Réponse des lymphocytes de patients ayant développé des réactions anormales à la radiothérapie analysée par le test des comètes

Cancer/Radiother 0 Elsevier. Paris

1997;1:499-505

Communications

orales et posters (r&urn&)

De la biologie h la radiotbkapie R&onse des lymphocytes de patients ayant d6velopp6 des &actions anormales P la radiothCrapie analyske par le test des con&es C Alapetite t.2, P Thirion 1, A de La Rochefordieres, JM Cosset*, E Moustacchi i t UMR 218 CNRS, institut Curie-Recherche, et LRC no 1 CEA ; 2departement de radiotherapie. institut-Curie-Section medicabs, 75005 Paris, France Certaines maladies genetiques associant une hypersensibilite a des agents genotoxiques et une forte predisposition au cancer sont caracteristes par un defaut de reparation des lesions induites dans I’ADN par ces agents. Nous avons montrt, dans le cas du xtroderma pigmentosum, que le test des corn&es identifte clairement le phenotype deficient darts la voie de rtparation par excision de nucleotides (Alapetite et al, Int J Radiat Biol, 1996, J Invest Derrnatol, 1997). Certains patients ont une sensibilite anormale des tissus wins a la radiotherapie en termes de reactions precoces ou tardives. Ce ph6notype radiosensible pour& s’expliquer, au moins pour certains d’entre eux, par un defaut de reparation des lesions radioinduites dam I’ADN. Cette hypothese a en? examin& par le test des corn&es. Pour cela, la reponse lymphocytaire in vitro de 21 patients (12 cancers du sein, six lymphomes, deux cancers gynecologiques, un cancer des VADS) ayant eu des reactions anormales a Cte compar&e a celle de 24 dotmeurs sains et de neuf patients n’ayant pas eu de complications. Les cinetiques de reparation des cassures de l’ADN induites apres 2 et 5 Gy, etablies a 15, 30 et 60 minutes, sont similaires pour l’ensemble de ces donnews. Cependant. le taux de cassures residuelles 60 minutes apres 5 Gy prtsente une variabilitt plus importante dans le groupe des patients qui ont eu des reactions anormales. Fait important, pour six de ces patients (28 %), un pourcentage de lesions non reparees au-dessus de la norme a tte observe. En conclusion, un dtfaut partiel de reparation des lesions de I’ADN radio-induites pourrait contribuer 1 I’hypersensibilitb clinique d’une fraction des patients qui ont une reponse anormale a la radiotherapie.

La valeur de l’apoptose radio-induite des lymphocytes dans la prikliction de la radiosensibiliti intrin&que M Ozsahin t, NEA Crompton* ‘Service de radio-oncologic, centre hospitalier universitaire Vaudois (CHUV), CH-1011 Lausanne; zinstitut de radiobiologie, institut Paul-Scherrer, CH-5232 Villigen-PSI, Suisse But: Un test de radiosensibilitt des tissus sains a de nombreuses applications dam la clinique. Nous avons developpe un test rapide (environ 24 h) pouvant predire la radiosensibilite intrins&que individuelle, fond6 sur l’tvaluation de l’apoptose radio-induite des lymphocytes CD4 et CD8. Patients et rn&oa’es : Du sang frais (l-2 mL dans des tubes heparinists) est irradit a une dose de 0.2 et 8 Gy avec un debit

de dose de 3 Gy/min. Apres irradiation, les cellules sont collectees et preparees pour la cytometric de flux. En utilisant la cytometre-trieuse (FACsVantage). deux types de lymphocyms T sont analysts en fonction de leurs antigenes de surface (CD4 et CD8), et leurs ADN sont color& avec DAPI. Apres separaltion de ces differents types cellulaires, la mart apoptotique radioinduite est BvaluCe. La cytotoxicite est caracterisee par une degradation graduelle de I’ADN intemuclCosoma1 qui msulte de l’apparition d’un sous-pit Cl sur l’histogramme d’ADN e:tfou par l’association a la perte d’antigbne de surface causant un pit positif intermediaire sur l’histogramme d’anticorps anti-CD4 ou antiCD8. Nous avons Bvalue la variation individuelle entre les 50 donneurs avec 45 adultes sains et cinq enfants dont un avec syndrome d’immunodeficience de type ICF (4 ans) et un autre (1 I ans) avec ataxie telangiectasie (AT). La variation due au test a &tC Ctudiee en rt$&ant dix fois le test chez le m&me dormem. Rdsultats: I1 y avait une bomie correlation entre les raldiosensibilites des lymphocytes CD4 et CD8 dam le groupe des 45 donneurs (r = 0,63 et 0.65 respectivement pour 2 et 8 Gy). Non seulement pour les lymphocytes CD4 mais aussi pour les CD& il y avait une bonne correlation entre les reponses apoptotiques a 2 ou 8 Gy (r = 0.77 pour les deux groupes). Pour tous les resultats concemant les CD4 et CD8, la variation entre les individus a Cte toujours suptrieure a la variation due au test @ < 0,OOOS). Une tendance a et6 observee entre la radiosensibilit6 et l’age du donneur mais pas avec le sexe. Le sang de I’enfant atteint du syndrome ICF a montrt une reponse apoptoiique radio-induite diminuee pour les CD4, et celui de I’enfant atteint de AT, une reponse diminuee pour les CD4 et CDS. Conclusion: Notre test est un moyen rapide pour predire la radiosensibilite intrinsbque individuelle et pour stratifier les patients dans les etudes randomisees. &ant un test tvaluant l’apoptose de facon g&&ale, il peut &tre utilist pour determiner la rtponse cytotoxique aux agents chimiotherapeutiques. La skologie p53 est predictive de la Sponse B la radiochimiothkrapie prkopkatoire dans les cancers de I’oesophage JP Metges, MA Giroux, A Volant, JF Morin, JP Malhaire, H Gouerou, C Ferec, M Robaskiewicz. JP Labat F6dc:ration de cancerologie, services de gastro-enterologie, d’anatomopathologie, de medecine nucleaire et de biogtnetiquc, CHU, 29200 Brest, France Introduction: Les mutations du gene TP 53 et MTS 1 (~16) ont Bte d&rites dans de nombreux cancers, leur relation avec une reponse au traitement reste peu d&ite. Le but de ce travail ttait d’evaluer la valeur du statm p53 (serologic, immunohistcchimie et biologie moleculaire) et du gene MTSl (proteine ~16) pour la reponse a la radiochimiotherapie prtoperatoire dans une cohorte homogbne de patients atteints d’un cancer Cpidermdide de I’cesophage (CEO). Patients et m&ho&s: Vingt patients ayant un CEO (17 H/3 F) ont et6 Ctudies. 11s ont benCfici& d’une radiochimiotherapie