Poussière de maison Activité corrélée de trois types d'extraits de poussière par rapport aux extraits d'acariens, fourrure de chat et squames humaines

Poussière de maison Activité corrélée de trois types d'extraits de poussière par rapport aux extraits d'acariens, fourrure de chat et squames humaines

POUSSIERE DE MAISON Activit6 corr616e de trois types d'extraits de poussi re par rapport aux extraits d'acariens, fourrure de chat et squames humaines...

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POUSSIERE DE MAISON Activit6 corr616e de trois types d'extraits de poussi re par rapport aux extraits d'acariens, fourrure de chat et squames humaines B. GUI~RIN *, B. H E W I T T * et B. W U T H R I C H **

RI~SUMI~

SUMMARY

L'allergie dite << h la poussi~re de m a i s o n >> i m p l i q u e de n o m b r e u x allerg~nes, dont p r i n c i p a l e m e n t c e u x d'aeariens mais aussi de pl~an~res a n i m a u x et notamm e n t de chat ; ces allerg~nes doivent done ~tre presents dans les extraits p o u r usage diagnostique. II a paru utile d'~tudier, par la technique du R A S T direct appliqu~ h des s~rums de sujets allergiques ~ la poussibre et ~t ccs d e u x groupes de constituants, ]a correlation existant entre diff~rents extraits de poussi~re, couramm e n t uti]is~s en France, e t / o u ceux d'acariens et de phan~res de chat, en tenant c o m p t e de la sensibi|it~ a u x squames h u m a i n e s . Les trois extraits ~tudi~s ont pr~sent~ u n e corr~latlon significative mals c'est le m~]ange poussi~re et moisissures domestlques qui a d~termin~ les coefficients les plus ~lev~s.

Housedust : correlation o / t h e activity o] three types of housedust extracts, and that of extracts of acarlans, cat ]ur, and human danders. - - So-called housedust allergy implicates a n u m -

L'allergie h la poussi~re de maison pose de nombreux problbmes aux malades, aux cliniciens et aux fabricants tout particuli~rement en ce qui eoneerne la nature des substances responsables. La poussi~re est indiscutablement, e n effet, un mdlange complexe hdtdrog~ne de substances allergdniquement actives et inactives dont les proportions relatives varient suivant la source de la mati~re premiere. Pour tenter d'isoler un ou plusieurs allerg~nes majeurs dits (( allerg~nes de la poussiSre de maison )), de nombreuses techniques de fractionnement et purification ont ~t$ propos~es [3, 4, 7, 8]. Elles prdsentent en commun le risque d'exclusic~n dans ]e produit final de certains compo-

sants actifs, ou du moins la possibilitd qu'ils ne se retrouvent pas dans les proportions de l'extrait brut. De nombreux travaux ont maintenant montrd que la majoritd des sujets dits (( allergiques h la poussiSre )), apr~s un diagnostic pos~ d'apr~s le rdsuhat des tests in vivo et in vitro, dtait sensibilisde dga]ement au D. pteronyssinus [9, 11, 12] et qu'il existait, en outre, une forte rdaction croisde entre les deux extraits allerggniques ; des dtudes ult~rieures ont confirmd qu'il existait souvent une sensibilitd associde au chat, pour les sujets ehez lesqueis avait dtd trouvde une rdaction positive h la poussi~re de maison et ndgatire aux acariens [1, 10]. Par ailleurs, Berrens et coll. ont montrd que les squames humaines elles-m~rnes pouvaient eonstituer

* Laboratoire des ** Allerqiestation, (Suisse).

Sfallerg&nes, JoinviIIe-le-Pont (France). Dermatoloqlsche Universit&tsklinik Zilrich

Tir6s & part : B. Gu6rin, Laborat0ire des Stallerqbnes, 160, Quai

de Polangis, 94340 JOINVILLE-LE-PONT (France). Re~u le 25 avril 1981. Accept~ le 20 mai 1981.

ber of allergens, principally that of acarians, but also those of animal integuments, especially of the cat ; these allergens should be present in the extracts used for diagnosis. It appeared worthwhile by using the R A S T technique applied directly 'to the s e r u m of subjects allergic to dust, a n d to these two groups of constituents (acarians and cat desquamations), to examine the correlation existing between different dust extracts currently used in France, and those of acarians, and those of cat desquamations, in taking into account sensitivity to h u m a n squames. T h e three extracts examined showed significant correlation, but the hlghes't coefficient of results was with a m i x t u r e of dust and domestic molds.

C-.UI~RIN B., HEWITT B., WUTHRICH B. - - Poussi~re dc [ C-.UI~RIN maison. Activi~6 corr~I6e de trois types d'extraits de pous- I si&re par rapport aux extraits d'acariens, fourrure de chat I et squames humaines. Bey. fr. Allerqol., 1981, 21 (no 4-5), 217-220.

218

~, B. GUERIN ET COLLABORATEURS/

un allergbne important de l'hypersensibilit6 h la poussi~re de maison, ee qui a 6t6 confirm6 par les 6tudes d'autres auteurs [2, 6]. Dans ce contexte, nous avons 6tudi6, par la technique du RAST direct appliqu6e h 40 s6rums humains, la corr61ation de l'activit6 allergdnique in vivo de trois extraits de poussibre du commerce, pr6par6s par le m~me laboratoire et distribuds sous les d6nominations ~ poussibre de maisou, poussi~re de maison fractionnde, poussi~re et moisissures domestiques )), avee celle d'extraits d'acariens, fourrure de chat et squames humaines. MAT#RIEL ET M#THODE

SERUMS 40 s6rums ont 6t6 s61ectionnds en fonction de leurs r6sultats en RAST direct eontre des extraits d'acariens et/ou fourrure de chat ; tous provenaient de sujets pour lesquels avait 6t6 pos6 le diagnostic d'allergie h la poussi~re de maison d'apr~s l'anamn~se, le test cutan6, le RAST et les tests de provocation, r6alis6s daus des conditions d6crites par ailleurs [13] ; aucun n'avait recu un traitemeut pr6alabIe d'hyposensibilisation. Une sensibilit6 aux acarieus rut trouvde pour 21 d'entre eux (soit 53 p. cent), au chat pour 13 (soit 33 p. cent), aux aeariens et chat conjoirttement pour 6 (soit 14 p. cent).

EXTRAITS ALLERGENIQUES 1. Poussi~re de maison brute, extrait de base au 1/10 en 13/v (Laboratoire des Stallerg~nes). 2. Poussi~re de maison fractionn6e, solution m~re au I/i0 en 13/v, extrait de poussi~re de maison fractionn6e par l'acdtone (Laboratoire des Stallerg~nes). 3. Poussibre et moisissures domestiques, extrait de base au 1/10 en p / v du m61ange suivant (Laboratoire des Stallerg~nes) : poussibre de maison 60 13. cent poussi~re de rembourrage 30 13" cent 13oussi~re de moulin h ~xains 10 13" cent - - Alternarla temds 5 13" cent - - Hormodendrum cladosporloides 5 13" cent -

-

-

-

-

-

Anti-I gE

Anti-IgE humaine de lapin Dee sp6cifique (Pharmacia). S~rum de r ~ r e n c e

Solution h 10 p. cent de sdrum albumine humaine grade V (Sigma). Technique du R A S T direct

Apr~s dilution au 1/5 en volume h l'aide d'un tampon phosphate, 50 ~tl du sdrum h 6tudier sont incubds pendant trois heures h la temp6rature du laboratoire avee le disque d'allerg~ne ; apr~s un lavage minutieux avec un tampon phosphate contenant 1 13. cent de tween 20, le disque est mis en contact pendant une nuit avec 50 ,al de solution anti-IgE marqude h l'iode 125, 13uis, apr~s lavage, la radioactivit6 fix6e est mesur6e sur un compteur gamma (Intertechnique). T o u s l e s essais sont effeetu6s en double ; le titre relatif d'IgE est d~termiu6 par application de la formule suivante : moyenne des cpm fix6s au taux relatif = disque de sdrum h titrer/moyenne des cpm fix6s au disque de s6rum de rdfgrenee.

R~SULTATS La figure 1 prdsente la distribution des rdsultats des RAST produits par les 40 s6rums eontre les trois extraits de 13oussi~re, tandis que la figure 2 illustre leur segmentation en fonetion des r6suhats des RAST aux acariens et h la fourrure de chat. En consid6rant comme positifs les titres supdrieurs h 2, il est possible de calculer (tableau I) le coefficient de corr61ation existant entre les rdsuhats des diff6rents extraits de 13oussi~re et eeux obtenus pour chaque s6rum avec les extraits d'aeariens et/ou de fourrure de chat. Par ailleurs, 10 s~rums ont donn6 des r6sultats positifs aux extraits de squames humaines et le coefficient de corr61ation entre les extraits de poussi~re de maison, d'aearieus ou de chat s'est aver6 significativement meilleur pour la poussi~re quand sont inclus dans le ealeul les titres obtenus pour les extraits de squames humaines (tableau II).

RAST Disques Les phases solides utilis6es out dt6 pr6par6es sp6cialement en incubant des disques de 13apier activ~s au bromure de cyanog~ne avec un volume ad6quat de chacun des extraits eoneentr6s d'allerg~nes sui•cant la m6thode d6erite par Brighton et coll. [ 5 ] , puis en bloquant les sites libres par action de I'EPA 33 (~pichlorhydrine dipropylamine). Tous les extraits provenaient du Laboratoire des Stallerg~nes saul eelui de squames humaines (NIBSC, Londres).

DISCUSSION I1 a 6td propos6 de nombreux procddgs de fractionnement et d'isolement des extraits de poussiSre de maison clans le but d'augmenter l'aetivit6 de l'extrait final ou eomme rnoyen de staudardisation et de contrble. Ces techniques pr6sentent le risque de concentrer s61eetivement certaines fractious actives et notamment les glyeoprotdines qui correspondent aux allerg~nes majeurs des aeariens et squames huRev. jr. Allergol., 1981, 21, 4.5

/ALLERGIE A LA POUSSIP,RE DE MAISON @

219 poussi~re de too•son

titre {RAST)

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Fro. 1. - - Titres cn RAST avec extraits de poussibres (n = 40). 1 : poussi~re de maison. 2 : poussi~rc de maison fractionn4e. 3 : poussiSre et moisissure domestiques.

tousles extraits • de poussifire, 0 poussi~re et moisissures domesfiques seulement.

O poussi6re de maison seulement. • PM£seulement.

Fro. 2. - - R@arfition par classes de RAST des sdrums positifs h la poussibre de reals•n, aux acariens et h la fourrure de chat.

TABLEAU I

TABLEAU n

COEFFICIENT D E CORRI~LATION TROUV]~ E N T R E D E R A S T A LA I~OUSSI~RE D E M A I S O N S T L E RAST AUX ACARIENS*

COEFFICIENT D E C O R R E L A T I O N E~ISTANT E N T R E LES DIFFI~RENTS EXTRAITS D E POUSSI~RE ]~T LES E~fTRAITS D'ACARIENS E T / O U F O U R R U R E D E C H A T CONSID]~I~S ISOLI~MENT O U EN TENANT C O M P T E DE LA R~PONSE

AUZ SQUAMES HUMAINI~,S ACARIENS ACARIENS

(n = 21)

~

CHAT (n = 13)

ET/ou FOURRIn~

ACARIEN

DE CHAT

(~ = 40)

.~CARI~I'q" ET/OU CI:ZAT

ETIov CHAT

+

(11 = 10)

S~UAIVLEnUMAINE

(~ = 10) Poussi~re de maiso~ Poussi~re de maison fractiomzde Poussi~re e t moisissures domestiques

0,525 (p < 0,05)

0,929 (p < 0,001)

0,477 (p < 0,01)

0,534 (p < 0,01)

0,918 (p < 0,001)

0,532 (p < 0,001)

O,811 (p < 0,001)

O,942 (p < 0,001)

O,756 (p < 0,001)

Poussi&re de maison Poussi~re de maiso~ fractionn6e Poussi~re e t moisissures domestiques

0,548

0,650

(p < 0,1)

(p < 0,05)

0,766 (p < 0,01)

0,838 (p < 0,001)

0,745 (p < 0,01)

0, 777 (p < 0,0l)

* N o m b r e de s4rums 4tudi6s : n = 40.

maines. Pour dviter cet 6cueil, Brighton et Topping [7] ont ddcrit une version simplifide de la mdthode de Berrens et Young [3] ; e l l e a 6td congue pour obtenir des extraits de rdfdrenee eontenant, autant que possible, t o u s l e s allerg~nes solubles prdsents dans la poussi~re d'origine et, en particulier, les allerg~nes provenant des phan~res d'animaux et plus particulibrement du chat dont la littdrature rapporte l'importance dans les hypersensibilit4s dites h la poussi~re de maison. Rev. Jr. ANerg91., 1981, 21, 4-5

I1 nous a paru, en consdquence, intgressant d'dtudiet, h l'aide de 40 sdrums provenant de sujets sdlectionnds en raison de leur sensibilit6 h la poussibre mais reconnus positifs aux extraits d'acariens et/ou fourrure de chat, l'activit4 comparde de trois extraits de poussi~re couramment utilisds en France. Les r6suhats des RAST obtenus avec ces trois produits ont prdsentd une corrdlation signifieafive avee eeux provenant des extraits d'acariens et de fourrure de chat. I1 a toutefois dtd not6, clans le cas du mdlange pous-

220

• B. GU~RIN ET COLLABORATEURS/

sibre et moisissures domestiques, des coefficients nett e m e n t plus 61evds pour l'ensemble des 40 s6rums dtudi6s et des titrcs rdguli~remcnt plus h a u t (cf. fig. 1). Cette am6lioration des scores cst difficilement explicable. Certes, la poussi~re de rembourrage peut c o n t e n i r des quantit6s notables d'acariens mats aucune des autres matibres premibres e n t r a n t dans la composition d u m61ange n'est contamin6e par des fourrures de chat. Nous avons envisag6 la possibilit6 inverse, c'est-h-dire la c o n t a m i n a t i o n des extraits de phan~res animales, et 6 v e n t u c l l e m e n t d'acariens, par les moisissures, mats, pour jouer u n rfle notable dans le r6sultat global des R A S T , il f a u d r a i t que les sujets y soient 6galemcnt sensibilis6s. Le ddtail des scores e n R A S T des 40 sdrums, par rapport h t o u s l e s allerg~nes constituants 6ventuels de la poussibre, n ' a pas permis de trouver d'explications satisfaisantes, saul h admettre le caract~re additif de eertaines antigdnicitds crois6es (r6sultats n o n publids). E n f i n , il faut r e m a r q u e r qua 10 des 40 s6rums fu-

r e n t trouvds positifs aux squames h u m a i n e s , h des titres d'ailleurs faibles p u i s q u e a u c u n n e d6passait 5. Bien clue modeste, carte activit6 des squames hum a i n e s parait incluse dans certains des extraits de poussi~re puisciue l ' a d d i t i o n , pour ees dix sdrums, des titres en R A S T h ceux produits par les acariens et la f o u r r u r e de chat, a u g m e n t e significativement le coefficient de corr6lation (el. tableau I I ) . E n conclusion, l'extrait de poussibre et moisissures domestiques peut donc 6tre employ6 avee u n degr6 de confiance 61ev6 pour l'6tude de la sensibilit6 aux composants les plus souvent ddcrits comma j o u a n t u n r61e d 6 t e r m i n a n t dans l'allergie h la poussibre de maison. E n fait, les trois extraits de poussibre c o n t i e n n e n t des proportions importantes d'allergbnes de chat mats la poussibre et moisissures domestiques sont significativement plus riches en allergbnes d'acariens ou e n d 6 t e r m i n a n t s c o m m u n s qua les deux autres extraits.

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