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Les protéines de la famille CCN sont-elles impliquées dans la régulation de la pigmentation ? Exemple de la sclérodermie systémique
S636 leurs capacités cytotoxiques, avec notamment des populations « multifonctionnelles » retrouvées spécifiquement dans la NE. http://dx.doi.org/10.1016/j.annder.2013.09.586 C19
Les protéines de la famille CCN sont-elles impliquées dans la régulation de la pigmentation ? Exemple de la sclérodermie systémique M. Brassie a , C. Pain a,b , M.-E. Truchetet b,c,d , A. Taieb a,b,e , M. Cario-André a,b,e,∗ a Inserm U1035, Bordeaux, France b University Bordeaux-Segalen, Bordeaux, France c UMR-CNRS 5164, Bordeaux, France d Department of Rheumatology, Bordeaux University Hospitals, Bordeaux, France e National Reference Center for Rare Skin Diseases, Bordeaux University Hospitals, Bordeaux, France ∗ Auteur correspondant. Mots clés : Fibroblastes ; Pigmentation ; CCN3 Nous avons préalablement démontré que les fibroblastes régulent la pigmentation in vitro et in vivo. En effet, nous sommes capables d’induire un switch caucasien-négroïde dans un modèle de xénogreffe sur souris. La modification majeure observée mise à part la pigmentation était une augmentation de FGF-2 épidermique. Parmi les cibles de FGF-2, nous avons supposé que les protéines de la famille CCN qui sont impliquées dans la fibrose pouvaient être aussi impliquées dans la régulation de la pigmentation. En outre CCN3 est diminué dans les mélanocytes, résultats que nous avons récemment décrits dans le vitiligo. Dans la sclérodermie systémique (SSc), maladie caractérisée par une sécrétion excessive de collagène par les fibroblastes, 43 % des patients présentent des zones hypo or hyperpigmentées. Nous avons regardé si les modifications de la pigmentation pouvaient être associées avec les CCNs et FGF-2 dans les patients SSc et des témoins normaux. Nos données indiquent que les variations inter-individuelles de l’expression de CCN3 chez les témoins ne sont pas corrélées avec l’âge mais avec le phototype. Nos résultats préliminaires sur les patients SSc révèlent un lien entre l’expression épidermique de CCN3, FGF-2 et la pigmentation. Ces constatations renforcent le concept d’une régulation dermique de la pigmentation épidermique avec un rôle majeur de FGF-2. http://dx.doi.org/10.1016/j.annder.2013.09.587
Session 4 : Inflammation — allergies cutanées C20
L’effet synergique de cytokines pro-inflammatoires mime le psoriasis en inhibant la différenciation des kératinocytes H. Rabeony a , I. Paris a , J. Garnier b , C. Barrault b , N. Pedretti b , K. Guilloteau a , G. Guillet a , V. Huguier a , F.-X. Bernard b , J.-C. Lecron a , F. Morel a,∗ a LITEC EA4331, Poitiers University, Poitiers, France b BIOalternatives, Genc ¸ay, France ∗ Auteur correspondant. Mots clés : Psoriasis ; Cytokine ; Inflammation L’homéostasie de l’épiderme est assurée par un dialogue constant entre kératinocytes et leucocytes, par le biais d’une production
CARD 2013 de cytokines équilibrée. Un déséquilibre de ce réseau de cytokinique peut entraîner le développement de maladies inflammatoires cutanées, telle que le psoriasis. Nos travaux de modélisation de l’inflammation cutanée ont montré qu’une combinaison d’IL-1a, IL17A, IL-22, OSM et TNFa induit de manière synergique l’expression de chimiokines et peptides antimicrobiens, et un recrutement massif de neutrophiles (J Immunol, 2010). Notre objectif est de caractériser in vitro et in vivo l’activité de ces cytokines sur la différenciation des kératinocytes. Si l’IL1a, l’IL1-7A, l’IL-22, l’OSM ou le TNF-a diminuent l’expression des cytokératine-10, loricrine, filaggrine et cadhérine-1, l’IL-22, l’OSM et le TNF-a sont les cytokines les plus puissantes. La combinaison de ces cinq cytokines (M5) produit un effet synergique sur l’inhibition de l’expression de tous ces marqueurs de différenciation. Cela est confirmé sur des épidermes reconstruits in vitro puisque l’IL-22 et l’OSM diminuent fortement l’expression des marqueurs de différenciation, et induisent une hyperplasie épidermique. L’injection de M5 chez la souris provoque un épaississement de l’épiderme associée à une diminution de l’expression de ces marqueurs de différenciation, comme nous l’observons dans les lésions cutanées psoriasiques humaines. Nos résultats montrent que l’effet synergique des cytokines est responsable de la production de peptides antimicrobiens et de chimiokines, et de l’inhibition de la différenciation des kératinocytes. L’utilisation de ces modèles devrait clarifier le rôle des cytokines dans la mise en place de la réponse inflammatoire. http://dx.doi.org/10.1016/j.annder.2013.09.588 C21
Nouveaux vecteurs pour le diagnostic immunobiologique de l’allergie aux parfums A. Cortial a,b,∗ , M. Vocanson b , A. Rozières b , C. Goujon b , S. Brianc ¸on a , J.F. Nicolas b a UMR-CNRS 5007, laboratoire d’automatique et de génie des procédés, université Lyon-1, Lyon, France b Centre International de Recherche en Infectiologie (CIRI), université de Lyon, Lyon, France ∗ Auteur correspondant. Mots clés : Allergie de contact ; Diagnostic ; Nanoparticules Le diagnostic de l’allergie de contact aux haptènes s’appuie sur la technologie des patch-tests. Néanmoins, ces tests cutanés présentent plusieurs inconvénients, notamment le risque de sensibilisation active. Ainsi, les tests immuniobiologiques basés sur la détection de lymphocytes T (LT) spécifiques d’haptènes s’avèrent être une alternative intéressantes. Toutefois, il n’existe actuellement aucun test de la sorte sur le marché, principalement en raison de la nature hautement hydrophobe des haptènes étudiés, peu solubles dans les milieux de culture conventionnels. Afin d’opter ses vérous technologiques, nous avons développé des vecteurs nanoparticulaires pour encapsuler et ainsi solubiliser un mélange de 8 parfums (Fragrance Mix I [FMI]). Nous avons ensuite évalué leur impact sur la réactivation des LT FMI-spécifiques dans un test immunobiologique in vitro standard (à l’aide de cellules mononucléés isolées du sang périphérique chez des patients sensibilisés à FMI). Des nanoparticules de poly -caprolactone (PCL)-NPs ont été généré par une méthode de nanoprécipitation. L’utilisation de FMI-(PCL)NPs versus (PCL)-NPs (NPs vides) a permis d’obtenir une réponse robuste des LT secondaires pour un grand nombre de personnes sensibilisées (patch-test FMI positif). De plus, aucune réactivation n’a été observée chez des individus non sensibilisés aux FMI. Ces résultats suggèrent que l’encapsulation des haptènes et mélange complexe dans des vecteurs nanoparticulaire soit prometteur pour améliorer le diagnostic immunobiologique de l’allergie de contact aux parfums. http://dx.doi.org/10.1016/j.annder.2013.09.589
Les protéines de la famille CCN sont-elles impliquées dans la régulation de la pigmentation ? Exemple de la sclérodermie systémique M. Brassie a , C. Pain a,b , M.-E. Truchetet b,c,d , A. Taieb a,b,e , M. Cario-André a,b,e,∗ a Inserm U1035, Bordeaux, France b University Bordeaux-Segalen, Bordeaux, France c UMR-CNRS 5164, Bordeaux, France d Department of Rheumatology, Bordeaux University Hospitals, Bordeaux, France e National Reference Center for Rare Skin Diseases, Bordeaux University Hospitals, Bordeaux, France ∗ Auteur correspondant. Mots clés : Fibroblastes ; Pigmentation ; CCN3 Nous avons préalablement démontré que les fibroblastes régulent la pigmentation in vitro et in vivo. En effet, nous sommes capables d’induire un switch caucasien-négroïde dans un modèle de xénogreffe sur souris. La modification majeure observée mise à part la pigmentation était une augmentation de FGF-2 épidermique. Parmi les cibles de FGF-2, nous avons supposé que les protéines de la famille CCN qui sont impliquées dans la fibrose pouvaient être aussi impliquées dans la régulation de la pigmentation. En outre CCN3 est diminué dans les mélanocytes, résultats que nous avons récemment décrits dans le vitiligo. Dans la sclérodermie systémique (SSc), maladie caractérisée par une sécrétion excessive de collagène par les fibroblastes, 43 % des patients présentent des zones hypo or hyperpigmentées. Nous avons regardé si les modifications de la pigmentation pouvaient être associées avec les CCNs et FGF-2 dans les patients SSc et des témoins normaux. Nos données indiquent que les variations inter-individuelles de l’expression de CCN3 chez les témoins ne sont pas corrélées avec l’âge mais avec le phototype. Nos résultats préliminaires sur les patients SSc révèlent un lien entre l’expression épidermique de CCN3, FGF-2 et la pigmentation. Ces constatations renforcent le concept d’une régulation dermique de la pigmentation épidermique avec un rôle majeur de FGF-2. http://dx.doi.org/10.1016/j.annder.2013.09.587
Session 4 : Inflammation — allergies cutanées C20
L’effet synergique de cytokines pro-inflammatoires mime le psoriasis en inhibant la différenciation des kératinocytes H. Rabeony a , I. Paris a , J. Garnier b , C. Barrault b , N. Pedretti b , K. Guilloteau a , G. Guillet a , V. Huguier a , F.-X. Bernard b , J.-C. Lecron a , F. Morel a,∗ a LITEC EA4331, Poitiers University, Poitiers, France b BIOalternatives, Genc ¸ay, France ∗ Auteur correspondant. Mots clés : Psoriasis ; Cytokine ; Inflammation L’homéostasie de l’épiderme est assurée par un dialogue constant entre kératinocytes et leucocytes, par le biais d’une production
CARD 2013 de cytokines équilibrée. Un déséquilibre de ce réseau de cytokinique peut entraîner le développement de maladies inflammatoires cutanées, telle que le psoriasis. Nos travaux de modélisation de l’inflammation cutanée ont montré qu’une combinaison d’IL-1a, IL17A, IL-22, OSM et TNFa induit de manière synergique l’expression de chimiokines et peptides antimicrobiens, et un recrutement massif de neutrophiles (J Immunol, 2010). Notre objectif est de caractériser in vitro et in vivo l’activité de ces cytokines sur la différenciation des kératinocytes. Si l’IL1a, l’IL1-7A, l’IL-22, l’OSM ou le TNF-a diminuent l’expression des cytokératine-10, loricrine, filaggrine et cadhérine-1, l’IL-22, l’OSM et le TNF-a sont les cytokines les plus puissantes. La combinaison de ces cinq cytokines (M5) produit un effet synergique sur l’inhibition de l’expression de tous ces marqueurs de différenciation. Cela est confirmé sur des épidermes reconstruits in vitro puisque l’IL-22 et l’OSM diminuent fortement l’expression des marqueurs de différenciation, et induisent une hyperplasie épidermique. L’injection de M5 chez la souris provoque un épaississement de l’épiderme associée à une diminution de l’expression de ces marqueurs de différenciation, comme nous l’observons dans les lésions cutanées psoriasiques humaines. Nos résultats montrent que l’effet synergique des cytokines est responsable de la production de peptides antimicrobiens et de chimiokines, et de l’inhibition de la différenciation des kératinocytes. L’utilisation de ces modèles devrait clarifier le rôle des cytokines dans la mise en place de la réponse inflammatoire. http://dx.doi.org/10.1016/j.annder.2013.09.588 C21
Nouveaux vecteurs pour le diagnostic immunobiologique de l’allergie aux parfums A. Cortial a,b,∗ , M. Vocanson b , A. Rozières b , C. Goujon b , S. Brianc ¸on a , J.F. Nicolas b a UMR-CNRS 5007, laboratoire d’automatique et de génie des procédés, université Lyon-1, Lyon, France b Centre International de Recherche en Infectiologie (CIRI), université de Lyon, Lyon, France ∗ Auteur correspondant. Mots clés : Allergie de contact ; Diagnostic ; Nanoparticules Le diagnostic de l’allergie de contact aux haptènes s’appuie sur la technologie des patch-tests. Néanmoins, ces tests cutanés présentent plusieurs inconvénients, notamment le risque de sensibilisation active. Ainsi, les tests immuniobiologiques basés sur la détection de lymphocytes T (LT) spécifiques d’haptènes s’avèrent être une alternative intéressantes. Toutefois, il n’existe actuellement aucun test de la sorte sur le marché, principalement en raison de la nature hautement hydrophobe des haptènes étudiés, peu solubles dans les milieux de culture conventionnels. Afin d’opter ses vérous technologiques, nous avons développé des vecteurs nanoparticulaires pour encapsuler et ainsi solubiliser un mélange de 8 parfums (Fragrance Mix I [FMI]). Nous avons ensuite évalué leur impact sur la réactivation des LT FMI-spécifiques dans un test immunobiologique in vitro standard (à l’aide de cellules mononucléés isolées du sang périphérique chez des patients sensibilisés à FMI). Des nanoparticules de poly -caprolactone (PCL)-NPs ont été généré par une méthode de nanoprécipitation. L’utilisation de FMI-(PCL)NPs versus (PCL)-NPs (NPs vides) a permis d’obtenir une réponse robuste des LT secondaires pour un grand nombre de personnes sensibilisées (patch-test FMI positif). De plus, aucune réactivation n’a été observée chez des individus non sensibilisés aux FMI. Ces résultats suggèrent que l’encapsulation des haptènes et mélange complexe dans des vecteurs nanoparticulaire soit prometteur pour améliorer le diagnostic immunobiologique de l’allergie de contact aux parfums. http://dx.doi.org/10.1016/j.annder.2013.09.589