- Email: [email protected]
P102 Viabilité Des Produits Hématopoïétiques Dans Le Contexte Du Contrôle Qualité Externe
$94
Posters / Transfusion clinique et biologique 12 (2005) $57-S137
R6sultats :
Th6rapie cellulaire et g6nique
Validation: Pour les deux anticorps, l'6tude de lin6arit6
avec des concentrations de 0,1 fi 6.10 9 GR/L montre une excellente corrdlation valeurs mesur6es/attendues (r > 0,99), le scull de d6tection est ~t 0,05 ; les tests de r6pdtabilit6 et de reproductibilit6 montrent des C.V respectifs de 5,7 % et 6 %. Pour des valeurs > 2.10 9 GR/L, il faut appliquer un co6fficient correcteur de 1,3 pour l'anti GPA PE Pharmingen. Quantification des GR : PF issus de sang total " 0,39 +/- 0,23 10 9 GR / L PF issus de C G R appauvris : < 0,05 10 9 G R / L PF d'aphdr~se : < 0,05 10 9 G R / L Conclusion : La quantification des GR dans les plasmas par CMF est un test rapide, pr6cis et reproductible. De plus, cette 6tude montre que, malgr6 une diff6rence de GR r6siduels selon l'origine du plasma, les valeurs obtenues restent bien en d e ~ des exigences rdglementaires.
P101 MAITRISE DES FACTEURS INDUISANT LA FORMATION DE CAILLOTS LORS DES PRI~L]EVEMENTS DE SANG TOTAL B I G E Y F., F O R N Y C., K I E N T Z D., ISOLA H., C A Z E N A V E J.-P. EFS-ALSA CE, S T R A S B O U R G
[email protected] La formation de caillots lors du pr61~vement de sang total est une pr6occupation ~ l'EFS-Alsace depuis plus de 10 arts. Elle est la cons6quence finale de la gdn6ration de thrombine li6e 5 un mauvais m61ange de l'anticoagulant et du sang. Les caractdristiques de ces prdl~vements ont 6t6 6tudides. Les caillots ont 6t6 d6clards ~ 100 %, lors de la s6paration ou de la filtration (dispositifs TAB avec filtre ~ CGR). Quelle que soit la taille du caillot et l'6tape de d6couverte, une gfn6ration de thrombine a 6t6 constat6e (TAT > 80btg/L) et les produits ont 6t6 d6truits. Quatre facteurs ont 6t6 retenus : i) l'agitation manuelle pr6coce, principal moyen de pr6vention des caillots et trbs lide ~ un facteur individuel : en 2004, 40 % des caillots 6taient li6es ~ 3 pr6leveurs (6,6 % des prdl~vements); ii) les volumes hors cible : 12,0 % des poches avec caillots 6taient <425ml (<2 % des poches), et 4,4 % >475ml (<3 % des poches) ; iii) les pr61bvements lents : 3 1 % des caillots ~taient lids ~ des pr61~vements >10 rain en 2004 ; iv) les ajouts de filtres et de poches aux DMU, cr6ant des obstacles au mdlange : de 0,56 % ~ 3,54 % de caillots avec les filtres ~t CGR en ligne et de 0,43 % ~ 0,75 % avec les filtres ~ plasma. A l'inverse, nous avons mis les poches satellites hors du plateau de l'agitateur-limitateur en 2001. Ceci a rdduit le taux de caillots de 1,28 ~t 0,75 %. La formation du personnel a permis de ramener le taux de caillots autour de 0,2 % depuis 2003, grSce ~ l'agitation manuelle pr6coce et r6p~t6e palliant l'inefficacitfi des agitateurs-limitateurs, et permettant d'att6nuer l'effet des autres facteurs. L'introduction continue et proportionnelle de 1' anticoagulant devrait r6gler ce probl6me.
P102 VIABILITI~ DES PRODUITS HI~MATOPO[I~TIQUES DANS LE CONTEXTE DU CONTRt~LE QUALITI~ EXTERNE P A N T E R N E B., RENOUF S., M A Q U I N C., SABATINI C., M O U I L L O T L., TISSIER M.-H. AFSSAPS, ST-DENIS, F R A N C E
laurence.mouillot @ afssaps.sante.fr Nous avons recherch6 les param~tres pouvant influencer la viabilit6 cellulaire afin de mieux pr~venir sa diminution parfois observde. Nous avons recherchd si diff6rents facteurs tels que le taux d'hdmatocrite et la composition cellulaire pouvaient atre ddl6t~res pour la viabilit6. La diff6rence entre la viabilit6 postpr61~vement (producteur) et celle apr~s transport (Afssaps) a 6t6 analys6e au regard de la composition du produit et du temps de conservation. Nos r6sultats montrent qu'un taux d'h6matocfite ou une fraction leucocytaire contenant les polynucl6aires neutrophiles (PN) 61ev6s sont associ6s ~t une diminution de la viabilit6 cellulaire. Un taux d'h6matocrite compris entre 8 et 20 % correspond ~ une perte moyenne de 13 points de viabilit6 apr~s 24H ~t 48H de conservation alors qu'un taux compris entre 1 et 4% conduit h une perte de seulement 5 points (z=2,35>1,96, a=0,05). Une fraction leucocytaire contenant les PN supfrieure ~t 50 % est associ6e ~ une perte de 9 points de viabilit6 apr~s 24H ~ 48H de conservation alors qu'une fraction inf6rieure a 50 % montre une perte moyenne de 4 points seulemerit (z=3,02>1,96, c~=0,05). De plus, les produits ayant une moindre viabilit6 au ddpart sont 6galement ceux pr6sentant un h6matocrite et une fraction leucocytaire r6siduelle plus 61ev6s que pour les produits sans diminution de la viabilit6. Le suivi de ces deux param~tres pourraient permettre de mieux adapter la dur6e de conservation avant cong61ation ou injection selon les produits.
P103 BILAN 2003- 2004 DU CONTROLE EXTERNE DES CELLULES SOUCHES HI~MATOPOII~TIQUES. CAS DES MOELLES OSSEUSES ET DES CSP Dt~CONGELI~ES P A N T E R N E B., SABATINI C., M A Q U I N C., M O U I L L O T L., H U Y G H E G., TISSIER M.-H. AFSSAPS, ST-DENIS, F R A N C E
laurence.mouillot @ afssaps.sante.fr L'Agence fran~aise de sdcurit6 sanitaire des produits de sant~ (Afssaps) est charg6e de l'6valuation, de l'inspection et dn contr61e des produits de th6rapie cellulaire. Aujourd'hui, ce contr61e concerne principalement les cellules souches hdmatopo[dtiques du sang p~riph6rique (CSP). Les contr61es suivants : numdration des cellules nuc166es et des cellules CD34+, viabilit6, test CFU-GM et contr61e bac-
Posters / Transfusion clinique et biologique 12 (2005) $57-S137
R6sultats :
Th6rapie cellulaire et g6nique
Validation: Pour les deux anticorps, l'6tude de lin6arit6
avec des concentrations de 0,1 fi 6.10 9 GR/L montre une excellente corrdlation valeurs mesur6es/attendues (r > 0,99), le scull de d6tection est ~t 0,05 ; les tests de r6pdtabilit6 et de reproductibilit6 montrent des C.V respectifs de 5,7 % et 6 %. Pour des valeurs > 2.10 9 GR/L, il faut appliquer un co6fficient correcteur de 1,3 pour l'anti GPA PE Pharmingen. Quantification des GR : PF issus de sang total " 0,39 +/- 0,23 10 9 GR / L PF issus de C G R appauvris : < 0,05 10 9 G R / L PF d'aphdr~se : < 0,05 10 9 G R / L Conclusion : La quantification des GR dans les plasmas par CMF est un test rapide, pr6cis et reproductible. De plus, cette 6tude montre que, malgr6 une diff6rence de GR r6siduels selon l'origine du plasma, les valeurs obtenues restent bien en d e ~ des exigences rdglementaires.
P101 MAITRISE DES FACTEURS INDUISANT LA FORMATION DE CAILLOTS LORS DES PRI~L]EVEMENTS DE SANG TOTAL B I G E Y F., F O R N Y C., K I E N T Z D., ISOLA H., C A Z E N A V E J.-P. EFS-ALSA CE, S T R A S B O U R G
[email protected] La formation de caillots lors du pr61~vement de sang total est une pr6occupation ~ l'EFS-Alsace depuis plus de 10 arts. Elle est la cons6quence finale de la gdn6ration de thrombine li6e 5 un mauvais m61ange de l'anticoagulant et du sang. Les caractdristiques de ces prdl~vements ont 6t6 6tudides. Les caillots ont 6t6 d6clards ~ 100 %, lors de la s6paration ou de la filtration (dispositifs TAB avec filtre ~ CGR). Quelle que soit la taille du caillot et l'6tape de d6couverte, une gfn6ration de thrombine a 6t6 constat6e (TAT > 80btg/L) et les produits ont 6t6 d6truits. Quatre facteurs ont 6t6 retenus : i) l'agitation manuelle pr6coce, principal moyen de pr6vention des caillots et trbs lide ~ un facteur individuel : en 2004, 40 % des caillots 6taient li6es ~ 3 pr6leveurs (6,6 % des prdl~vements); ii) les volumes hors cible : 12,0 % des poches avec caillots 6taient <425ml (<2 % des poches), et 4,4 % >475ml (<3 % des poches) ; iii) les pr61bvements lents : 3 1 % des caillots ~taient lids ~ des pr61~vements >10 rain en 2004 ; iv) les ajouts de filtres et de poches aux DMU, cr6ant des obstacles au mdlange : de 0,56 % ~ 3,54 % de caillots avec les filtres ~t CGR en ligne et de 0,43 % ~ 0,75 % avec les filtres ~ plasma. A l'inverse, nous avons mis les poches satellites hors du plateau de l'agitateur-limitateur en 2001. Ceci a rdduit le taux de caillots de 1,28 ~t 0,75 %. La formation du personnel a permis de ramener le taux de caillots autour de 0,2 % depuis 2003, grSce ~ l'agitation manuelle pr6coce et r6p~t6e palliant l'inefficacitfi des agitateurs-limitateurs, et permettant d'att6nuer l'effet des autres facteurs. L'introduction continue et proportionnelle de 1' anticoagulant devrait r6gler ce probl6me.
P102 VIABILITI~ DES PRODUITS HI~MATOPO[I~TIQUES DANS LE CONTEXTE DU CONTRt~LE QUALITI~ EXTERNE P A N T E R N E B., RENOUF S., M A Q U I N C., SABATINI C., M O U I L L O T L., TISSIER M.-H. AFSSAPS, ST-DENIS, F R A N C E
laurence.mouillot @ afssaps.sante.fr Nous avons recherch6 les param~tres pouvant influencer la viabilit6 cellulaire afin de mieux pr~venir sa diminution parfois observde. Nous avons recherchd si diff6rents facteurs tels que le taux d'hdmatocrite et la composition cellulaire pouvaient atre ddl6t~res pour la viabilit6. La diff6rence entre la viabilit6 postpr61~vement (producteur) et celle apr~s transport (Afssaps) a 6t6 analys6e au regard de la composition du produit et du temps de conservation. Nos r6sultats montrent qu'un taux d'h6matocfite ou une fraction leucocytaire contenant les polynucl6aires neutrophiles (PN) 61ev6s sont associ6s ~t une diminution de la viabilit6 cellulaire. Un taux d'h6matocrite compris entre 8 et 20 % correspond ~ une perte moyenne de 13 points de viabilit6 apr~s 24H ~t 48H de conservation alors qu'un taux compris entre 1 et 4% conduit h une perte de seulement 5 points (z=2,35>1,96, a=0,05). Une fraction leucocytaire contenant les PN supfrieure ~t 50 % est associ6e ~ une perte de 9 points de viabilit6 apr~s 24H ~ 48H de conservation alors qu'une fraction inf6rieure a 50 % montre une perte moyenne de 4 points seulemerit (z=3,02>1,96, c~=0,05). De plus, les produits ayant une moindre viabilit6 au ddpart sont 6galement ceux pr6sentant un h6matocrite et une fraction leucocytaire r6siduelle plus 61ev6s que pour les produits sans diminution de la viabilit6. Le suivi de ces deux param~tres pourraient permettre de mieux adapter la dur6e de conservation avant cong61ation ou injection selon les produits.
P103 BILAN 2003- 2004 DU CONTROLE EXTERNE DES CELLULES SOUCHES HI~MATOPOII~TIQUES. CAS DES MOELLES OSSEUSES ET DES CSP Dt~CONGELI~ES P A N T E R N E B., SABATINI C., M A Q U I N C., M O U I L L O T L., H U Y G H E G., TISSIER M.-H. AFSSAPS, ST-DENIS, F R A N C E
laurence.mouillot @ afssaps.sante.fr L'Agence fran~aise de sdcurit6 sanitaire des produits de sant~ (Afssaps) est charg6e de l'6valuation, de l'inspection et dn contr61e des produits de th6rapie cellulaire. Aujourd'hui, ce contr61e concerne principalement les cellules souches hdmatopo[dtiques du sang p~riph6rique (CSP). Les contr61es suivants : numdration des cellules nuc166es et des cellules CD34+, viabilit6, test CFU-GM et contr61e bac-