- Email: [email protected]
Effets de la 5–6 dihydroxytryptamine sur les mecanismes de transport de divers neurotransmetteurs ou de leurs precurseurs au niveau des synaptosomes du mesencephale de rat.
Biochemical
Pharmacology,
Pergamon
Vol. 24, pp. 2117-2120.
EFFETS DE LA 5-6 DIHYDROXYTRYPTAMINE NEUROTRANSMETTEURS MESENCEPHALE
Press,
1975
Printed
SUR LES MECANISMES
OU DE LEURS PRECURSEURS
AU NIVEAU
in Great
DE TRANSPORT
Britain
DE DIVERS
DES SYNAPTOSOMES
DU
DE RAT.
Marie-Francoise
Belin, Jean-Claude
Kouyoumdjian,
Josiane
Bardakdjian
et
Pierre Gonnard. Departement
de Biochimie,
(Received
L'administration ventricules
giques
entraine
aborde
; cependant,
rapidement
l'etude
la modification
apres l'injection
des mecanismes
( 5-6 DHT ) dans les
importante
par le traitement
des terminales
est maximale
du metabolisme
de transport y
de certains
traites apres
de la serotonine nous avons
neurotransmetteurs
aminobutyrique
:
( GABA)ou de leurs
apres modification
du metabolisme
de la
avec la 5-6 DHT. au nembutal
' en base libre " du complexe
( 30 mg/kg i.p. ) des rats femelles
de Ringer contenant
de 75 pg de 5-6 DHT
creatinine-sulfate-H20 0,I mg d'acide
sont tu&s 4 jours apres l'injection
) dissous dans
ascorbique/ml.
8 rats
( Groupe 2 ), 8 autres, IO jours
( Groupe 4 ).I6 rats temoins ( Groupes I et 3 ) recoivent dans les mCmes
conditions
20 ~1 de la solution
Les captations mol),
specifiques
IO jours apres
( TRP ), la tyrosine ( TYR ), l'acide glutamique
Sous une leg&-e anesthesie
20 ~1 d'une solution
du taux
serotoniner-
de la 5-6 DHT semblent
( 200 g ) recoivent une injection intraventriculaire ( calcule
et prolongee
(3) (5). Dans ce travail,
( DA ), l'acide
: le tryptophane
CEDEX
1975)
leur degenerescence
) au niveau des synaptosomes
serotonine
12 September
neurotoxiques
serotoninergiques,
la 5 HT, la Dopamine precurseurs
accepted
94010 CRETEIL
( 5 HT ) et provoque une destruction
le traitement intervient
1975;
une diminution
(I) (2) (3). Les effets
des neurones
( GLU
8 July
de 5-6 Dihydroxytryptamine
cerebraux
de sdrotonine
CHU Henri Condor,
Ringer contenant
0,I mg/ml
de la L I4 C - TYR (Ii'iCi/z ~~l~~"d?:$;e'b;
GLU (200 mCi/m mol) et du 14C - GABA les synaptosomes de haute affinite
correspondant
(6) (7) (8) (9). Les fractions
a partir du mesencephale
Whittaker
(IO)
ascorbique.
y"5: mCi/m mol) du L 14C -
(21 mCi/m mol) sont mesurees
pour des concentrations
preparees
d'acide
14C - TRP (54 mCi/m
de la
de rat d'apres
2117
in vitro
aux systemesde
purifiees
de synaptosomes
la technique
dans
transport
de Gray et
sont
Preliminary Communications
2118
Temoins Groupe
I
II,7 PM/~
I d/l
100 + 0,5
100 + 3,5
IOO?
(0,192)
(0,365)
I,42 JIM/~
I,6 ~iM/l
[OO * 2 :0,014)
I,65 3M/l
-
GLU
GABA
TYR
DA
TRP
5 HT
I,89 I.IM/L
9
100 + 8
(0,255)
-5-6 DHT
98 + I,1
S8,2 & 2,9
[22,8 2 4
125,5 3 3
115 + I
120 f 6
4 jours avant Groupe
2
___-^.^__--
_---___
Temoins
100 * I,3
Groupe 3
(0,0162
5-6 DHT
**
*
**
--
--
58 3 3,3
100 & 2,4
100 + 2,5
100 f 2,2
(0,143)
(0,070)
(0,301)
96 f
100 + 2
100 f I
(0320)
(0,081)
119 f 6,7
192
IO jours avant 9
**
Groupe 4
El'FL?TS LJE~'~~~~CT~~~ I~?TRA~~~TRICULAIRE DE LA 5-6 DHT SUR DIVERS MECANISMZZ?DE TRANSPORTS
La captation de Za 14C 5 iir,de la j4& DA, de la j4C TYRJ du 14c GASA et duz4c Glu est mesuree in vitro sur des fractions preparees
a partir du mesencephale
16 rats traites
echantillons.
I et 3 ) et de
( Groupe 2 ), IO
( Groupe 4 ). Les resultats sont exprimes en pourcen-
aux temoins
+ SEW. Chaque mesure represente
Entre parentheses
nM par mg de proteine
de synaptosomes
( Groupes
par la 5-6 DHT, 4 jours avant le sacrifice
jours avant le sacrifice tage par rapport
purifiees
de 8 rats temoins
figurent
les taux de captation
par minute.
** P
< 0,OI
"P
< 0,05
la moyenne
de 4
des composes
en
Preiiminary Communications
Les incubations autres composes
a 37°C de 2 min pour Ia 5 HT et la DA et de 1 min pour Ies
sont effectuees
Les taux de proteines methode
de Lowry
precedemment
d&rites
sont mesures
par la
4 jours apres le traitement
est renforcee
de la captation
' haute affinite
( qui provoque la destruction
diminution
), d'autres
auteurs
de la captation
;
( 42 % ) Par contre
du TRP. L&inhibition
des m&a-
la destruction
des
; un tel resultat a deja et@ mis en evidence au
s~rotoninergiques
ninergiques
par la 5-6 DHT, il existe
' de la 5 HT confirme
niveau de coupes de tissus dans differentes du raphe
(6).
de la 5 HT dans les synaptosomes
IO jours apres Ie traitement
aucune modification
nismes de transport te~inales
les methodes synaptosomale
(II).
de 32 % de l'accumulation
cette diminution il n'existe
suivant
de la suspension
Dans ces conditions, une inhibition
21iY
structures
(12). Apres la lesion
d'un grand nombre de terminales
(13) ont trouve dgalement
de la 5 HT sans modification
seroto-
une importante
du transport
du TRP
dans les synaptosomes. Dans nos conditions mes de transport
experimentales,
traitement
par la 5-6 DHT. Par contre,
une legere
inhibition
de ces mecanismes
s'expliquer
par une regulation
traitement,
entrainant
recents
en effet,
de I'activit&
Etre stimulees
tation de la captation
de transport. in u&o,
mise en jeu,
queIques
de certains
de la TYR hydroxylase
neurones.
parallelement
Des travaux
une importante
dans le mesencephale
; il existerait
alors une augmen-
de la DA et de la TYR par Ies synaptosomes
IO jours apres le traitement,
pourraient
jours apres le
4 a 6 jours apres le traite-
du locus coeruleus
dans ces conditions
il apparait
Ces resultats
au niveau du Iocus coeruleus
par la 5-6 DHT. Les projections
pourraient
des mecanis-
IO jours apres l'injection,
une hypersensibilite
(14) ont montre,
augmentation ment
il existe une stimulation
de la TYR ( 15 % ) et de la DA ( 22,8 % ), 4 jours apres le
?i la diminution
qui disparait
de l'activite
de la
TYR hydroxylase. 11 existe egalement, des m~canismes synaptosomes.
4 jours apt-es l'injection
de transport
Ces stimulations,
bien que moins
importantes
sont maintenues
IO jours apres le traitement.
viva pourraient
&tre dues a des interregulations
giques
et Gabaminergiques
(13) il n'existe
provoque
(15). Toutefois,
pas de modification
GLtJ dans les synaptosomes. les mCmes
effets
de regulation
mises en jeu in
entre neurones
serotoniner-
14 jours apr@s la lesion du raphe
des mecanismes
Si dans certains
( 15 % et 19 % )
Ces regulations
de transport
cas I'administration
du GABA et du de 5-6 DHT
que la lesion du raphe ( 5 HT, TRP ), il n'en est
pas de mCme en ce qui concerne mecanismes
de 5-6 DHT, une stimulation
du GABA ( 25,5 % ) et du GLU ( 20 % ) dans les
le GABA et le GLU. On peut considerer
mis en jeu ne sont pas toujours
identiques.
que les
2120
Preliminary Communications
I. H.G. Baumgarten, A. Bjiirklund, L. Lachenmayer, L. Nobin et U. Stenevi, Acta Physiol. Stand. Suppl. 373, I ( I971 ) 2. H.G. Baumgarten, K.D. Evetts, R.B. Holman, L.L. Iversen, M. Vogt et G. Wilson, J. Neurochem.19, 1587 (I972 ) 3. A. Bjbrklund, A. Nobinet U. Stenevi, Brain Res. 53, 117 (1973) 4. A. Nobin, H.G. Baumgarten, A. Bjiirklund, L. Lachemayer et U. Stenevi Brain Res. 56, I, (1973) 5. S.J. Victor, H.G. Baumgarten et W. Lovenberg, J. Neurochem. 22, 541 (1974) 6. M.F. Belin, G. Chouvet et J.F. Pujol, Biochem. Pharmacol. 3, 587 (1973) 7. G. Levi et M. Raiteri, Life Sciences 12, 81 (1973) 8. D.T. Wong, J.S. Horng et R-W. Fuller,xiochem. Pharmacol. 22, 311 (1973) 9. S.H. Snyder, H.I. Yamamura, C.B. Pert, W.J. Logan et J.P. Bennett in A.J. Mandelle (ed.) New Concepts in Neurotransmitter regulation. Plenum Press. New York 195 (1973) IO. E.G. Gray et V.P. Whittaker, J. Anat. 3, 79 (1962) II. O.H. Lowry, N.J. Rosebrough, F. Farra et R.S. Randall, J. Biol. Chem. B, 265 (1951) 12. A. Bjorklund, H.G. Baumgarten et A. Nobin, adv. In Bioch. Psychopharmacol. &l, 13 (1974) Raven Press New York 13. M.J. Kuhar, R.H. Roth et G.K. Aghajanian, J. Pharm. and Exp. Ther. m, 36, (1972) 14. B. Renaud, M. Buda, B. Douglas Lewis et J.F. Pujol, Biochem. Pharmac. in press 15. W-J. Nicklas, S. Berl et D.D. Clarke, J. Neurochem. 23, -149 (1974)
Pharmacology,
Pergamon
Vol. 24, pp. 2117-2120.
EFFETS DE LA 5-6 DIHYDROXYTRYPTAMINE NEUROTRANSMETTEURS MESENCEPHALE
Press,
1975
Printed
SUR LES MECANISMES
OU DE LEURS PRECURSEURS
AU NIVEAU
in Great
DE TRANSPORT
Britain
DE DIVERS
DES SYNAPTOSOMES
DU
DE RAT.
Marie-Francoise
Belin, Jean-Claude
Kouyoumdjian,
Josiane
Bardakdjian
et
Pierre Gonnard. Departement
de Biochimie,
(Received
L'administration ventricules
giques
entraine
aborde
; cependant,
rapidement
l'etude
la modification
apres l'injection
des mecanismes
( 5-6 DHT ) dans les
importante
par le traitement
des terminales
est maximale
du metabolisme
de transport y
de certains
traites apres
de la serotonine nous avons
neurotransmetteurs
aminobutyrique
:
( GABA)ou de leurs
apres modification
du metabolisme
de la
avec la 5-6 DHT. au nembutal
' en base libre " du complexe
( 30 mg/kg i.p. ) des rats femelles
de Ringer contenant
de 75 pg de 5-6 DHT
creatinine-sulfate-H20 0,I mg d'acide
sont tu&s 4 jours apres l'injection
) dissous dans
ascorbique/ml.
8 rats
( Groupe 2 ), 8 autres, IO jours
( Groupe 4 ).I6 rats temoins ( Groupes I et 3 ) recoivent dans les mCmes
conditions
20 ~1 de la solution
Les captations mol),
specifiques
IO jours apres
( TRP ), la tyrosine ( TYR ), l'acide glutamique
Sous une leg&-e anesthesie
20 ~1 d'une solution
du taux
serotoniner-
de la 5-6 DHT semblent
( 200 g ) recoivent une injection intraventriculaire ( calcule
et prolongee
(3) (5). Dans ce travail,
( DA ), l'acide
: le tryptophane
CEDEX
1975)
leur degenerescence
) au niveau des synaptosomes
serotonine
12 September
neurotoxiques
serotoninergiques,
la 5 HT, la Dopamine precurseurs
accepted
94010 CRETEIL
( 5 HT ) et provoque une destruction
le traitement intervient
1975;
une diminution
(I) (2) (3). Les effets
des neurones
( GLU
8 July
de 5-6 Dihydroxytryptamine
cerebraux
de sdrotonine
CHU Henri Condor,
Ringer contenant
0,I mg/ml
de la L I4 C - TYR (Ii'iCi/z ~~l~~"d?:$;e'b;
GLU (200 mCi/m mol) et du 14C - GABA les synaptosomes de haute affinite
correspondant
(6) (7) (8) (9). Les fractions
a partir du mesencephale
Whittaker
(IO)
ascorbique.
y"5: mCi/m mol) du L 14C -
(21 mCi/m mol) sont mesurees
pour des concentrations
preparees
d'acide
14C - TRP (54 mCi/m
de la
de rat d'apres
2117
in vitro
aux systemesde
purifiees
de synaptosomes
la technique
dans
transport
de Gray et
sont
Preliminary Communications
2118
Temoins Groupe
I
II,7 PM/~
I d/l
100 + 0,5
100 + 3,5
IOO?
(0,192)
(0,365)
I,42 JIM/~
I,6 ~iM/l
[OO * 2 :0,014)
I,65 3M/l
-
GLU
GABA
TYR
DA
TRP
5 HT
I,89 I.IM/L
9
100 + 8
(0,255)
-5-6 DHT
98 + I,1
S8,2 & 2,9
[22,8 2 4
125,5 3 3
115 + I
120 f 6
4 jours avant Groupe
2
___-^.^__--
_---___
Temoins
100 * I,3
Groupe 3
(0,0162
5-6 DHT
**
*
**
--
--
58 3 3,3
100 & 2,4
100 + 2,5
100 f 2,2
(0,143)
(0,070)
(0,301)
96 f
100 + 2
100 f I
(0320)
(0,081)
119 f 6,7
192
IO jours avant 9
**
Groupe 4
El'FL?TS LJE~'~~~~CT~~~ I~?TRA~~~TRICULAIRE DE LA 5-6 DHT SUR DIVERS MECANISMZZ?DE TRANSPORTS
La captation de Za 14C 5 iir,de la j4& DA, de la j4C TYRJ du 14c GASA et duz4c Glu est mesuree in vitro sur des fractions preparees
a partir du mesencephale
16 rats traites
echantillons.
I et 3 ) et de
( Groupe 2 ), IO
( Groupe 4 ). Les resultats sont exprimes en pourcen-
aux temoins
+ SEW. Chaque mesure represente
Entre parentheses
nM par mg de proteine
de synaptosomes
( Groupes
par la 5-6 DHT, 4 jours avant le sacrifice
jours avant le sacrifice tage par rapport
purifiees
de 8 rats temoins
figurent
les taux de captation
par minute.
** P
< 0,OI
"P
< 0,05
la moyenne
de 4
des composes
en
Preiiminary Communications
Les incubations autres composes
a 37°C de 2 min pour Ia 5 HT et la DA et de 1 min pour Ies
sont effectuees
Les taux de proteines methode
de Lowry
precedemment
d&rites
sont mesures
par la
4 jours apres le traitement
est renforcee
de la captation
' haute affinite
( qui provoque la destruction
diminution
), d'autres
auteurs
de la captation
;
( 42 % ) Par contre
du TRP. L&inhibition
des m&a-
la destruction
des
; un tel resultat a deja et@ mis en evidence au
s~rotoninergiques
ninergiques
par la 5-6 DHT, il existe
' de la 5 HT confirme
niveau de coupes de tissus dans differentes du raphe
(6).
de la 5 HT dans les synaptosomes
IO jours apres Ie traitement
aucune modification
nismes de transport te~inales
les methodes synaptosomale
(II).
de 32 % de l'accumulation
cette diminution il n'existe
suivant
de la suspension
Dans ces conditions, une inhibition
21iY
structures
(12). Apres la lesion
d'un grand nombre de terminales
(13) ont trouve dgalement
de la 5 HT sans modification
seroto-
une importante
du transport
du TRP
dans les synaptosomes. Dans nos conditions mes de transport
experimentales,
traitement
par la 5-6 DHT. Par contre,
une legere
inhibition
de ces mecanismes
s'expliquer
par une regulation
traitement,
entrainant
recents
en effet,
de I'activit&
Etre stimulees
tation de la captation
de transport. in u&o,
mise en jeu,
queIques
de certains
de la TYR hydroxylase
neurones.
parallelement
Des travaux
une importante
dans le mesencephale
; il existerait
alors une augmen-
de la DA et de la TYR par Ies synaptosomes
IO jours apres le traitement,
pourraient
jours apres le
4 a 6 jours apres le traite-
du locus coeruleus
dans ces conditions
il apparait
Ces resultats
au niveau du Iocus coeruleus
par la 5-6 DHT. Les projections
pourraient
des mecanis-
IO jours apres l'injection,
une hypersensibilite
(14) ont montre,
augmentation ment
il existe une stimulation
de la TYR ( 15 % ) et de la DA ( 22,8 % ), 4 jours apres le
?i la diminution
qui disparait
de l'activite
de la
TYR hydroxylase. 11 existe egalement, des m~canismes synaptosomes.
4 jours apt-es l'injection
de transport
Ces stimulations,
bien que moins
importantes
sont maintenues
IO jours apres le traitement.
viva pourraient
&tre dues a des interregulations
giques
et Gabaminergiques
(13) il n'existe
provoque
(15). Toutefois,
pas de modification
GLtJ dans les synaptosomes. les mCmes
effets
de regulation
mises en jeu in
entre neurones
serotoniner-
14 jours apr@s la lesion du raphe
des mecanismes
Si dans certains
( 15 % et 19 % )
Ces regulations
de transport
cas I'administration
du GABA et du de 5-6 DHT
que la lesion du raphe ( 5 HT, TRP ), il n'en est
pas de mCme en ce qui concerne mecanismes
de 5-6 DHT, une stimulation
du GABA ( 25,5 % ) et du GLU ( 20 % ) dans les
le GABA et le GLU. On peut considerer
mis en jeu ne sont pas toujours
identiques.
que les
2120
Preliminary Communications
I. H.G. Baumgarten, A. Bjiirklund, L. Lachenmayer, L. Nobin et U. Stenevi, Acta Physiol. Stand. Suppl. 373, I ( I971 ) 2. H.G. Baumgarten, K.D. Evetts, R.B. Holman, L.L. Iversen, M. Vogt et G. Wilson, J. Neurochem.19, 1587 (I972 ) 3. A. Bjbrklund, A. Nobinet U. Stenevi, Brain Res. 53, 117 (1973) 4. A. Nobin, H.G. Baumgarten, A. Bjiirklund, L. Lachemayer et U. Stenevi Brain Res. 56, I, (1973) 5. S.J. Victor, H.G. Baumgarten et W. Lovenberg, J. Neurochem. 22, 541 (1974) 6. M.F. Belin, G. Chouvet et J.F. Pujol, Biochem. Pharmacol. 3, 587 (1973) 7. G. Levi et M. Raiteri, Life Sciences 12, 81 (1973) 8. D.T. Wong, J.S. Horng et R-W. Fuller,xiochem. Pharmacol. 22, 311 (1973) 9. S.H. Snyder, H.I. Yamamura, C.B. Pert, W.J. Logan et J.P. Bennett in A.J. Mandelle (ed.) New Concepts in Neurotransmitter regulation. Plenum Press. New York 195 (1973) IO. E.G. Gray et V.P. Whittaker, J. Anat. 3, 79 (1962) II. O.H. Lowry, N.J. Rosebrough, F. Farra et R.S. Randall, J. Biol. Chem. B, 265 (1951) 12. A. Bjorklund, H.G. Baumgarten et A. Nobin, adv. In Bioch. Psychopharmacol. &l, 13 (1974) Raven Press New York 13. M.J. Kuhar, R.H. Roth et G.K. Aghajanian, J. Pharm. and Exp. Ther. m, 36, (1972) 14. B. Renaud, M. Buda, B. Douglas Lewis et J.F. Pujol, Biochem. Pharmac. in press 15. W-J. Nicklas, S. Berl et D.D. Clarke, J. Neurochem. 23, -149 (1974)