P146 Analyse des mécanismes d’interaction entre acides gras polyinsaturés oméga-3 et radiothérapie dans deux lignées cellulaires d’adénocarcimomes colorectaux humains

Abstracts / Nutrition clinique et métabolisme 25 (2011) S51–S153 / Cahiers de nutrition et de diététique 46 (2011) S52–S153

priétés anticancéreuses dans une grande variété de tumeurs alors que les -6 AGPIs sont plutôt connus pour stimuler la prolifération et l’invasion tumorale. Cette étude visait à comparer les effets des -3 et -6 AGPIs sur le potentiel migratoire et invasif des lignées cellulaires coliques humaines, en utilisant des traitements à base d’émulsions lipidiques associés au 5-FU. Matériel et Méthodes. – Les lignées cellulaires humaines d’adénocarcinomes coliques HT-29 (p53+/o, bax+/+) et LS174T (p53+/+, bax – /) ont été traitées avec du 5-FU associé ou non à des émulsions lipidiques d’huile de soja (-6 AGPIs, Lipovenoes®) ou de poisson (-3 AGPIs, Omegaven®). La mise en évidence des propriétés des AGPIs à une concentrations de 10 μM sur l’action du 5-FU en condition sub-toxique, a été réalisée au moyen des tests suivants : (i) un test MTT a permis d’évaluer la viabilité cellulaire après 72 h de traitement ; (ii) la formation de « blessure mécanique » au sein d’une monocouche cellulaire confluente a permis de déterminer le potentiel migratoire ; (iii) un test utilisant les cellules cultivées en matrice extracellulaire artificielle (Matrigel™) a été réalisé pour évaluer le caractère invasif des cellules. Résultats. – Le test MTT indique que la lignée LS174T est plus sensible au 5-FU que la lignée HT-29 (% de viabilité de 58,9 +/– 2,7 vs 98,1 +/– 3,7). Bien que les deux lignées présentent la même sensibilité aux -3 AGPIs, la combinaison des -3 AGPIs avec le 5-FU n’induit une cytotoxicité additive que dans la lignée LS174T (% de viabilité de 22,5 +/– 0,9 vs 58,9 +/– 2,7 ; p < 0,05). De même, les 6 AGPIs combinés ou non au 5-FU, tendent à diminuer la viabilité des cellules LS174T dans ces mêmes conditions, alors qu’elle augmente l’agrégation des cellules LS174T dans le Matrigel™ des tests d’invasion cellulaire. Toutefois, les -6 AGPIs, combinés ou non au 5-FU, n’ont pas d’effet significatif sur la migration des deux lignées, alors qu’une tendance à l’inhibition de la migration des deux lignées est observée avec la combinaison de -3 AGPIs avec 5-FU. De façon similaire, les -3 AGPIs associés au 5-FU contribuent à diminuer le potentiel invasif des lignées HT-29 et LS174T lorsqu’elles sont cultivées au sein d’une matrice de membrane basale in vitro. Conclusion. – Ces résultats préliminaires suggèrent que la coadministration de -3 AGPIs pourrait agir en synergie avec le 5-FU pour inhiber la croissance, la migration et l’invasion tumorales. Toutefois, cette synergie semble dépendre des propriétés génétiques des cellules cancéreuses. D’autres expériences sont en cours sur l’étude de l’action des émulsions lipidiques afin de déterminer les mécanismes moléculaires et cellulaires impliqués.

P146 Analyse des mécanismes d’interaction entre acides gras polyinsaturés oméga-3 et radiothérapie dans deux lignées cellulaires d’adénocarcimomes colorectaux humains Cai F*1, Dupertuis YM1, Granci V1, Rouzaud M2, Miralbell R2, Pichard C1 1 Unité de Nutrition, 2 Division de Radio-Oncologie, hôpitaux universitaires de Genève, Genève, Suisse Introduction et but de l’étude. – Nous avons précédemment montré qu’un prétraitement avec des acides gras polyinsaturés -3, comme l’acide eicosapentaénoïque (EPA) ou l’acide docosahexanoïque (DHA), augmente la cytotoxicité de la radiothérapie. Cette étude vise à évaluer les mécanismes d’interaction entre EPA ou

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DHA et la radiothérapie dans deux lignées cellulaires d’adénocarcinomes colorectaux humains. Matériel et Méthodes. – Les lignées cellulaires HT-29 et LS174T ont été exposées à un traitement de 20 à 100 M EPA ou DHA, suivi par une irradiation de 2 à 6 Gy. Les taux de malondialdéhyde, de peroxydes et de survie cellulaire ont été mesurés, respectivement, par analyse HPLC, titrage par complexométrie et test clonogénique. L’expression protéique de NF – B, Bax et de l’angiogénine a été mesurée par Western Blot. Résultats. – Les cellules LS174T se sont révélées plus sensibles à une combinaison de 2 à 6 Gy avec 20 à 50 M DHA et, dans une moindre mesure EPA, que les cellules HT-29 (Table). Alors que les concentrations cytoplasmiques du malondialdéhyde et des peroxydes ont été augmentées de 2,3 ± 0,6 fois (p < 0,05) par une combinaison de 4 Gy avec 50 M DHA et de 1,9 ± 0,0 fois (p < 0,05) par une combinaison de 4 Gy avec 50 M EPA dans les cellules HT29, aucune différence significative n’était observée dans les cellules LS174T. L’effet modulatoire de DHA et EPA sur l’inflammation, l’angiogenèse et l’apoptose a été mis en évidence par une diminution de l’expression de NF – B et de l’angiogénine et une augmentation de l’expression de Bax. Table. – Survie des cellules HT-29 et LS174T après un traitement de 50 M EPA ou DHA combiné à une irradiation de 2 à 6 Gy. Lignée HT-29

LS174T

Type de 3

2 Gy

EPA

51,3 ± 26,3*

4 Gy 22,3 ± 13,8*

6 Gy 10,8 ± 8,3*

DHA

25,0 ± 15,1*

14,7 ± 7,1*#

7,0 ± 3,2*#

EPA

31,3 ± 6,8*

12,7 ± 0,8*

2,4 ± 1,7*

DHA

1,8 ± 0,8*

1,2 ± 0,1*#

1,2 ± 0,1*

Les résultats sont exprimés en moyennes ± SD de colonies/contrôles (%). *p < 0,05, différent des contrôles ; #p < 0,05, différent de l’irradiation ; p < 0,05, DHA différent de EPA (Student’s t test).

Conclusion. – Le DHA est plus efficace que l’EPA pour augmenter la radiosensibilité des lignées cellulaires étudiées. L’effet modulatoire de DHA et EPA sur la radiothérapie est corrélé à une augmentation de la peroxydation lipidique et de l’apoptose dans les cellules HT-29. Bien que les cellules LS174T se montrent plus sensibles à DHA et EPA que les cellules HT-29, les mécanismes d’interaction avec la radiothérapie n’ont pu être clairement définis pour cette lignée dans ces conditions expérimentales.

P147 Effets comparatifs des huiles de poisson et de soja sur deux lignées d’adénocarcinomes colorectaux humains avec différents statuts bax Granci V*1, Cai F1, Dupertuis YM1, Pichard C1 1 Unité de Nutrition, HUG, Genève, Suisse Introduction et but de l’étude. – Les acides gras polyinsaturés 3 (-3 AGPIs) sont connus pour promouvoir l’apoptose des cellules cancéreuses. Le but de cette étude était de comparer in vitro et in vivo les effets potentiellement anticancéreux de l’huile de poisson, riche en -3 AGPIs, avec l’huile de soja sur deux lignées d’adénocarcinomes colorectaux humains avec différents statuts bax. Matériel et Méthodes. – La prolifération et la survie des cellules HT-29 (bax+/+) et LS174T (bax – /-) ont été évaluées in vitro après un traitement de 72 à 96 h avec 40 ou 8 mg/L d’huile de poisson (Omegaven®) ou de soja (Lipovenoes®) au moyen, respectivement, de tests colorimétriques et clonogéniques. Les deux lignées cellulaires