresję PIM-2 stwierdzono w nowotworach litych oraz w białaczkowych i chłoniakowych liniach komórkowych, co ma związek z jego rolą w procesie transformacji nowotworowej. Znaczenie ekspresji PIM-2 w OBS jest niejednoznaczne. Celem badań była ocena ekspresji PIM-2 jako markera prognostycznego w OBS oraz zbadanie jego wpływu na na apoptozę i proliferację komórek białaczkowych. Pacjenci: Do badań włączono 91 chorych na OBS oraz 24 osoby zdrowe. Szpik pobierany był przy rozpoznaniu, u 20 pacjentów także w fazie CR. Metody: Ekspresja PIM-2 oceniona poprzez RNAseq i zaprezentowana jako z-score została pobrana z cBioPortal. Ekspresję mRNA PIM-2 u chorych zbadano metodą RQ-PCR. Pomiar apoptozy i proliferacji blastów wykonano przy użyciu standardowych metod. Zablokowanie PIM-2 w linii białaczkowej HL-60 wykonano metodą RNA i oceniono apoptozę komórek HL-60/ PAC-GFP i HL-60/PAC-GFP-shPIM-2. Ekspresję białek: PIM-2, BAD, 4E-BP1 p-BAD, p-4E-BP1 zbadano przy użyciu Western blot. Wyniki: Mediana ekspresji PIM-2 u chorych na OBS była wyższa niż w grupie kontrolnej. Pacjenci z wysoką ekspresją wykazywali krótszy LFS (leukemia free survival) niż chorzy z niższą ekspresją. Analiza przeżycia Kaplana-Mayera potwierdziła, że wysoka ekspresja PIM-2 jest związana ze złą prognozą. Chorzy, którzy osiągnęli CR, wykazywali niższy wyjściowy poziom ekspresji PIM-2 w porównaniu z pacjentami bez CR. Ekspresja genu normalizowała się w fazie CR. Wykazaliśmy także nadekspresję kinazy PIM-2 oraz jej czynników docelowych: BAD, 4E-BP1, p-BAD i p-4E-BP1. Ponadto ujawniliśmy ujemną korelację pomiędzy ekspresją genu PIM-2 a odsetkiem komórek blastycznych w całkowitej apoptozie. Cytometryczna analiza linii HL-60/PAC-GFP i HL-60/PAC-GFP-shPIM-2 wykazała zwiększony odsetek komórek apoptotycznych po zahamowaniu PIM-2. Wnioski: Nasze badania wykazały, że podwyższona ekspresja genu PIM-2 jest złym czynnikiem prognostycznym w OBS, co może wynikać z oporności komórek białaczkowych na apoptozę indukowaną przez cytostatyki. Możemy wysunąć hipotezę, że pacjenci z OBS, którzy wykazują podwyższoną ekspresją PIM-2, mogą rozwijać oporność na terapię indukcyjną, co negatywnie wpływa na całkowite przeżycie. http://dx.doi.org/10.1016/j.achaem.2015.07.185