Polymorphisme des groupes plaquettaires en Provence. Comparaison avec les fréquences des allo-antigènes spécifiques plaquettaires observées dans les autres populations

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Rev. Fr. Transfus. H6mobiol., 1992, 35, 25-32

MEMOIRE ORIGINAL

Polymorphisme des groupes plaquettaires en Provence. Comparaison avec les fr6quences des allo-antigdnes sp6cifiques plaquettaires observ6es dans les autres populations par D. Reviron*, P. Mercier*, C. D a b a n i a n * , S. Cambiaggi*, M. Andr6*, Y. Delord*, C. Kaplan**, M.C. M o r e l - K o p p * * , P. Auquier*** * Centre r6gional de transfusion sanguine de MarseiUe (G. Cotte), 149, b d Baffle, 13392 MarseiUe cedex 5. ** Insfitut National de Transfusion Sanguine, 6, r u e Cabanel, 75739 Paris cedex 15. *** Laboratoire de sant6 publique de ]a facult6 de m6decine de Marseille, 27, bd J.-Moulin, 13005 Marseille.

RESUME

Les syst~mes HPA-1 (PIA) ; HPA-3 (Bak) HPA-5 (Br) sont impliqu~s dans la majorit~ des cas de thrombop~nie n~onatale alloimmune et de purpura thrombop~nique post-transfusionnel. La fr~quence des antig~nes sp~cifiques plaquettaires de ces trois systbmes a ~t~ ~tudi~e chez 101 donneurs de sang non apparent~s d'origine provengale depuis au moins trois g~n~rations. La technique de Ttr~s it p a r t : D. Rexaron.

D. REVIRON et coll.

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typage employOe est le MAIPA (monoclonal antibody-specific immobilization ptatelet antigen). Les fr~quences ph~notypiques observOes sont les suivantes : HPA-la (PIal) : 9 7 % ; HPA-3a (Bak a) : 88,1%. Ces frOquences sont comparables gt celles rapportOes pour l'Europe et l'AmOrique du Nord, par contre elles sont diffOrentes des fr~quences observOes dans les populations orientales et de l'AmOrique du Sud. Notre population provengale a la fr~quence la plus Olevde de HPA-5b (BrO rapportOe jusqu'alors : 23,8 %. Ces r~sultats permettent d'~tablir une premiOre d~finition du polymorphisme des groupes plaquettaires dans la population proven~ale. Des Otudes similaires, dans d'autres populations, permettront de disposer d'un marqueur gOnOtique suppl~mentaire dans le cadre de l'h~matologie g~ographique basde jusqu'alors sur les polymorphismes drythrocytaires, leucocytaires et sOriques. Les variations observ~es entre les diffOrentes populations seront autant d'Ol~ments utiles aux ~tudes ~pid~miologiques des affections associ~es.

SUMMARY

Platelet groups polymorphism in Provence (Southern France). Comparison with frequencies of platelet-specific alloantigens in other populations Systems HPA-1 (PP) ; HPA-3 (Bak) HPA-5 (Br) are involved in neonatal alloimmune thrombocytopenia and post-transfusion purpura. The frequencies of platelet-specific antigens in these three systems have been studied among one hundred one unrelated blood donors from Provence (South of France) for three generations. Typing was performed by the MAIPA test (monoclonaI antibody-specific immobilization platelet antigen). The phenotypes frequencies found were : HPA-la (PlTM): 97 % ; HPA-3a (Baka) : 88,1%. These frequencies are quite similar to those reported in Europe and North America, but are different compared to Oriental and South American populations. Our Provencal population has the highest frequency of HPA-5b (Br~) yet reported : 23.8 %. These results define the polymorphism of platelet-specific antigens in Provencal population. Similar studies, among other populations, would provide new data for geographical haematology, which has so far been based on erythrocyte, leucocyte and serum polymophisms. The variations between populations in these platelet-specific polymorphisms would be so many useful descriptive elements for the epidemiological study of associated diseases.

GROUPES PLAQUETTAIRES E N PROVENCE

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INTRODUCTION

La fr6quence des allo-antigbnes plaquettaires du syst6me HPA-5 (Bra/Brb) d6couvert en 1988 par Kiefel et al. [1] n'a 6t6 6tudi6e que dans un nombre restreint de populations. Nous rapportons ici les fr6quences antig6niques de ce syst6me, ainsi que ceres du syst6me HPA-1 (plnl/p1 a2) et HPA-3 (Baka/Bakb) dans la population provengale de souche. Ces trois syst6mes sont irnpliqu6s dans la majorit6 des cas de thrombop6nie n6onatale aUoimmune (TNA) et de purpura thrombop6nique post-transfusionnel.

P O P U L A T I O N ET M E T H O D E S

L'6tude historique et g6ographique de la population proven~ale nous a conduit/~ pr61ever dans une r6gion off la population est rest& relativement stable dans le temps,/i l'abri des flux de populations et des grandes immigrations des xIxe et xx ° si6cles. La r6gion de la petite Crau, d61imit6e par les villes d'Avignon, Arles et Salon-de-Provence, a ainsi 6t6 retenue pour s61ectionner les sujets de l'&ude : 101 sujets, non apparent6s, ayant quatre grands-parents n6s en Provence. Le typage de leurs antig6nes plaquettaires sp6cifiques a 6t6 r6alis6 par la m6thode du MAIPA (monoclonal antibody-specific immobilization platelet antigen) [2]. Le Maipa associe la sp6cificit6 d'anticorps monoclonaux dirig6s contre les glycoprot6ines (GP) portant les antig6nes plaquettaires et la sensibilit6 de la technique immunoenzymatique. Le complexe GP IIb/IIIa porte les 6pitopes du systbme HPA-1 et HPA-3, le complexe GP Ia/IIa porte les 6pitopes du syst6me HPA-5. Les allos~rums utilis6s pour les typages provenaient de femmes multipares et 6taient les suivants : anti-HPA-la (anti-PP1), anti-HPA-3a (anti-Baka) (Paris) ; anti-HPA-5b (anti-Bra), anti-HPA-5a (anti-Bru) (Paris et Marseille). Les plaquettes sont incub6es simultan6ment avec l'allos6rum humain et un anticorps monoclonal de souris de type IgG sp6cifique anti GP IIb/IIIa (CD 41) ou anti Ia/IIa (CDw 49b). Aprbs lavages, elles sont solubilis6es en tampon Tris contenant 0,5 % de NP-40. Les lysats plaquettaires sont centrifug6s ~ 13 000 g e t les surnageants, dilu6s au 1/4, sont transf6r6s dans les puits d'une microplaque dont le fond a 6t6 pr6alablement recouvert avec une antiglobuline de chbvre anti-IgG(Fc) de souris. Apr6s incubation puis lavages, les allo-anticorps humains fix6s sur les glycoprot6ines sp6ciflquement immobilis6es sont d6tect6s par addition d'une antiglobuline anti-IgG(Fc) humaine coupl6e /t la peroxydase. La r6action enzymatique se produit apr~s addition d'H202 et d'O-ph6nyl6ne diamine. La r6action colorim6trique est stopp6e par addition d'H2SO4 1 M. La lecture des plaques s'effectue/~ 490 nanom&res. Tous les tests sont effectu6s en dupliqu6. Les r6sultats sont exprim6s en

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D. R E V I R O N et coll.

fonction de la diff6rence de densit4 optique entre la moyenne des deux tests et la mesure du blanc (puits sans lysat plaquettaire). Grfice au typage complet dans le syst6me HPA-5 nous avons pu d6finir le nombre de sujets h4t6rozygotes HPA-5A/HPA-5b et de sujets homozygotes HPA-5a/HPA-5a et HPA-5b/HPA-5b. Cette pr6cision permet de d6terminer les fr6quences g6niques par d6compte des gbnes pour le systbme HPA-5 et de v6rifier l'6quifibre de la loi de Hardy Weinberg sur notre 6chantiUon. Les fr6quences g6niques des syst6mes HPA- 1 et HPA-3, ainsi que l'erreur standard attach6e h cette estimation ont 6t6 calcul6es par la m6thode de la fr6quence g6nique estim6e [3].

RESULTATS Le t a b l e a u I pr6sente les fr6quences antig6niques et g6niques des 101 sujets provenqaux non apparent6s 6tudi6s.

Tableau I

Frdquences antzgdniques et gdniques plaquettaires chez les Provengaux. AntigOne

Fr6quence ph6notype

Ecarttype

Fr6quence g6mque estam6e

Ecarttype

HPA-la HPA-3a HPA-5b

97,0% 88,1% 23,8 %

1,7% 3,2% 4,2 %

82 % 66 % 12,7 %

4,9% 4,6% 2,4 %

Fr6quence g6mque calcul6e

Ecarttype

12,4 %

2,3%

Le mod61e d'Hardy Weinberg s'ajuste bien h notre 6chantillon, avec un Chi 2 = 0,369 %, la probabilit6 associ6e ~ cette valeur est sup6rieure h73%. La vbrification de cet 6quilibre valide la repr6sentativit6 de notre 6chantillon et le modble g6n6tique de diall611isme dans le systbme HPA-5a/HPB-5b. Le t a b l e a u H permet de comparer les fr6quences des antig6nes sp6cifiques dans les 6tudes publi6es sur les diff6rentes populations.

DISCUSSION Syst~me HPA-I (PIA) La fr6quence observ6e dans notre population (97 %) se situe darts la moyenne de ceUes observ6es dans les populations caucasoides 6tudi6es (97 % ~ 98,2 %). L'6tude des diff6rences observ6es permet de distinguer

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GROUPES PLAQUETTAIRES EN PROVENCE Tableau II

Comparatson des [rdquences des antig~nes spdciflques plaquettatres dans les dtffdrentes populations. Population 6tudi6e [ref.]

Pays-Bas USA France Canada G.-B. Allemagne USA (nolrs) Cbah ffapon Cor6e Provence

[4, 5] [6, 7] [8, 9] [10] [11] [12, 13, 14] [15] [17] [14] [ 16]

Antigbne HPA-Ia Nombre Fr6quence tests ph6notype 287 452 289 1 143 1 983 1 211 243 112 300 126 101

97,6 % 97 % 97,6 % 98,2 % 98,2 % 97,9% 99,6 % 100 % 100 % 100 % 97,0 %

AntigOne HPA-3a Nornbre tests

Fr6quence ph6notype

N.C. N C.

90,8 % 86 %

Antigbne HPA-5b Nombre Fr6quence tests ph6notype

308

22,7 % 20

N C.

86,9 %

105

112

89,3 %

82

4,9 %

%

126 101

87,3 % 88,1%

101

23,8 %

deux grands groupes de population. D'tme part le groupe des Caucaso~des: Pays-Bas [4], Am6ricains blancs [6], France [8], Canada [10], Grande-Bretagne [11], Allemagne [12], qui sont HPA-la n6gatifs dans 2 % des cas. D'autre part le groupe des Mongoloides : Japon [14], Cor6e [ 16] et des Am6rindiens [ 17] qui ne sont jamais HPA-1 a n6gatifs (0 % sur 358 sujets). Ces deux groupes de populations se distinguent d6jh par leurs fr6quences rh6sus : 80 % h 85 % de sujets D positifs chez les Caucaso'ides versus 99 % ~ 100 % chez les Asiatiques et les Am6rindiens. Les fr6quences HLA et notarnment A9 ainsi que celles du groupe Diego s6parent encore ces deux populations sur l'atlas de l'h6matologie g6ographique [18]. En Europe et aux USA la plupart des cas de TNA et de PTP sont dfis des anticorps anti-HPA-la. Les sujets HPA-la n6gatifs s'imrnunisent contre l'antigbne HPA-la lots d'tme grossesse ou d'une transfusion sanguine. Jusqu'h maintenant aucun cas de TNA ou de PTP dues h un anti-HPA-la n'a 6t6 rapport6 dans les populations orientales [16]. L'6pid6miologie de ces affections est donc en rapport avec les fr6quences antig6n6tiques observ6es dans ces populations: pas de sujets HPA-la n6gatifs : pas d'anticorps anti-HPA-la. La population provenqale ne se distingue pas des autres populations caucasoides par la fr6quence des sujets HPA-la n6gatifs (2,97 %). Le risque d'observer une immunisation anti-HPA-la serait donc 6quivalent celui qui est d6crit dans les autres pays europ6ens et d'Am6rique du Nord. Bien que les situations d'incompatibilit6 existent dans 1 ~ 2 % des grossesses, ce type d'alloimmunisation ne survient que pour 1 grossesse sur 1 000 environ [19]. Une TNA s6v6re ne survient que pour 1 grossesse sur 5 000 [20], ce qui s'explique par la pr6sence de facteurs de risque associ6s dont certains sont immtmog6n6tiques [12]. Les risques li6s ~t ces allo-immunications HPA-la sont les mieux connus et les plus s6vbres, mais des TNA par anti-HPA-lb chez des m6res HPA-lb n6gatives, bien qu'extr6mement rares, ont 6t6 d6crites [21]. Les nouveUes possibilit6s de typage plaquettaire permettent de diagnostiquer ces allo-immurdsations

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D. R E V I R O N et coll.

et donc de pr6venir le risque de morbidit6 n4onatale par l'indication de mesures obst6tricales et transfusionnelles.

Syst6me HPA-3 (Bak) Les fr6quences observ6es sont comparables dans toutes les 4tudes publi6es sur des populations caucaso/des ou asiatiques [5, 7, 13, 16, 17]. Les fr6quences observ6es varient de 86 %/t 91% suivant les 6tudes pour le ph6notype HPA-3a +. La fr6quence de HPAa-3a + de 88,1% observ6e chez les Provengaux, s'inscrit dans cet intervalle.

Syst~me HPA-5 (Br) Le syst6me HPA-5 (Br) a 6t6 d6couvert en 1988 Kieffel et coll. [1]. Trois 6tudes des fr6quences ph4notypiques HPA-5 ont 6t6 pubh6es/: ce jour. Elles ont 6t6 r6alis6es en Allemagne (~ Giessen), en France (/~ Cr4teil) et anprbs des Indiens mapuches du Chili [17]. Les fr6quences observfes dans notre population provenGale (23,8 °R de sujet HPA-5b +) sont proches de ceUes de Giessen (20 %) et de Cr6teil (22,7 %). En revanche les Mapuches sont HPA-5b + dans seulement 5 % des cas. Les fr6quences ph6notypiques des populations asiatiques dans ce syst6me n'ont pas encore 6t4 6tudi6es. L'immunisation fceto-maternelle antiHPA-5b est la deuxi6me cause de TNA [22]. Ces TNA peuvent 6tre aussi graves, cliniquement, que les TNA dues h u n anti-HPA-la [23]. La technique de raise en 6vidence des antigbnes de ce systbme 6tant r4cente, le hombre de cas document6s est encore r4duit. Des d6pistages/~ plus grande 6chelle permettront de mieux prfciser les implications cliniques de ce syst6me dans l'avenir.

CONCLUSION On sait depuis longtemps que les fr6quences des groupes sanguins varient suivant les populations. Les groupes plaquettaires constituent un polymorphisme de mise en 6vidence r4cente. Les r6sultats obtenus ici nous permettent d'6tablir une premi6re d6finition du polymorphisme des antig6nes plaquettaires servant de r6f6rence, dans la population provengale. Des 4tudes similaires, dans d'autres populations, devraient permettre fi terme, de disposer d'un marqueur g6n6tique suppl6mentaire dans le cadre de l'h6matologie g4ographique qui n'a utilis6 ~ ce jour que les polymorphismes 6rythrocytaires, leucocytaires et s6riques. Les variations des fr6quences entre les diff6rentes populations seront autant d'614ments utiles aux 6tudes 4pid6miologiques des affections associ4es.

GROUPES PLAQUETTAIRES E N PROVENCE

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