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Dosage des folates intraérythrocytaires: évaluation de la technique immunofluoro-enzymologique Stratus
Immunoanal Biol Sp#c (1994) 9, 299-301
299
9 Elsevier, Paris
Techniques au quotidien
Dosage des folates intra6rythrocytaires : valuation de la t:echnique immunofluoro-enzymologique Stratus MJ Bugugnani, F Bleton Laboratoire de biochimie, centre hospitalier, 78105 Saint-Germain-en-Laye Cedex, France
(Res le 3 juin 1994 ; accept~ le 21 juillet 1994)
R~sum6 -- Une techniqueimmunofluoro-enzyrnatiquea ~t~ ~valu~epour la d~terminati0ndes folates intra~rythrocytairessur rautomate Stratus 2 Baxter. Cette ~tudea comport6 des essaisde reproductibilit~(CV = 8,68%) et de correlationavec une m~thoderadioimmunologique Ciba Coming RIA Magic No Boil. La correlationest satisfaisante: y = 1,26x- 93 (r = 0,872)d~montrantainsi la va[idit~de la technique Stratus. folate / ~rythrocyte / immunofluoro-enzymologie 9
9
w
Summary ~ Red-cell folate act=wty:evaluatmnof the Stratus immunofluoroenzymologicassay. An immunof/uoroenzymaticassay was evaluated for determination of red-cell folate activity on Stratus 2 Baxter analyser. This study included reproducibility assays (CV = 8.68%) and correlation with a radio-immunologic method Magic no boil Ciba Coming. The correlation was adequate: y = 1.26x- 93 (r = 0.872), proving the validity of Stratus.
folate / red cell / immunofluoroenzymology
Introduction L'~valuation du statut en folates de I'organisme est r~alis6e gr&ce au dosage des folates s6riques et ~rythrocytaires. Les folates s~riques sont une image instantan~e de la balance vitaminique au m o m e n t du pr~levement. IIs sont sujets & des variations rapides li~es au r~gime alimentaire, & I'ingestion d'alcool, & la prise de certains m6dicaments. Les folates ~rythrocytaires, compte tenu du renouvellement lent de la masse globulaire, c o n s t i t u e n t un meilleur reflet des r6serves en c e t t e v i t a m i n e , p a r t i c u l i ~ r e m e n t des r~serves h6patiques. La concentration est & des niveaux 20 & 30 f o i s s u p 6 r i e u r s & c e l l e d e s f o l a t e s s~riques. Ainsi la d~pl6tion folique vraie correspond & une baisse des r~serves attest6e par une baisse des folates 6rythrocytaires en dessous de 160 ng de folates par ml d ' ~ r y t h r o c y t e s . Elle apparaTt apr~s 4 & 5 mois de d6ficit [3, 5]. II est donc important de disposer d'une technique fiable de do~age des folates intra~rythrocytaires. Dans ce but, une m6thode non isotopique par immunofluoro-enzymologie, automatis~e sur Stratus (Baxter) a-6t6 6valu~e, en comparaison avec une m6thode radio-immunologique : Magic No Boil Ciba Corning. Les performances analytiques de la trousse Stratus ont ~t~ ~tudi~es pr6c~demment [1,2].
L'acide folique, ou vitamine B9 ou acide pt~roylglutamique PGA, est present dans les cellules sous forme d'acide t6trahydrofolique THF. Seton ie radical monocarbon6 transport6 par le THF, on distingue diff6rents d~riv~s, parmi lesquels il faut surtout retenir le N5 m6thyl THF, qui est la forme circulante active, et le 5 formyl THF ou acide folinique, qui intervient dans la synth~se des neurotransmetteurs, dopamine, noradr~naline, s~rotonine, et qui, utilis6 en th6rapeutique, se transforme en acide folique. Dans la plupart des syst~mes d'immunodosages, et particuli~rement le Stratus, la compe~tition va se faire entre la forme circulante &'doser, N5 m6thyl THF et du PGA marqu6, vis-&vis d'~ne globuline de lait de vache. Le calibrant utilis~ est du PGA, plus stable que le m6thyl THF. Materiel et m~tl~odes Quatre-vingt-six ~chantillons de sang total pr61ev# sur EDTA ont ~t~ doses simultan~ment par la technique Stratus et par la technique RIA Magic No Boil. Description de la m ~ t h o d e Stratus Baxter
La prerni~re ~tape de la r~action est une r~duction par du dithiothr~itol, D'I-I', qui transforme toutes les formes de folates de I'~chantillon et de I'~talon en une forme r~duite stable9 L'~chantillon et le D'IT sont transforms dans le deuxi6me trou de la cupule Stratus. Cette
300
MJ Bugugnani, F Bleton
etape dure 30 min. Le folate reduit est ensuite extrait : c'est I'etape de la denaturation alcaline, qui dure egalement 30 min. Dans la 3 e 6tape, I'echantillon denatur6 est neutralise avant d'etre depose sur la tablette Stratus en fibre de verre. La neutralisation assure le meilleur equilibre d'affinit6 de fixation entre les folates sous .forme de N5 methyl THF de I'echantillon ou sous foeme de PGA de 1'6talon vis-&-vis de la prot6ine de lait de vache (FBP) fixee sur la tablette par I'interm6diaire d'anticorp.s monoclonaux anti-FBP. La reaction se poursuit par addition de PGA marque & la phosphatase alcaline, puis de phosphate de m6thylumbelTiferone, selon le principe de I'elution radiale et on mesure le d6veloppement de la fluorescence. Le Ier resultat est obtenu en 68 min, et un plateau entier de 30 echantillons en 90 min.
Description de la m#thode RIA Magic No Boil Ciba Coming Le folate des echantillons & doser est melange 9. des quantites constantes de 1251 folates. Le melange est incub6"15 min & temperature ambiante. Puis la liaison du folate aux proteines endogenes est d6naturee par de la soude & pH 12-13 pendant 15 rain. On ajoute une quantit6 Iimitee de proteines Nantes des folates puffflees & partir de lait de vache, liees de fa?on covalente & des particules paramagnetiques. Awes une periode d'incubation de 1 heure, ~ separation entre la radioactivite lice et la radioactivit6 libre se fait par attraction magn6tique puis decantation sur surnageant. Au total, on obtient les r6sultats de 30 echantillons en 150 min.
0,47 ng/ml, a v e c un coefficient de variation de 8,68%.
Difference entre les h#molysats frais et congel#s II n'a pas 6t6 o b s e r v 6 de d i f f 6 r e n c e , d a n s les d e u x m 6 t h o d e s , p o u r le d o s a g e e f f e c t u 6 sur h 6 m o l y s a t frais ou c o n s e r v 6 au c o n g 6 1 a t e u r & -20~
Comparaison de la m6thode Stratus la m#thode RIA La comparaison entre les d e u x m~thodes montre une b o n n e corr61ation : la droite d ' a l l o m 6 t r i e a c o m m e ~quation (fig 1) : y = 1,26x - 93 avec un
""~DI~OITE Ds
DOIHI)RES P,ECTf~NGL.E~--
/
I ~ ""
9
'
Preparation des h#molysats 9 Pour le dosage RIA /&. 100 pl de sang total prelev6 sur EDTA, sur lequel on a determine I'hematocrite, on ajoute 2 ml d'une solution d'acide ascorbique A 0,2% fra?chement pr6paree. On melange par retournements et on laisse I'h6molysat reposer 90 min & temp6rature ambiante et & I'abri de la lumiere. Puis, on effectue le dosage sur I'h6molysat avec le protocole normal. Le resultat en ng/ml est multipli6 par 21 pour tenir compte de la dilution et divise par I'h6matocrite.
i
,
Ec]w~]l~:
,
~• =
I
I(~E~
,
,
~
,
=
,
l
I~N~
Fig 1. Correlation des deux m~thodes (y = technique Stratus, x = technique Ciba Coming RIA Magic No Boil). 0 & I'origine : -93,14072 ; pente : 1,26404 ; effectif : 86.
IqEI'I4ODE DE L ' E L L I I ~ E
9 Pour le dosage Stratus A 100 pl de sang total, on ajoute 1 ml de solution d'acide ascorbique & 0,4% fraTchement pr6par~e. On m~lange par retournements et on laisse I'hemolysat reposer pendant 90 rain & temperature ambiante & I'abri de la lumiere. Apres incubation, on melange 200 pl d'hemolysat & 200 IJI d'un diluant prot6ique contenant de la serum albumine bovine exempte de relate. Le r6sultat est multiplie par 22 et divis6 par I'hematocrite.
Traitement statistique Les r6sultats des deux m6thodes ont 6t6 compares en utilisant le Io(liciel Compeval [4].
Rdsultats
R#p~tabilit# cle la m#thode Stratus La r6p6tabilit6 de I'analyse au Stratus c a l c u l 6 e par le dosage de 20 dilutions du m~me h6molysat est, en r 6 s u l t a t b r u t a v a n t c a l c u l , d e 5 , 3 5 _+
Ec]~lle~:
6x =
10
&j =
.BI
Fig 2. C o r r e l a t i o n d e s d e u x t e c h n i q u e s e x p r i m 6 e p a r la m6thode de I'ellipse. L'ellipse de confiance & 5,00% est centr~e sur le p o i n t : 0o t h ~ o r i q u e : 0,0000 ; Pe t h ~ o r i q u e : 1,0000. L ' o b s e r v a t i o n de c o o r d o n n ~ e s : 0o o b s e r v 6 e : 39,1108 ; Pe observ~e : 1,1027 n'en diff~re pas statistiquement.
Technique immunofluoro-enzymologique Stratus
301
coefficient de correlation r = 0,872. La comparaison par la methode de i'ellipse (fig 2), au risque de 5% montre que les deux techniques utilisees ne different pas statistiquement. Comparaison diluant Stratus/diluant BioRad
.
.
.
.
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.
f
T,c]~ellcs; 6x =
.
.
1
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~j =
,
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.
1
Fig ;3. Corr61ation des deux techniques Stratus : y = m~thode Stratus utilisant un diluant Stratus, x = m~thode Stratus utilis a n t un d i l u a n t BioRado 0 & I ' o r i g i n e : 2 , 0 0 4 4 9 ; p e n t e : 0,51458 ; effectif : 25.
Tableau I. Comparaison diluant Stratus/diluant Biorad. Folates ~rythrocytaires. R6sultats bruts Stratus (ng/ml) avant le calcul tenant compte du facteur de dilution et de I'h~matocrite. 'w
Diluant Stratus
Diluant Bio-Rad ~ > Pr#cipit~
11 9,9 7,1 7,4 10,9 9,4 18,6 9,1 6,7 8,1 6,3 12,1 7,9 14 5,9 5,8 6,5 7,1 9,9 7,9 6,3 6,3 7,4 18,2 7
17,7 17,4 12,2 10,7 14,9 13,8 > 22 15,3 8,6 11,1 8,3 18,7 12,4 20,9 8,5 8,3 9,6 11,6 17,1 12 8,9 10,6 9,8 > 22,6 9,8
Nous avons compare deux series sur I'automate Stratus. L'une utilisait un diluant proteique Stratus. L'autre serie utilisait un diluant prot~ique BioRad. Les resultats obtenus pour ces deux s~ries sont rassembles dans le tableau I. Ils montrent qu'avec le diluant BioRad, on obtient I'apparition d'un p r e c i p i t e et une majoration des concentrations de folates erythrocytaires. La concentration mesuree sur le surnageant apr~s centrifugation reste plus 6levee. La comparaison entre les deux series donne une droite d'allometrie ayant comme equation : y = 0,51x + 2,00 (fig 3). Discussion et
conclusion
Les resultats mettent en evidence I'importance de la nature du diluant proteique utilise pour traiter I'hemolysat. L'utilisation du diluant Stratus evite I'apparition d'un precipite Iors du traitement de I'hemolysat et d'autre part ameliore la correlation entre la technique immunofluoro-enzymatique et radioisotopique. II faut noter que la conservation de I'hemolysat & -20~ n'affecte en rien la qualite du dosage quelle que soit la methode utilisee. Les essais de repetabilite concernant la technique Stratus aboutissent & un CV de 8,68%. En conclusion, la technique immunofluoroenzymatique Stratus pour le dosage des folates intra-erythrocytaires est precise et donne des resultats bien correles avec la technique radioimmunologique utilisee. Elle presente I'avantage d'6tre entierement automatis6e.
R~.f~rences 1
Bugugnani MJ (1993) Evaluation of a new non isotopic assay for folate using the Stratus. In: Euroimrnunoanalyse 93, Lyon, 3-5 f~vrier 1993 (communication - poster)
2
Bugugnani MJ (19~3) Dosages de vitamine B12 et de folates sur Stratus. Abstracts of the Baxter Diagnostics Scientific Days9 eruxelles, 13-14 mai 1993
3
Hoffbrand AV, Newcornbe BFA, Mollin DL (1966) Method of 9 assay of red ceil folate activity and the value of the assay as a test for felate deficiency. J C/in Patho/19, 17
4
Morin JF, Goclet JP, M o i n e a u MP, Morin PP (1990) Comparaison de techniques de dosage : le Iogiciel COMPAR. Immunoana/Bio/Sp~c 23, 37-44
5
Rain JD (1992) Int~r~t en h6matologie du dosage des cobalamines et des folates. ImnmunoanalBio/Sp~c 32, 17-24
299
9 Elsevier, Paris
Techniques au quotidien
Dosage des folates intra6rythrocytaires : valuation de la t:echnique immunofluoro-enzymologique Stratus MJ Bugugnani, F Bleton Laboratoire de biochimie, centre hospitalier, 78105 Saint-Germain-en-Laye Cedex, France
(Res le 3 juin 1994 ; accept~ le 21 juillet 1994)
R~sum6 -- Une techniqueimmunofluoro-enzyrnatiquea ~t~ ~valu~epour la d~terminati0ndes folates intra~rythrocytairessur rautomate Stratus 2 Baxter. Cette ~tudea comport6 des essaisde reproductibilit~(CV = 8,68%) et de correlationavec une m~thoderadioimmunologique Ciba Coming RIA Magic No Boil. La correlationest satisfaisante: y = 1,26x- 93 (r = 0,872)d~montrantainsi la va[idit~de la technique Stratus. folate / ~rythrocyte / immunofluoro-enzymologie 9
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Summary ~ Red-cell folate act=wty:evaluatmnof the Stratus immunofluoroenzymologicassay. An immunof/uoroenzymaticassay was evaluated for determination of red-cell folate activity on Stratus 2 Baxter analyser. This study included reproducibility assays (CV = 8.68%) and correlation with a radio-immunologic method Magic no boil Ciba Coming. The correlation was adequate: y = 1.26x- 93 (r = 0.872), proving the validity of Stratus.
folate / red cell / immunofluoroenzymology
Introduction L'~valuation du statut en folates de I'organisme est r~alis6e gr&ce au dosage des folates s6riques et ~rythrocytaires. Les folates s~riques sont une image instantan~e de la balance vitaminique au m o m e n t du pr~levement. IIs sont sujets & des variations rapides li~es au r~gime alimentaire, & I'ingestion d'alcool, & la prise de certains m6dicaments. Les folates ~rythrocytaires, compte tenu du renouvellement lent de la masse globulaire, c o n s t i t u e n t un meilleur reflet des r6serves en c e t t e v i t a m i n e , p a r t i c u l i ~ r e m e n t des r~serves h6patiques. La concentration est & des niveaux 20 & 30 f o i s s u p 6 r i e u r s & c e l l e d e s f o l a t e s s~riques. Ainsi la d~pl6tion folique vraie correspond & une baisse des r~serves attest6e par une baisse des folates 6rythrocytaires en dessous de 160 ng de folates par ml d ' ~ r y t h r o c y t e s . Elle apparaTt apr~s 4 & 5 mois de d6ficit [3, 5]. II est donc important de disposer d'une technique fiable de do~age des folates intra~rythrocytaires. Dans ce but, une m6thode non isotopique par immunofluoro-enzymologie, automatis~e sur Stratus (Baxter) a-6t6 6valu~e, en comparaison avec une m6thode radio-immunologique : Magic No Boil Ciba Corning. Les performances analytiques de la trousse Stratus ont ~t~ ~tudi~es pr6c~demment [1,2].
L'acide folique, ou vitamine B9 ou acide pt~roylglutamique PGA, est present dans les cellules sous forme d'acide t6trahydrofolique THF. Seton ie radical monocarbon6 transport6 par le THF, on distingue diff6rents d~riv~s, parmi lesquels il faut surtout retenir le N5 m6thyl THF, qui est la forme circulante active, et le 5 formyl THF ou acide folinique, qui intervient dans la synth~se des neurotransmetteurs, dopamine, noradr~naline, s~rotonine, et qui, utilis6 en th6rapeutique, se transforme en acide folique. Dans la plupart des syst~mes d'immunodosages, et particuli~rement le Stratus, la compe~tition va se faire entre la forme circulante &'doser, N5 m6thyl THF et du PGA marqu6, vis-&vis d'~ne globuline de lait de vache. Le calibrant utilis~ est du PGA, plus stable que le m6thyl THF. Materiel et m~tl~odes Quatre-vingt-six ~chantillons de sang total pr61ev# sur EDTA ont ~t~ doses simultan~ment par la technique Stratus et par la technique RIA Magic No Boil. Description de la m ~ t h o d e Stratus Baxter
La prerni~re ~tape de la r~action est une r~duction par du dithiothr~itol, D'I-I', qui transforme toutes les formes de folates de I'~chantillon et de I'~talon en une forme r~duite stable9 L'~chantillon et le D'IT sont transforms dans le deuxi6me trou de la cupule Stratus. Cette
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MJ Bugugnani, F Bleton
etape dure 30 min. Le folate reduit est ensuite extrait : c'est I'etape de la denaturation alcaline, qui dure egalement 30 min. Dans la 3 e 6tape, I'echantillon denatur6 est neutralise avant d'etre depose sur la tablette Stratus en fibre de verre. La neutralisation assure le meilleur equilibre d'affinit6 de fixation entre les folates sous .forme de N5 methyl THF de I'echantillon ou sous foeme de PGA de 1'6talon vis-&-vis de la prot6ine de lait de vache (FBP) fixee sur la tablette par I'interm6diaire d'anticorp.s monoclonaux anti-FBP. La reaction se poursuit par addition de PGA marque & la phosphatase alcaline, puis de phosphate de m6thylumbelTiferone, selon le principe de I'elution radiale et on mesure le d6veloppement de la fluorescence. Le Ier resultat est obtenu en 68 min, et un plateau entier de 30 echantillons en 90 min.
Description de la m#thode RIA Magic No Boil Ciba Coming Le folate des echantillons & doser est melange 9. des quantites constantes de 1251 folates. Le melange est incub6"15 min & temperature ambiante. Puis la liaison du folate aux proteines endogenes est d6naturee par de la soude & pH 12-13 pendant 15 rain. On ajoute une quantit6 Iimitee de proteines Nantes des folates puffflees & partir de lait de vache, liees de fa?on covalente & des particules paramagnetiques. Awes une periode d'incubation de 1 heure, ~ separation entre la radioactivite lice et la radioactivit6 libre se fait par attraction magn6tique puis decantation sur surnageant. Au total, on obtient les r6sultats de 30 echantillons en 150 min.
0,47 ng/ml, a v e c un coefficient de variation de 8,68%.
Difference entre les h#molysats frais et congel#s II n'a pas 6t6 o b s e r v 6 de d i f f 6 r e n c e , d a n s les d e u x m 6 t h o d e s , p o u r le d o s a g e e f f e c t u 6 sur h 6 m o l y s a t frais ou c o n s e r v 6 au c o n g 6 1 a t e u r & -20~
Comparaison de la m6thode Stratus la m#thode RIA La comparaison entre les d e u x m~thodes montre une b o n n e corr61ation : la droite d ' a l l o m 6 t r i e a c o m m e ~quation (fig 1) : y = 1,26x - 93 avec un
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DOIHI)RES P,ECTf~NGL.E~--
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Preparation des h#molysats 9 Pour le dosage RIA /&. 100 pl de sang total prelev6 sur EDTA, sur lequel on a determine I'hematocrite, on ajoute 2 ml d'une solution d'acide ascorbique A 0,2% fra?chement pr6paree. On melange par retournements et on laisse I'h6molysat reposer 90 min & temp6rature ambiante et & I'abri de la lumiere. Puis, on effectue le dosage sur I'h6molysat avec le protocole normal. Le resultat en ng/ml est multipli6 par 21 pour tenir compte de la dilution et divise par I'h6matocrite.
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Ec]w~]l~:
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I~N~
Fig 1. Correlation des deux m~thodes (y = technique Stratus, x = technique Ciba Coming RIA Magic No Boil). 0 & I'origine : -93,14072 ; pente : 1,26404 ; effectif : 86.
IqEI'I4ODE DE L ' E L L I I ~ E
9 Pour le dosage Stratus A 100 pl de sang total, on ajoute 1 ml de solution d'acide ascorbique & 0,4% fraTchement pr6par~e. On m~lange par retournements et on laisse I'hemolysat reposer pendant 90 rain & temperature ambiante & I'abri de la lumiere. Apres incubation, on melange 200 pl d'hemolysat & 200 IJI d'un diluant prot6ique contenant de la serum albumine bovine exempte de relate. Le r6sultat est multiplie par 22 et divis6 par I'hematocrite.
Traitement statistique Les r6sultats des deux m6thodes ont 6t6 compares en utilisant le Io(liciel Compeval [4].
Rdsultats
R#p~tabilit# cle la m#thode Stratus La r6p6tabilit6 de I'analyse au Stratus c a l c u l 6 e par le dosage de 20 dilutions du m~me h6molysat est, en r 6 s u l t a t b r u t a v a n t c a l c u l , d e 5 , 3 5 _+
Ec]~lle~:
6x =
10
&j =
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Fig 2. C o r r e l a t i o n d e s d e u x t e c h n i q u e s e x p r i m 6 e p a r la m6thode de I'ellipse. L'ellipse de confiance & 5,00% est centr~e sur le p o i n t : 0o t h ~ o r i q u e : 0,0000 ; Pe t h ~ o r i q u e : 1,0000. L ' o b s e r v a t i o n de c o o r d o n n ~ e s : 0o o b s e r v 6 e : 39,1108 ; Pe observ~e : 1,1027 n'en diff~re pas statistiquement.
Technique immunofluoro-enzymologique Stratus
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coefficient de correlation r = 0,872. La comparaison par la methode de i'ellipse (fig 2), au risque de 5% montre que les deux techniques utilisees ne different pas statistiquement. Comparaison diluant Stratus/diluant BioRad
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T,c]~ellcs; 6x =
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~j =
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Fig ;3. Corr61ation des deux techniques Stratus : y = m~thode Stratus utilisant un diluant Stratus, x = m~thode Stratus utilis a n t un d i l u a n t BioRado 0 & I ' o r i g i n e : 2 , 0 0 4 4 9 ; p e n t e : 0,51458 ; effectif : 25.
Tableau I. Comparaison diluant Stratus/diluant Biorad. Folates ~rythrocytaires. R6sultats bruts Stratus (ng/ml) avant le calcul tenant compte du facteur de dilution et de I'h~matocrite. 'w
Diluant Stratus
Diluant Bio-Rad ~ > Pr#cipit~
11 9,9 7,1 7,4 10,9 9,4 18,6 9,1 6,7 8,1 6,3 12,1 7,9 14 5,9 5,8 6,5 7,1 9,9 7,9 6,3 6,3 7,4 18,2 7
17,7 17,4 12,2 10,7 14,9 13,8 > 22 15,3 8,6 11,1 8,3 18,7 12,4 20,9 8,5 8,3 9,6 11,6 17,1 12 8,9 10,6 9,8 > 22,6 9,8
Nous avons compare deux series sur I'automate Stratus. L'une utilisait un diluant proteique Stratus. L'autre serie utilisait un diluant prot~ique BioRad. Les resultats obtenus pour ces deux s~ries sont rassembles dans le tableau I. Ils montrent qu'avec le diluant BioRad, on obtient I'apparition d'un p r e c i p i t e et une majoration des concentrations de folates erythrocytaires. La concentration mesuree sur le surnageant apr~s centrifugation reste plus 6levee. La comparaison entre les deux series donne une droite d'allometrie ayant comme equation : y = 0,51x + 2,00 (fig 3). Discussion et
conclusion
Les resultats mettent en evidence I'importance de la nature du diluant proteique utilise pour traiter I'hemolysat. L'utilisation du diluant Stratus evite I'apparition d'un precipite Iors du traitement de I'hemolysat et d'autre part ameliore la correlation entre la technique immunofluoro-enzymatique et radioisotopique. II faut noter que la conservation de I'hemolysat & -20~ n'affecte en rien la qualite du dosage quelle que soit la methode utilisee. Les essais de repetabilite concernant la technique Stratus aboutissent & un CV de 8,68%. En conclusion, la technique immunofluoroenzymatique Stratus pour le dosage des folates intra-erythrocytaires est precise et donne des resultats bien correles avec la technique radioimmunologique utilisee. Elle presente I'avantage d'6tre entierement automatis6e.
R~.f~rences 1
Bugugnani MJ (1993) Evaluation of a new non isotopic assay for folate using the Stratus. In: Euroimrnunoanalyse 93, Lyon, 3-5 f~vrier 1993 (communication - poster)
2
Bugugnani MJ (19~3) Dosages de vitamine B12 et de folates sur Stratus. Abstracts of the Baxter Diagnostics Scientific Days9 eruxelles, 13-14 mai 1993
3
Hoffbrand AV, Newcornbe BFA, Mollin DL (1966) Method of 9 assay of red ceil folate activity and the value of the assay as a test for felate deficiency. J C/in Patho/19, 17
4
Morin JF, Goclet JP, M o i n e a u MP, Morin PP (1990) Comparaison de techniques de dosage : le Iogiciel COMPAR. Immunoana/Bio/Sp~c 23, 37-44
5
Rain JD (1992) Int~r~t en h6matologie du dosage des cobalamines et des folates. ImnmunoanalBio/Sp~c 32, 17-24