P194 - Le losartan protège les îlots pancréatiques humains du stress du réticulum et du stress oxydant induits par le glucose

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à E21,5 le pancréas GK présente un pourcentage moindre de cellules insuline + (62 %) et endothéliales (56 %) que le pancréas W. Conclusion : Nous avons établi un modèle de développement du pancréas ex vivo dans lequel la différenciation des cellules endocrines, exocrines et endothéliales est proche de celle observée in vivo. Dans ce contexte, les anomalies du développement du pancréas chez le rat GK ne sont pas observées après greffe dans le coelome de poulet, et ceci ne paraît pas le fait d’un retard de croissance généralisé, soulignant ainsi le rôle de l’environnement dans le développement. De plus, ce travail lie positivement le développement de la vascularisation et de la masse bêta pancréatique GK.

pour les SAOS léger, à 2,36 +/– 0,99 ml/min/kg pour les modérés et 1,56 +/– 0,96 ml/min/kg pour les sévères. Conclusion : L’altération de l’oxydation des lipides à l’exercice semble clairement dépendante du degré de sévérité du SAOS. Les mécanismes responsables de ces différences de profils métaboliques restent hypothétiques, mais l’inflammation de bas grade et/ou l’insulinorésistance sont probablement en causes.

P194 Le losartan protège les îlots pancréatiques humains

P.-H. Ducluzeau1, M. Priou1, M. Flamment1, J. Rieusset2, Y. Malthiery1

du stress du réticulum et du stress oxydant induits par le glucose R. Cassel1, S. Dubois1, Y. Pan1, A. Mesnier1, D. Bosco2, O. Richard3, C. Thivolet1, A.-M. Madec1 1

INSERM U870, Oullins ; CITC, Genève, Suisse ; Unité mixte de Thérapie Cellulaire et Tissulaire, Saint Ismier.

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Introduction : Une étude récente montre une réduction significative du risque de développer un diabète de type 2 après un traitement bloquant le système rénine-angiotensine (SRA). Faisant l’hypothèse que ces effets bénéfiques peuvent être attribués à une action directe sur les cellules béta qui possèdent leur propre SRA, notre étude évalue les effets du Losartan, un inhibiteur du récepteur de l’angiotensine II, sur le stress induit par le glucose dans des îlots pancréatiques humains. Matériels et méthodes : Des îlots humains de 8 donneurs d’organes ont été analysés après 96 h de culture en présence de 5,5 mmol/l glucose ou 16,7 mmol/l avec ou sans ajout de 5 μmol/l Losartan dans les 48 dernières heures. L’expression des marqueurs spécifiques du stress du reticulum (RE) a été étudiée par RT-PCR et par Western Blot. Le niveau des Ros a été évalué par la mesure de l’oxydation de DCF. Résultats : Un glucose élevé augmente le niveau des ROS de 60 % (p = 0,02). Cet effet est diminué de 50 % par le Losartan. Les expressions des ARNm de GRP78, XBP1-s et ATF4 sont augmentées en présence de 16,7mmol/l de glucose (u 2,2 ; p < 0,012, u 1,5 ; p < 0,009, u 1,8 ; p < 0,05, respectivement) vs 5,5 mM. L’expression protéique de grp78 est augmentée en présence de glucose 16,5 mM vs 5,5 mM de 152,90 % et celle de p-eIF2 est diminuée de 76,59 %. L’addition de Losartan au milieu hyperglucosé réduit significativement l’expression de GRP78 de 55 % (p < 0,01), XBP1-s de 51 % (p < 0,02) et ATF4 de 54 % (p < 0,05) et normalise le niveau d’expression protéique de p-eIF2 par comparaison au mileu hyperglucosé seul. Conclusion : Le blocage du système SRA par le Losartan protège les îlots humains du stress oxydant et du stress du RE induits par le glucose. Ces données peuvent avoir des conséquences thérapeutiques importantes pour la prévention du diabète de type 2 et la transplantation d’îlots. P 195

P195 Rôle de la sévérité du syndrome d’apnées/hypopnées obstructives du sommeil (SAOS) sur le métabolisme des substrats à l’exercice chez 45 hommes présentant un syndrome métabolique et/ou un diabète de type 2 M. Desplan, J.-F. Brun, C. Fedou, A. Avignon, J. Mercier CHU La Peyronie, Montpellier.

Introduction : Les troubles de la régulation glucidique présents dans le SAOS sont corrélés avec l’Index d’Apnée Hypopnée (IAH) avec un risque élevé de présenter un syndrome métabolique (SMet) ou un diabète de type 2 (DT2). Or, la calorimètrie indirecte à l’exercice est un moyen d’évaluation pertinent des troubles du métabolisme des substrats en plus de son intérêt d’individualisation d’un réentraînement à l’effort en ciblant son intensité au LIPOXmax pour des patients à risque cardio-vasculaire élevé. Dans ce travail, nous avons souhaité évaluer si le profil d’oxydation des substrats à l’exercice était influencé par l’IAH, principal marqueurs de la sévérité du SAOS. Patients et méthodes : Un bilan métabolique comportant impédancemétrie, calorimétrie indirecte d’exercice, polygraphie ventilatoire et prélèvement veineux était réalisé lors d’une courte hospitalisation. Les sujets inclus étaient des hommes âgés de 53,2 +/– 11 ans (IMC 34,6 +/– 5,4), sédentaires (Voorips < 9.4), avec un IAH > 5/h et associant un DT2 (37,8 %) et/ou un SMet (IDF2005). 3 groupes étaient constitués selon l’IAH : léger (5 à 15/h ; n = 11), modéré (15 à 30/h ; n = 17) et sévère (>30/h ; n = 17) avec appariement selon l’âge et l’IMC. L’objectif était de mesurer le profil d’oxydation des substrats gluco-lipidiques pour chaque palier (repos, 20 %, 30 %, 40 % et 60 % de la VO2max théorique). Les Débits d’Oxydation Lipidique (DOL) et Glucidique (DOG) étant ajustés à la masse maigre. Résultats : Les DOL (mais pas les DOG) montraient des différences nettement significatives entre les groupes de sévérité (p < 0,005) pour tous les paliers d’exercice. Au LIPOXmax, le DOL était mesuré à 2,94 +/– 0,85 ml/min/kg

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P196 Dynamic regulation of mitochondrial network and oxidative functions during 3T3-L1 fat cell differentiation 1

Inserm U694, Angers - 2Inserm U880, Lyon.

Introduction: Mitochondria have been shown to be impaired in insulin resistance-related diseases, but have not been extensively studied during the first steps of adipose cell development. This study aimed to describe the sequence of changes of the mitochondrial network and function during the first days of adipogenesis Matériels et méthodes: 3T3-L1 preadipocytes were differentiated into adipocytes. At days 0, 3, 6, 9 and 12, mitochondrial network imaging, mitochondrial oxygen consumption, membrane potential, and oxidative phosphorylation efficiency were assessed in permeabilized cells. Gene and protein expressions related to fatty acid metabolism and mitochondrial network were also determined Résultats: Compared to preadipocytes (day 0), new adipocytes (day 6 and 9) displayed profound changes of their mitochondrial network that underwent fragmentation and redistribution around lipid droplets. Drp1 and mitofusin 2 displayed a progressive increase in their gene expression and protein content during the first 9 days of differentiation. In parallel with the mitochondrial network redistribution, mitochondria switched to uncoupled respiration with a tendency towards decreased membrane potential, with no variation of mtTFA and NRF1 gene expression. The expression of PGC1 (and NRF2 genes and genes involved in lipid oxidation (UCP2, CD36, CPT1) was increased. ROS production displayed a nadir at day 6 with a concomitant increase in antioxidant enzyme gene expression Conclusion: This 3T3-L1 based in vitro model of adipogenesis showed that mitochondria adapted to the increased number of lipid droplets by network redistribution and uncoupling respiration. The timing and regulation of lipid oxidationassociated ROS production appeared to play an important role in these changes.

P197 Le rapport Leptine/Adiponectine est un marqueur du nombre de critères du syndrome métabolique au sein de la cohorte Numévox S. Dubois, A. Gautier, I. Alix, V. Rohmer, P.-H. Ducluzeau Dpt EDN, CHU, Angers.

Introduction : La répartition viscérale du tissu adipeux (TA) est un des éléments clefs du syndrome métabolique (SM). Les concentrations plasmatiques de Leptine et d’Adiponectine sont en étroite relation avec la distribution du TA. Ce travail a pour but de caractériser l’intérêt du rapport Leptine/Adiponectine (L/A) comme marqueur du SM. Matériels et méthodes : Les taux de Leptine, d’Adiponectine et l’étude par IRM de la répartition de la masse grasse viscérale et sous cutanée ont été évalués chez 313 sujets constituants une cohorte prospective. La cohorte Numevox est composée de 97 sujets indemnes de SM (moins de 3 critères IDF), 122 SM + et non diabétiques, et 94 diabétiques de type 2 (DT2) avec SM. Le ratio L/A a été mis en relation avec les données anthropométriques, biologiques et vasculaires de ces patients. Résultats : Après ajustement sur le sexe et l’âge, la Leptinémie est plus élevée chez les SM + que chez les DT 2 (17.7 vs 13,8 μg/L). L’Adiponectinémie diminue progressivement entre les statuts SM-, SM + et DT2, sans atteindre la significativité. A contrario le ratio L/A distingue significativement les 3 groupes. Sur l’ensemble du groupe, le ratio L/A (ajusté sur l’âge et le sexe) est positivement corrélé au : tour de taille, rapport taille sur hanche, quantité de graisse viscérale mesurée par IRM (r = 0.53), triglycéridémie, glycémie à jeun, insulinémie, pression artérielle systolique et diastolique et, nombre de critères du SM (r = 0.39). Conclusion : Ce travail montre l’intérêt potentiel du ratio L/A comme marqueur, indépendant de l’âge et du sexe, du niveau de risque métabolique d’un sujet.

P198 Étude de l’implication de la pancréastatine dans la physiopathologie du diabète associé aux adénomes hypophysaires « non sécrétants » F. Eas1, 2, 3, 4 1

Endocrinologie CHU, Rouen ; laboratoire Hormonologie, centre Henri Becquerel, Rouen ; Laboratoire d’anatomo-pathologie CHU, Rouen ; 4 Neuro-chirurgie CHU, Rouen. 2 3

Introduction : La pancréastatine (Pst), produit de maturation de la chromogranine A, inhibe in vitro et in vivo la sécrétion d’insuline et stimule celle de gluca-