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Le polymorphisme du facteur B de la properdine (C3PA, GBG, Bf) et la liaison histocompatibilité · complément
Revue Fran~aise de Transfusion et Immuno-h6matologie Tome XIX. - - N ° 3. - - 1976
471
A CTUALITES
Le polymorphisme du factcur B de la properdine (C3PA, GBG, Bf) et la liaison histocompatibilitd- compMment. p a r G. H A U P T M A N N , M.M. T O N G I O
et S. M A Y E R I n s t i t u t d'Hdmatologie, C.H.U. et Centre de T r a n s f u s i o n Sanguine, STRASBOURG.
Le f a c t e u r B de la p r o p e r d i n e (B o u Bf), d 6 c o u v e r t p a r PILLEMER et coll. e n 1959 [4], e n c o r e a p p e l 6 C3 P r o a c t i v a t e u r (C3PA) o u ,~ g l y c i n - r i c h - b e t a - g l y c o p r o t e i n ,, ( G B G ) est l ' u n des c o n s t i t u a n t s p r i n cipaux de la voie a l t e r n e d ' a c t i v a t i o n de C3. C'est u n e b 6 t a - g l o b u l i n e , t h e r m o l a b i l e , r i c h e e n s u c r e s , de c o n s t a n t e de s d d i m e n t a t i o n 5 S, de poids m o l 6 c u l a i r e 93.000 d a l t o n , f 0 r m 6 e d ' u n e seule c h a i n e p o l y p e p t i d i q u e [13]. Au c o u r s de la raise e n j e u de la voie a l t e r n e , le f a c t e u r B de la p r o p e r d i n e est clivd e n d e u x f r a g m e n t s : u n f r a g m e n t p r i n c i p a l , de p o i d s m o l d c u l a i r e 63.000 d a l t o n , c o n s t a n t e de s d d i m e n t a t i o n 3 S,
Manuscrit regu le 28-10-1975. N o m e n c l a t u r e et a b r d v i a t i o n s utilisd e s d a n s le t e x t e :
MHC: complexe majeur d'histocompatibilit& SD-I: premier locus HL-A; SD-2: deuxi~me locus HL-A; SD-3: troisi~me locus HL-A; LD-I: locus principal de culture mixte de lymphocytes (MLC); PGM-3 : locus de la phosphoglucomutase 3 ; Chido : locus du groupe 6rythrocytairr Chido.
472
HAUPTMANN
G.
et coll.
mobilit6 61ectrophor6tique g a m m a et un f r a g m e n t plus petit de mobilit6 61ectrophor6tique alpha. Le f r a g m e n t principal a la propri6t6 de cliver la mol6cule de C3 ( c o m m e la C3 convertase dans la voie classique) et on le d6signe sous le n o m de facteur B activ6 (B) ou C3 Activateur (C3A) ou ,~ glycin-rich-gamma-glycoprotein,, (GGG) ou encore b~ta-2-glycoprot6ine II, n o m donn6 initialement cette prot6ine avant son identification c o m m e un constituant du syst6me du c o m p l 6 m e n t [15]. Le p o l y m o r p h i s m e du facteur B a 6t6 d6crit en 1972 par ALPER et coll. [3]. Ce p o l y m o r p h i s m e est mis en 6vidence p a r 61ectrophor6se prolong6e sous haut voltage en agarose suivie d ' u n proc6d6 ~d'immunofixation ,, qui consiste ~t fixer et r6v61er les bandes de la prot6ine dans le gel par un i m m u n - s 6 r u m sp6cifique anti-Bf. I1 s'agit d'un syst6me g6n6tique ~t un seul locus a u t o s o m i q u e occup6 p a r deux all61es principaux S (slow) et F (fast) s'exprimant en simple dose et d 6 t e r m i n a n t les ph6notypes c o u r a n t s SS, SF et FF. fl existe deux all61es rares S1 et F1 qui sont h l'origine des ph6notypes plus rares SIS, S1F, SF1, FF1. La liaison H L - A - B f a 6t6 signal6e p o u r la premi6re fois en 1974 p a r ALLEn [1] et confirm6e en 1975 par RITTNER et coll. (22) et TEISBERG et coll. [25]. ALLEN a constat6 une liaison 6troite entre les groupes HL-A et Bf en 6tudiant 12 familles informatives avec 44 enfants et n'a trouv6 a u c u n cas de recombinaison. Appliquant la m 6 t h o d e des ~ lod scores ~ il arrive h u n total de 10 ce qui donne une probabilit6 de 101° p o u r 1 en faveur d'une liaison g6n6tique entre les deux syst6mes. TEISBERG et coll. [25] trouvent 6galement une liaison 6troite sans a u c u n cas de r e c o m b i n a i s o n entre Bf et HL-A dans 23 families avec 90 enfants. Mais, dans trois autres families, ces a u t e u r s d6couvrent des recombinaisons entre Bf et le premier locus HL-A (SD-1) qui sont aussi des r e c o m b i n a i s o n s entre SD-1 et SD-2 (2 e locus HL-A) ce qui leur p e r m e t de situer le locus Bf proximit6 de SD-2. RITTNER et coll. [22] c o n f i r m e n t la liaison 6troite entre HL-A et Bf (~ lod score ,, de 10,608) tout en observant 5 cas de r e c o m b i n a i s o n entre HL-A et Bf sur u n total de 82 enfants issus de 21 familles informatives. Ils estiment donc que la fr6quence de r e c o m b i n a i s o n entre HL-A et B f e s t de 6 , 1 % . Dans deux families informatives, une r e c o m b i n a i s o n s'est p r o d u i t e entre le complexe SD-1/SD-2 et le locus Bf ce qui p e r m e t de situer ce dernier h l'ext6rieur de SD-1/SD~2. Dans trois families, une r e c o m b i n a i s o n s'est
FACTEUR B DE LA PROPERD1NE
473
produite quelque p a r t e n t r e SD-1 et MLC (soit entre SD-1 et SD-2, soit entre SD-2 et MLC p u i s q u e les m a r e s ~ l'origine du c h r o m o s o m e r e c o m b i n a n t sont h o m o z y g o t e s p o u r SD-2) : dans ces r e c o m b i n a i s o n s , l'allale Bf est restd lid au locus MLC de sorte que les a u t e u r s situent le locus Bf ~ c6td de MLC (LD-1) m a i s entre LD-1 et le locus de la p h o s p h o g l u c o m u t a s e 3 (PGM-3) c o m p t e tenu du fait que la frdquence de r e c o m b i n a i s o n entre HL-A et B f a 6td estimde h 6 , 1 % . R d c e m m e n t , l'dtonnante liaison gdndtique e n t r e les syst6mes d'histocompatibilitd et du c o m p l d m e n t s'est prdcisde p a r la ddcouverte d'une liaison entre le complexe d'histocompatibilitd et C2, dtablie grfice g l'dtude de plusieurs families avec ddficit en C2 [5, 10, 11, 12] et d'une liaison avec C4 dtablie grftce ~t l'dtude d'un cas de ddficit en C4 ddcouvert h S t r a s b o u r g [16, 23]. Fu et coll. [11] ont constatd, darts une famille avec ddficit en C2, que le gane ddficient en C2 sdgrdgeait d t r o i t e m e n t avec l ' h a p l o t y p e particulier HL-A 10, W18, le sujet a y a n t un ddficit c o m p l e t en C2 dtant h o m o z y g o t e p o u r HL-A 10, W18. Les sujets a y a n t u n ddficit partiel en C2 poss6dent t o u s l e s antiganes HL-A 10, W18 alors que les sujets n o r m a u x p o s s a d e n t d ' a u t r e s antiganes HL-A. Dans plusieurs autres familles dtudides depuis, le ddficit en C2 a dtd trouvd associd aux h a p l o t y p e s HL-A s u i v a n t s : HL-A 10, W18 ou HL-A2, W18 ou HL-A 2, 4A2 * [5]. Finalement, une dtude plus c o m p l a t e de ces families a rdvdl6 que le locus C2 est tras d t r o i t e m e n t lid au locus MLC principal (LD-1) et h une spdcificitd MLC bien pr6cise, en l'occurence 7a (LD-7a ou S ou Pi). Les individus p r d s e n t a n t u n ddficit c o m p l e t en C2 dans diffdrentes familles ont dtd tronv6s h o m o z y g o t e s LD-7a et les individus hdtdrozygotes p o u r le ddficit en C2 p o s s a d e n t tous la spdcificitd LD-7a. Le locus C2 serait situd h c6td de LD-1, e n t r e LD-1 et PGM-3 [12]. L'dtude gdndtique du cas de ddficit en C4 trouvd h S t r a s b o u r g [16] a p e r m i s de m o n t r e r que les ganes contr61ant la synthase de la fraction C4 du c o m p l d m e n t sont dgalement lids au complexe m a j e u r d'histocompatibilitd chez l ' h o m m e [23]. E n effet, le p r o p o s i t u s , prdsentant u n d~ficit c o m p l e t en C4, est h o m o z y g o t e p o u r HL-A 2, T3, W10, dgalement h o m o z y g o t e en MLC (avec une nouvelle spdcificitd p r o v i s o i r e m e n t d d n o m m d e (, Re ,,) ainsi q u e p o u r les a u t r e s m a r queurs du c h r o m o s o m e n ° 6 : Bf (SS) et PGM-3 (1-1). Dans la famille, trois m e m b r e s p r d s e n t a n t un ddficit partiel en C4 (la m a r e , l'oncle m a t e r n e l et le grand-pare m a t e r n e l ) p o s s a d e n t l ' h a p l o t y p e HL-A2,
474
HAUPTMANN
G. et coll.
T3, Wl0, LD-1 ~ Re,>, B f S , PGM3-1 auquel se trouve lid u n g~ne ddficient en C4. La m ~ r e du p r o p o s i t u s dtait figde de 15 ans lors de la naissance et le p~re serait u n p r o c h e p a r e n t du grand-p6re m a t e r n e l ou le grand-pbre lui-m~me (qui n ' a p a s p u ~tre exclu sur 21 m a r q u e u r s gdndtiques diffdrents). I1 y a donc une consanguinitd certaine mais la liaison e n t r e HL-A et C4 p e u t ~tre affirmde du fait que la mere, aprbs son mariage, a donn6 naissance ~t deux a u t r e s enfants auxquels elle n ' a t r a n s m i s n i l e ddficit en C4 ni l ' h a p l o t y p e HL-A 2, T3, W10. La liaison HL-A-C4 est h p r d s e n t confirmde p a r l ' d t u d e d'une deuxidme famille avec ddficit en C4 trouvde aux U.S.A. (R. CLARK, Seattle U.S.A., c o m m u n i c a t i o n personnelle). P o u r d ' a u t r e s c o m p o s a n t s du c o m p l d m e n t , C l r [6], C6 [19] et l'inhibiteur de la Cl-estdrase [21] il n ' y a pas de liaison gdndtique avec le c o m p l e x e d ' h i s t o c o m p a t i b i l i t 6 chez l ' h o m m e . I1 faut signaler que la liaison h i s t o c o m p a t i b i l i t d - c o m p l 6 m e n t a dtd d ' a b o r d trouvde chez la souris [7, 18]. E n effet, la rdgion S du complexe H2 contr61e le t a u x de c o m p l d m e n t h d m o l y t i q u e du sdrum de souris et celui de la protdine Ss qui est u n c o n s t i t u a n t essentiel du syst~me du c o m p M m e n t de la souris [14], en fait la fraction C4 [19, 20]. Chez le cobaye, l'6tude de souches ddficientes en C4 a p e r m i s d'dtablir, c o m m e chez l ' h o m m e , une liaison e n t r e C4 et le complexe m a j e u r d'histocompatibilit6 [ 9 ] . Nous p r d s e n t o n s ici la t e c h n i q u e du g r o u p a g e Bf, les rdsultats du g r o u p a g e effectud darts une p o p u l a t i o n de la rdgion de S t r a s b o u r g et donnons quelques prdcisions q u a n t h la situation du locus Bf an sein du complexe d ' h i s t o c o m p a t i b i l i t d chez l ' h o m m e .
MATERIEL ET M E T H O D E S PRI~L~VEMENTS : Le g r o u p a g e Bf est effectual sur le s d r u m : du sang veineux est prdlevd sur u n t u b e stdrile ne c o n t e n a n t p a s d ' a n t i c o a g u l a n t et aprbs coagulation et rdtracfion du caillot, le s 6 r u m est sdpar6 p a r centrifugation et congeld h - - 2 0 ° C . MATI~RIEL ET RI~ACTIFS: appareil d'dlectrophor~se ( d q u i p e m e n t UGI 30 DESAGA, Heidelberg, R.F.A.) ;
FACTEUR B DE LA PROPERD1NE
475
- - p l a q u e s de verre de 20 × 20 cm (plaques de verre utilisdes p o u r la c h r o m a t o g r a p h i e en couche mince) ; il s'agit de t a m p o n s barbital-lactate de calcium pr6conis6s p a r TEISBER6 p o u r l'6tude du p o l y m o r p h i s m e de C3 [24].
--tampons:
- - agarose (Lab. SERVA) ; - - i m m u n - s 6 r u m anti-Bf: nous avons utilis4 un i m m u n - s 6 r u m pr6par6 p a r C.A. ALPER (Boston, U.S.A.). MODE 0Pt~RATOIRE :
Le groupage Bf est effectu6 en deux t e m p s : - - d'abord, 61ectrophor6se prolong6e sous h a u t voltage en agarose d'apr6s TEISBERG [24] ; --
ensuite, ~, i m m u n o f i x a t i o n ,, d'apr~s ALPER et coll. [2].
Les plaques de verre de 20 × 20 c m sont rev6tues de 60 ml d'agarose ~t 1 % . Apr6s refroidissement, on d6coupe sur une ligne environ 4 cm du b o r d (FIG. 1) 16 h 18 puits de 8 × 1 m m (emportep i b c e APELAB, Bagneux). Les puits sont remplis avec le s6rum dilu6 1/4 dans de l'agarose h 1 % m a i n t e n u e liquide h + 42°C. L'61ectrophorbse est ensuite r6alis6e h 20 V / c m p e n d a n t 3 heures. Les ponts entre le
+
~2
!. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
1
FIG. 1 . - Schdma de r6alisation d'une plaque de groupage Bf. 1 : ligne de ddp6t des dchantillons de s 4 r u m ; 2 : zone de migration des bandes Bf. Partie hachurde : zone d'application de l'immun-
sdrum
anti-Bf.
HAUPTMANN
476
G. et coil.
gel et les cuves sont rdalisds de chaque c6td p a r deux b a n d e s de p a p i e r Schleicher et Schull 2043aMgl. A la fin de l'61ectrophor6se, on dtend sur le gel sur une l a r g e u r de 6 c m en a v a n t de la ligne de ddp6t 1,5 m l d ' i m m u n - s d r u m anti-Bf et les plaques sont placdes dans une c h a m b r e h u m i d e h 37°C p e n d a n t 5 h 6 heures. Les plaques sont ensuite plongdes p e n d a n t 24 h e u r e s dans de l'eau physiologique, puis rincdes ~t l'eau distillde et f i n a l e m e n t sdchdes et colordes au bleu de Coomassie [26].
NOMENCLATURE Une nouvelle n o m e n c l a t u r e p o u r le f a c t e u r B de la P r o p e r d i n e a dtd adoptde au I I Congrbs I n t e r n a t i o n a l d ' I m m u n o l o g i e de Brighton en 1974. Le sigle Bf r e m p l a c e le sigle Gb p r o p o s d initialement p a r Alper (Tabl. I). TABLEAU I N o m e n c l a t u r e des g&nes et types du ~acteur B de la Properdine.
NOUVELLE
ANClENNE Gbnes
Types
G~nes
Types
Gb vl
Gb F 1
B[ rl
B f F1
Gb v
Gb F
B[ r
Bf F
Gb s
Gb S
Bf s
Bf S -
Gb sl
Gb S1
B[ sl
B f S1
RESULTATS INTERPRETATION DES TRACES:
L ' a s p e c t des b a n d e s a dtd ddcrit en ddtail p a r ALPER et coll. [3]. La figure 2 m o n t r e l'aspect des types c o u r a n t s SS, SF et FF. La v a r i a n t e SS est caractdrisde p a r l'existence d ' u n e b a n d e principale en position c a t h o d i q u e entourde de b a n d e s accessoires plus ou moins visibles ; la v a r i a n t e FF p a r une b a n d e principale en position anodique
477
FACTEUR B DE LA PROPERDINE
FIG. 2 . -
FIG. 3 . -
Aspect des ph6notypes courants FF, SS et FS (a) plaque photographi~e par transparence; (b) m6me plaque pos6e sur une feuille blanche.
Aspect
des
phdnotypes
courants
et
rares:
1 = S S , 2 = F F , 3 = F S , 4 = $ 1 S , 5 = $ 1 F , 6 = S F 1 , 7 = FF1, 8 =
SS.
entour~e de bandes accessoires, la variante SF par l'existence de deux b a n d e s p r i n c i p a l e s en p o s i t i o n S e t F avec ~galement des bandes a c c e s s o i r e s . I1 f a u t r i o t e r q u e d a n s la v a r i a n t e SF, l a b a n d e p r i n c i p a l e F e s t s o u v e n t u n p e u p l u s n e t t e q u e la b a n d e S ce q u i p e u t rendre l'interpr~tation d~licate (risque de confondre la variante SF
478
H A U P T M A N N G. et coll.
a v e c F F ) . A u m o i n d r e d o u t e , il f a u t r e f a i r e le g r o u p a g e . L a figure 3 m o n t r e l ' a s p e c t d o n n 6 p a r les v a r i a n t e s p l u s r a r e s S I S , S1F, SF1 e t FF1 d u e s h la p r 6 s e n c e d e l'all61e $1 o u F1. FRI~QUENCES GENIQUES DES ALLELES B f : N o u s a v o n s g r o u p 6 247 i n d i v i d u s n o r m a u x n o n a p p a r e n t 6 s , de r a c e b l a n c h e d e la r 6 g i o n d e S t r a s b o u r g . Les f r d q u e n c e s g 6 n i q u e s c a l c u l 6 e s s o n t d o n n 6 e s d a n s le t a b l e a u n e t c o m p a r 6 e s ~ celles t r o u v 4 e s p a r ALPER e t coll. [3] et RITTNER e t coll. [22]. N o s r 6 s u l t a t s s o n t i n t e r m 6 d i a i r e s e n t r e c e u x t r o u v 4 s p a r ces d e u x a u t e u r s . C o m m e RITTNER et coll., n o u s a v o n s t r o u v 6 l'all~le r a r e F1 c h e z d e s i n d i v i d u s d e r a c e b l a n c h e a l o r s q u e F1 n ' a v a i t 6t6 t r o u v 4 p a r ALPER q u e chez les N o i r s . TABLEAUII Frdquences gdniques des alleles Bf. I
AUTEURS
NOMBRE D'INDIVIDUS TESTI~S
Bf s
Bf F
B fro
BfFI
127 158 86
0,437 0,709 0,890
0,512 0,278 0,110
m
0,051
0,013
RITTNER et coll. (1975) Blanche
82
0,826
0,149
0,012
0,012
Pr6sent travaH Blanche
247
0,757
0,219
0,014
0,010
(race) ALPER et coll. (1972) Noire Blanche Jaune
I
b
LIAISON GI~NI~TIOUE HL-A-Bf : Nous donnons cette liaison :
simplement
deux
exemples
typiques
illustrant
1) FAMILLE GIN... - - I1 s ' a g i t d ' u n ,, d o u b l e b a c k - c r o s s ,, p u i s q u e le p 6 r e e s t h 6 t 6 r o z y g o t e p o u r HL-A et Bf. Les j u m e l l e s 1 e t 2 et l ' e n f a n t 6 o n t h 6 r i t 6 d u p a r e l'all61e B f f a v e c l ' h a p l o t y p e HL-A 2, T4, W5, les a u t r e s e n f a n t s o n t h 6 r i t 6 d e l'all61e Bf s a v e c l ' h a p l o t y p e HL-A W32, T4, W5 (FIG. 4).
479
FACTEUR B DE LA PROPERDINE
[]
©
SF
ss
2 - T4- W5- F
~6-
T4- W5- S
W26- T3- W22- $
W32 - T4- W5- $
4 SF ,: -
T4-
SF W5- F
2 -
W26- T ) - W22- $
W26 -
T4-
SS W5-
T3 " W22 -
5
SS
W32- T 4 -
W5 -
S
W32- T4- W5- S
W32 -
T4 -
W5 -
S
2 -
S
W26-
W5
S
W26 - 1 4 - W 5 -
W26 -
T3 - W22 -
S
W26 -
T4 -
-
4.-
Famille
S
-W5
F
GuY
i
-
WS-
8-
F
-m
FI-•
1
-
W26-
-m
8
-
F 5
W15-
Fl-e S
-
JEAN I NE
JACQUELI NE"
SYLVI E
S FI
F F1
S FI
F F1 13 -
-
s F1
S -A
-
W5 -
T3 - ~2
©
SF 7 -
T4 -
Girc
E]
3
SF
F
FIG.
3 -
6
SS
3
-
7
1
-
8
-
S
-A
-
FI-•
3
-
W5-
F
1
-
8
FI-•
-
-m
3
-
7
-
S
-m
I
-
8
-
FI-•
FIG. 5. - - Famille Bou
2) FAMILLE BOU... - - C'est u n e f a m i l l e p a r t i c u l i 6 r e m e n t i n t 6 r e s s a n t e 6 t u d i 6 e p a r le P r o f e s s e u r DAUSSET: il s'agit d ' u n <, d o u b l e d o u b l e - c r o s s ,, p u i s q u e le p 6 r e et la m 6 r e s o n t d o u b l e h 6 t 6 r o z y g o t e s p o u r HL-A et Bf, d ' a u t r e p a r t , u n des e n f a n t s est i s s u d ' u n e r e c o m b i n a i s o n e n t r e SD-2 et LD-1 ce q u i a p e r m i s de p r 6 c i s e r la s i t u a t i o n
480
HAUPTMANN
G.
et
coll.
du locus Bf sur le c h r o m o s o m e n ° 6 [17]. Tous les enfants ont requ de leur mbre l'all6le rare Bf F1 avec l'haplotype HL-A 1, 8, deux enfants ont requ du p~re l'all6le Bf s avec l'haplotype HL-A 3, 7, les deux autres l'all61eBf F avec l'haplotype HL-A3, W5 (FIG. 5). SITUATION DU LOCUS
Bf SUR LE CHROMOSOME N ° 6 :
Dans la famille B0u .... l'enfant Sylvie a re~u de son p6re un haplotype recombin6 entre SD-2 et LD-1. En effet, Guy et Jacqueline, identiques en HL-A et Bf, sont 6galement identiques en culture mixte de lymphocytes. Sylvie n'est pas identique en culture mixte de
SD-1
chr. 6
~ []
$D-3
t
[]
SD-2
t
[]
BI
, 0
LD-I C2
0,0_ ,
Chida
0
PI3M'3
.'/
0
C4?
*
i ~0,8%
1 :0,4%
r :15%
FIG. 6. - - Carte g6ndtique du c o m p l e x e m a j e u r d ' h i s t o c o m p a t i b i l i t 6 situ6 s u r le c h r o m o s o m e n ° 6.
l y m p h o c y t e s h sa sceur Jeannine qui poss6de les m6mes groupes HL-A et Bf mais elle est identique en MLC h Guy et Jacqueline. Ceci indique q u ' u n e recombinaison paternelle s'est produite entre SD-2 et LD-1 et le locus B f e s t rest~ attach6 au segment de c h r o m o s o m e p o r t a n t les deux loci principaux HL-A. Le locus Bf n'a pas suivi le g6ne LD-1 et ne peut d o n c pas 6tre situ6 h l'ext6rieur de LD-1, entre LD-1 et PGM-3 c o m m e l'ont indiqu6 RITTNER et coll, [22].
DISCUSSION Les travaux d'ALLEN, TEISBERG et RITTNER ont d~montr6 l'existence d ' u n e liaison g~n~tique 6troite entre le complexe m a j e u r d'histocompatibilit6 et le facteur B de la properdine. Nous avons donn6 deux exemples de familles qui illustrent cette liaison° Seule la situation exacte du locus Bf au sein du complexe m a j e u r d!histocompatibilit~ restait h pr6ciser. Grgce h la d6couverte et ~ l'~tude de familles pr~sentant des recombinaisons entre HL-A et MLC il est possible de situer h pr6sent le locus Bf entre SD-2 et LD-1 [17]. RITTNER et coll. [22] avaient observ6 que le locus Bf suivait le g~ne LD-1 dans
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les recombinaisons entre le p r e m i e r locus HL-A et MLC et avaient situ6 le locus Bf h l'ext6rieur de LD-1, entre LD-1 et PGM-3, puisqu'ils avaient trouv6 une fr6quence de recombinaison entre HL-A et Bf de 6,1%. De plus, RITTNER et coll. ont trouv6 des cas de recombinaison entre Bf et SD-2. Darts la famille Bou .... une r e c o m b i n a i s o n s'est produite entre Bf et LD-1 et Bf est rest6 li6 h SD-2. L'ensemble de ces r6sultats p e r m e t doric h pr6sent de situer Bf entre SD-2 et LD-1 puisque des recombinaisons ont 6t6 observdes d'une p a r t entre Bf et SD-2 (par RITTNER et coll.) et d ' a u t r e p a r t entre Bf et LD-1 (famille BotJ). La fr6quence de r e c o m b i n a i s o n de 6 , 1 % entre HL-A et Bf trouv6e par RITTNER et coll. est c e r t a i n e m e n t trop 61ev6e c o m p t e tenu du fait que ALLEN et TEISBERG n ' o n t trouv6 a u c u n cas de recombinaison entre SD-2 et Bf sur un grand h o m b r e de familles 6tudi6es. La signification de l'6tonnante liaison g6n6tique entre certains constituants du syst~me du c o m p l 6 m e n t et le complexe m a j e u r d'histocompatibilit6 reste encore h 6tablir. Cette liaison suscitera probablement des travaux de recherche importants. Les recherches de ces derni~res ann6es ont m o n t r 6 que le syst6me du c o m p l 6 m e n t joue un r61e b e a u c o u p plus i m p o r t a n t q u ' o n ne le pensait darts la r6ponse immunitaire. Le syst6me du c o m p l 6 m e n t n'est pas seulement un syst6me effecteur des anticorps et un m6diateur de rdactions immunologiques humorales. Le comp16ment intervient p r o b a b l e m e n t aussi au niveau cellulaire de la r6ponse i m m u n e ainsi que l'attestent les constatations suivantes [8] : - - l ' e x i s t e n c e de r6cepteurs p o u r C3, C4 et le facteur B h la surface de certains lymphocytes, des m a c r o p h a g e s et m o n o c y t e s ; le fait que n o m b r e d'antig~nes T ind6pendants ainsi que des substances mitog6niques p o u r les B-lymphocytes sont de puissants inducteurs de la vole alterne d'activation de C3 ; -
-
- - le fait que la d6pl6tion de C3 in vivo par le venin de c o b r a entralne exp6rimentalement une diminution de la rdponse anticorps T-d6pendante ; - - le fait que les d6ficits h6rdditaires du c o m p l 6 m e n t chez l ' h o m m e (et particuli6rement les d6ficits p o r t a n t sur les c o m p o s a n t s de la voie classique d'activation de C3) entrainent le plus souvent l'apparition d'affections imrnunologiques (glom6rulon6phrites, lupus 6ryth6mateux ou s y n d r o m e s lupiques dont la pathog6nie reste obscure, dermatomyosite, p u r p u r a rhumatoide). A c e titre on pent n o t e r 6galement
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que j u s q u ' h prdsent seuls des c o m p o s a n t s faisant partie des sdquences d'activation de C3 ont dt6 trouvds gdndtiquement lids au complexe m a j e u r d'histocompatibilitd. L'existence de corrdlations entre le systbme HL-A et certaines maladies, de corrdlations entre des ddficits en c o m p l d m e n t et cerrains dtats pathologiques, d'une liaison gdndtique entre certains c o m p o s a n t s du c o m p l d m e n t et le complexe m a j e u r d'histocompatibilitd doit h prdsent inciter ~ poursuivre les recherches engagdes depuis quelques ann6es en vue de prdciser le rdle exact du compldment dans la rdponse i m m u n i t a i r e et en r u e de trouver un s u b s t r a t gdndtique h l'origine de l'dclosion de certaines maladies. Les dtudes sur les associations entre HL-A et certaines maladies devront comporter l'dtude de t o u s l e s m a r q u e u r s gdndtiques situds sur le c h r o m o s o m e n ° 6 et faisant p a t t i e du complexe m a j e u r d'histocompatibilit4 (HL-A, MLC, Bf, C2, C4) ou situds au voisinage de ce complexe (Chido, PGM-3).
RESUME Plusieurs travaux rdcents ont ddmontr6 l'existence d ' u n e liaison gdndtique entre le complexe d'histocompatibilitd (MHC) et le facteur B de la Properdine (GBG ou Bf). Le p o l y m o r p h i s m e de ce c o m p o s a n t du systhme du c o m p l d m e n t est mis en dvidence par dlectrophorhse sous h a u t voltage en agarose suivie d ' u n procddd <
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Nous avons group6 247 individus n o r m a u x non apparent6s de race blanche de la r4gion de S t r a s b o u r g et calcul6 les frdquences g4niques des all61es Bf qui sont les suivantes : Bf s = 0,757, Bf F = 0,219, BfSa= 0,014, B f f l = 0,010. Nos rdsultats sont intermddiaires entre ceux trouv6s par ALPER et RITTNER. La liaison g4ndtique entre le complexe m a j e u r d'histocompatibilit6 et le syst~me du c o m p l 4 m e n t s'est pr6cisde ~t la suite de la d6couverte que les g6nes contr61ant la synth6se de C2 et C4 sont 6troitement associ4s au MHC. Ces liaisons ont pu ~tre 4tablies gr~ce ~t l'6tude de plusieurs familles p r 6 s e n t a n t un d4ficit en C2 aux U.S.A. et d'une famille avec ddficit en C4 d4couverte ~t Strasbourg. Dans les cas de d4ficit en C2, le g6ne d4ficient a 6t6 trouv6 associ6 ~ trois sortes d'haplotypes HL-A (HL-A 10, W18 ; HL-A 2, W18 ; HL-A 2, 4A2 *) et ~ la sp4cificit6 MLC particuli~re LD-7a. Dans le cas de d4ficit en C4, le g6ne ddficient a 6t6 trouv6 associ6 ~t l'haplotype HL-A 2, T3, W10 et h une sp~cificit6 MLC particuli6re provisoirement d6signde par ,, Re ,,. La liaison entre C4 et MHC a 6t6 d6montr4e 6galement chez la souris (la protdine Ss 6tant la fraction C4 du comp16ment de souris) et le cobaye. La signification de la liaison entre certains c o m p o s a n t s du compl4ment et le complexe m a j e u r d'histocompatibilit6 n'est pas encore connue et devra faire l'objet de recherches plus importantes. Elle dolt aussi inciter ~t p o u r s u i v r e l'6tude des associations , syst~me HL-A et maladies ,, sur une nouvelle base, en tenant c o m p t e de tous les marqueurs g4n~tiques situ6s sur le c h r o m o s o m e n ° 6 au sein du complexe m a j e u r d'histocompatibilit6 ou au voisinage de celui-ci.
SUMMARY Several recent studies have shown that the genetic p o l y m o r p h i s m of factor B of the Properdin system (GBG or Bf) is closely linked to the m a j o r histocompatibility complex (MHC). The genetic polym o r p h i s m of Bf, a c o m p o n e n t of the alternate p a t h w a y of c o m p l e m e n t activation, is revealed by ~ immunofixation ,, technique after prolonged high voltage agarose electrophoresis. In this report, we describe technique for the Bf grouping and give the results in two families showing the linkage between HL-A and Bf loci. The study of a family with a r e c o m b i n a n t between the
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second HL-A locus (SD-2) and the m a j o r MLC locus (LD-1) provides evidence that the Bf locus is not located outside the MLC's because the Bf allele remains linked to the SD-2 allele. In this family, a crossover occurs between Bf and LD-1, and since crossovers between Bf and SD-2 have already been discovered, it is n o w possible to locate the Bf locus between SD-2 and LD-1. The Bf p h e n o t y p e s were d e t e r m i n e d in the s e r u m of 247 n o r m a l unrelated caucasian individuals f r o m the area of Strasbourg. The calculated allele frequencies in this population a r e : B f S = 0.757, Bf r = 0.219, Bf sl = 0.014, Bf F~ = 0.010. These allele frequencies are i n t e r m e d i a r y between those found b y ALPER and RITTNER. The linkage between MHC and the c o m p l e m e n t system is now even m o r e evident after the discovery that genes involved in the synthesis of the second and f o u r t h c o m p l e m e n t c o m p o n e n t s also belong to the MHC on the c h r o m o s o m e 6. These linkages were d e m o n s t r a t e d by the study of several families with h e r e d i t a r y C2 deficiency in the U.S.A., and one family with C4 deficiency discovered in Strasbourg. C2 deficiency was found to be associated with three kinds of HL-A haplotypes (HL-A 10, W18; HL-A2, W18 and HL-A 2, 4A2 *) and the LD-7a specificity. In the family with C4 deficiency, the C4 deficient gene is associated with the HL-A haplotype 2, T3, W10 and a new hitherto u n k n o w n MLC type , Re ,,. The linkage between C4 and MHC has been d e m o n s t r a t e d recently also in the m o u s e (the Ss protein in the c o m p l e m e n t C4 fraction in the mouse) and in the guinea pig. The significance of the genetic linkage between some i m p o r t a n t c o m p o n e n t s of the c o m p l e m e n t system and MHC is still u n k n o w n . It appears necessary to s t u d y all the genetic m a r k e r s located within or in the vicinity of the MHC region on the c h r o m o s o m e 6 in investigations of the relationship between ,, pathologic states and HL-A antigens ,,. Docteur G. HAUPTMANN, Centre de Transfusion sanguine, 10, rue Spielmann - 67085 STRASBOURGCedex.
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BIBLIOGRAPHIE [1] ALLEN F.H.Jr. - - Linkage of HL-A and GBG. Vox Sang., 27, 382, 1974. [2] ALPER C.A. a n d JOHNSON A.M. - - I m m u n o f i x a t i o n electrophoresis : a technique for the study of p r o t e i n p o l y m o r p h i s m . Vox. Sang., 17, 445, 1969. [3] ALPER C.A., BOENISCH T. a n d WATSON L. - - Genetic p o l y m o r p h i s m in h u m a n glycine-rich-beta-glycoprotein. J. Exp. Med., 135, 68, 1972. [4] BLUM L., PILLEMER L. a n d LEPOW ff.H. - - The p r o p e r d i n system and i m m u n i t y . X I I I : assay a n d p r o p e r t i e s of a heat-labile s e r u m factor (factor B) in the p r o p e r d i n system. Z~t Immun. Forsch., 118, 350, 1959. [5] DAY N.K., L'EsP~RANCE P., GOOD R.A., MICHAEL A.F., HANSEN J.A., DUPONT B. and JERSILD C. - - H e r e d i t a r y C2 deficiency : genetic studies a n d association with the HL-A system. J. Exp. Med., 141, 1464, 1975. [6] DAY N.K., RUBINSTEIN P., DE BRACCO M.M.E., DUPONT B., HANSEN J.A., GOOD R.A. a n d JERSILD C. - - H e r e d i t a r y C l r deficiency: lack of linkage to genetic m a r k e r s of the m a j o r h i s t o c o m p a t i b i l i t y complex (MHC). Sixth I n t e r n a t i o n a l H i s t o c o m p a t i b i l i t y W o r k s h o p Conference, Aarhus, 1975 I n : H i s t o c o m p a t i b i l i t y Testing, 960, 1975. [7] DEMANT P., CAPKOVAJ., HINZOVA E. and VORACOVAB. ~ The role of the histocompatibility-2-1inked Ss-Slp region in the control of mouse c o m p l e m e n t . Proc. Nat. Acad. Sci. (Wash.), 70, 863, 1973. [8] DUKOR P., DIETRICH F.M., GISLER R.H., SCHUMANN G., BITTER-SUERMANN D. - - Possible targets of c o m p l e m e n t action in B-cell triggering. I n : Progress in I m m u n o l o g y II, Vol. 3, 99. N o r t h H o l l a n d Publishing Company, 1974. [9] FRANK M . M . - C o m m u n i c a t i o n personnelle. [10] FRIEND P., HANDWERGER B., KIM Y., REINSMOEN N., MICHAEL A., and YUNIS E.J. - - The m a j o r h i s t o c o m p a t i b i l i t y region (HL-1) and deficiency of the second c o m p o n e n t of c o m p l e m e n t (C2): homozygosity for the MLR-S (LD) gene. Sixth I n t e r n a t i o n a l H i s t o c o m p a t i b i l i t y W o r k s h o p Conference, Aarhus 1975. I n : H i s t o c o m p a t i b i l i t y Testing 928, 1975. [11] Fu S.M., KUNKEL H.G., BRUSMAN H.P., ALLEN F.H. fir. and FOTINO M. - - Evidence for linkage b e t w e e n HL-A h i s t o c o m p a t i b i l i t y genes and those involved in the synthesis of the second c o m p o n e n t of complement. J. Exp. Med., 140, 1108, 1974. [12] Fu S.M., STERN R . , KUNKEL H.G., DUPONT B., HANSEN J.A., DAY N.K., GOOD R.A., JERSlLO C. a n d FOTINO M. - - Mixed l y m p h o c y t e culture d e t e r m i n a n t s and C2 deficiency: LD-7a associated w i t h C2 deficiency in four families. J. Exp. Med., 142, 495, 1975. [13] G/STZE O. - - I n : Progress in I m m u n o l o g y II, Vol. 1, 297. N o r t h H o l l a n d Publishing Company, 1974. [14] HANSEN T.H., SHIN H.S. a n d SHREFFLER D.C. - - Evidence for the involvement of the Ss p r o t e i n of the m o u s e in the h e m o l y t i c c o m p l e m e n t system. J. Exp. Med., 141, 1216, 1975.
486
HAUPTMANN G. et coll.
[15] HAUPT H. u n d HEIDE K. - - Isolierung u n d Eigenschaften eines 82Glykoproteins aus H u m a n s e r u m . Clin. Chim. Acta., 12, 419, 1965. [16] HAUPTMANNG., GROSSHANS E. et HEID E. - - Lupus 4ryth6mateux aigus et d6ficits h4rdditaires en compl4ment. A p r o p o s d ' u n cas p a r d6ficit complet en C4. Ann. Derm. Syph. (Paris), 101, 479, 1974. [17] HAUPTMANN G., SASPORTES M., TONGIO M.M., MAYER S. and DAUSSET J. About the localization of the Bf locus within the MHS region on c h r o m o s o m e N ° 6. Tissue Antigens (~ paraltre). [18] HINZOVAE., DEMANT P. a n d IVANYI P . - Genetic control of haemolytic c o m p l e m e n t in m i c e : association with H2. Folia biol. (Prague), 18, 237, 1972. [19] LACHMANNP. - - C o m m u n i c a t i o n personnelle. [20] MEO T. - - Facts a n d doubts about the m u r i n e Ss protein. Sdminaire au Basel I n s t i t u t e for I m m u n o l o g y , mai 1975. [21] OHELA K., TIILIKAINEN A., KAAKINEN A. a n d RASANEN J. - - Lack of association between HL-A haplotypes a n d HANE. XlV Congress of the I n t e r n a t i o n a l Society of Blood Transfusion, Helsinki, 1975. Abstracts. [22] RITTNER Ch., GROSSE-WILBE H., RITTNER B., NETZEL B., SCHOLTZ S., LORENTZ H. and ALBERT E.D. - - Linkage group HL-A - MLC - Bf (Properdin Factor B). The site of the Bf locus at the i m m u n o g e n e t i c linkage group on chromosome 6. Humangenetik, 27, 173, 1975. [23] RITTNER Ch., HAUPTMANN G., GROSSE-WILDE H., GROSSHANS E., TONGIO MM. a n d MAYER S. - - Linkage between HL-A (Major Histocompatibility Complex) a n d genes controlling the synthesis of the fourth c o m p o n e n t of complement. Sixth I n t e r n a t i o n a l Histocompatibility Workshop Conference, Aarhus 1975. I n : Histocompatibility Testing 945, 1975. [24] TEISBERG P. - - High voltage agarose gel electrophoresis in the study of the C3 polymorphism. Vox. Sang,. 19, 47, 1970. [ 2 5 ] TEISBERG P., OLAISEN B., GEDDE-DAHLT. Jr and THORSBY E. - - On the
localization of the Gb locus w i t h i n the MHS region of chromosome N ° 6. Tissue Antigens, 5, 257, 1975. [26] TULCI-IINN., ORNSTEIN L. a n d WEINER P. - - C3, GBG, Orosomucoid a n d haptoglobin polymorphisms. I m p r o v e d staining methods. Vox Sang., 28, 74, 1975. [27] ZIEGLER J.B., ALPER C.A. a n d BALNER H. - - Properdin factor B and histocompatibility in the rhesus monkey. Nature, 254, 609, 1975.
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A CTUALITES
Le polymorphisme du factcur B de la properdine (C3PA, GBG, Bf) et la liaison histocompatibilitd- compMment. p a r G. H A U P T M A N N , M.M. T O N G I O
et S. M A Y E R I n s t i t u t d'Hdmatologie, C.H.U. et Centre de T r a n s f u s i o n Sanguine, STRASBOURG.
Le f a c t e u r B de la p r o p e r d i n e (B o u Bf), d 6 c o u v e r t p a r PILLEMER et coll. e n 1959 [4], e n c o r e a p p e l 6 C3 P r o a c t i v a t e u r (C3PA) o u ,~ g l y c i n - r i c h - b e t a - g l y c o p r o t e i n ,, ( G B G ) est l ' u n des c o n s t i t u a n t s p r i n cipaux de la voie a l t e r n e d ' a c t i v a t i o n de C3. C'est u n e b 6 t a - g l o b u l i n e , t h e r m o l a b i l e , r i c h e e n s u c r e s , de c o n s t a n t e de s d d i m e n t a t i o n 5 S, de poids m o l 6 c u l a i r e 93.000 d a l t o n , f 0 r m 6 e d ' u n e seule c h a i n e p o l y p e p t i d i q u e [13]. Au c o u r s de la raise e n j e u de la voie a l t e r n e , le f a c t e u r B de la p r o p e r d i n e est clivd e n d e u x f r a g m e n t s : u n f r a g m e n t p r i n c i p a l , de p o i d s m o l d c u l a i r e 63.000 d a l t o n , c o n s t a n t e de s d d i m e n t a t i o n 3 S,
Manuscrit regu le 28-10-1975. N o m e n c l a t u r e et a b r d v i a t i o n s utilisd e s d a n s le t e x t e :
MHC: complexe majeur d'histocompatibilit& SD-I: premier locus HL-A; SD-2: deuxi~me locus HL-A; SD-3: troisi~me locus HL-A; LD-I: locus principal de culture mixte de lymphocytes (MLC); PGM-3 : locus de la phosphoglucomutase 3 ; Chido : locus du groupe 6rythrocytairr Chido.
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et coll.
mobilit6 61ectrophor6tique g a m m a et un f r a g m e n t plus petit de mobilit6 61ectrophor6tique alpha. Le f r a g m e n t principal a la propri6t6 de cliver la mol6cule de C3 ( c o m m e la C3 convertase dans la voie classique) et on le d6signe sous le n o m de facteur B activ6 (B) ou C3 Activateur (C3A) ou ,~ glycin-rich-gamma-glycoprotein,, (GGG) ou encore b~ta-2-glycoprot6ine II, n o m donn6 initialement cette prot6ine avant son identification c o m m e un constituant du syst6me du c o m p l 6 m e n t [15]. Le p o l y m o r p h i s m e du facteur B a 6t6 d6crit en 1972 par ALPER et coll. [3]. Ce p o l y m o r p h i s m e est mis en 6vidence p a r 61ectrophor6se prolong6e sous haut voltage en agarose suivie d ' u n proc6d6 ~d'immunofixation ,, qui consiste ~t fixer et r6v61er les bandes de la prot6ine dans le gel par un i m m u n - s 6 r u m sp6cifique anti-Bf. I1 s'agit d'un syst6me g6n6tique ~t un seul locus a u t o s o m i q u e occup6 p a r deux all61es principaux S (slow) et F (fast) s'exprimant en simple dose et d 6 t e r m i n a n t les ph6notypes c o u r a n t s SS, SF et FF. fl existe deux all61es rares S1 et F1 qui sont h l'origine des ph6notypes plus rares SIS, S1F, SF1, FF1. La liaison H L - A - B f a 6t6 signal6e p o u r la premi6re fois en 1974 p a r ALLEn [1] et confirm6e en 1975 par RITTNER et coll. (22) et TEISBERG et coll. [25]. ALLEN a constat6 une liaison 6troite entre les groupes HL-A et Bf en 6tudiant 12 familles informatives avec 44 enfants et n'a trouv6 a u c u n cas de recombinaison. Appliquant la m 6 t h o d e des ~ lod scores ~ il arrive h u n total de 10 ce qui donne une probabilit6 de 101° p o u r 1 en faveur d'une liaison g6n6tique entre les deux syst6mes. TEISBERG et coll. [25] trouvent 6galement une liaison 6troite sans a u c u n cas de r e c o m b i n a i s o n entre Bf et HL-A dans 23 families avec 90 enfants. Mais, dans trois autres families, ces a u t e u r s d6couvrent des recombinaisons entre Bf et le premier locus HL-A (SD-1) qui sont aussi des r e c o m b i n a i s o n s entre SD-1 et SD-2 (2 e locus HL-A) ce qui leur p e r m e t de situer le locus Bf proximit6 de SD-2. RITTNER et coll. [22] c o n f i r m e n t la liaison 6troite entre HL-A et Bf (~ lod score ,, de 10,608) tout en observant 5 cas de r e c o m b i n a i s o n entre HL-A et Bf sur u n total de 82 enfants issus de 21 familles informatives. Ils estiment donc que la fr6quence de r e c o m b i n a i s o n entre HL-A et B f e s t de 6 , 1 % . Dans deux families informatives, une r e c o m b i n a i s o n s'est p r o d u i t e entre le complexe SD-1/SD-2 et le locus Bf ce qui p e r m e t de situer ce dernier h l'ext6rieur de SD-1/SD~2. Dans trois families, une r e c o m b i n a i s o n s'est
FACTEUR B DE LA PROPERD1NE
473
produite quelque p a r t e n t r e SD-1 et MLC (soit entre SD-1 et SD-2, soit entre SD-2 et MLC p u i s q u e les m a r e s ~ l'origine du c h r o m o s o m e r e c o m b i n a n t sont h o m o z y g o t e s p o u r SD-2) : dans ces r e c o m b i n a i s o n s , l'allale Bf est restd lid au locus MLC de sorte que les a u t e u r s situent le locus Bf ~ c6td de MLC (LD-1) m a i s entre LD-1 et le locus de la p h o s p h o g l u c o m u t a s e 3 (PGM-3) c o m p t e tenu du fait que la frdquence de r e c o m b i n a i s o n entre HL-A et B f a 6td estimde h 6 , 1 % . R d c e m m e n t , l'dtonnante liaison gdndtique e n t r e les syst6mes d'histocompatibilitd et du c o m p l d m e n t s'est prdcisde p a r la ddcouverte d'une liaison entre le complexe d'histocompatibilitd et C2, dtablie grfice g l'dtude de plusieurs families avec ddficit en C2 [5, 10, 11, 12] et d'une liaison avec C4 dtablie grftce ~t l'dtude d'un cas de ddficit en C4 ddcouvert h S t r a s b o u r g [16, 23]. Fu et coll. [11] ont constatd, darts une famille avec ddficit en C2, que le gane ddficient en C2 sdgrdgeait d t r o i t e m e n t avec l ' h a p l o t y p e particulier HL-A 10, W18, le sujet a y a n t un ddficit c o m p l e t en C2 dtant h o m o z y g o t e p o u r HL-A 10, W18. Les sujets a y a n t u n ddficit partiel en C2 poss6dent t o u s l e s antiganes HL-A 10, W18 alors que les sujets n o r m a u x p o s s a d e n t d ' a u t r e s antiganes HL-A. Dans plusieurs autres familles dtudides depuis, le ddficit en C2 a dtd trouvd associd aux h a p l o t y p e s HL-A s u i v a n t s : HL-A 10, W18 ou HL-A2, W18 ou HL-A 2, 4A2 * [5]. Finalement, une dtude plus c o m p l a t e de ces families a rdvdl6 que le locus C2 est tras d t r o i t e m e n t lid au locus MLC principal (LD-1) et h une spdcificitd MLC bien pr6cise, en l'occurence 7a (LD-7a ou S ou Pi). Les individus p r d s e n t a n t u n ddficit c o m p l e t en C2 dans diffdrentes familles ont dtd tronv6s h o m o z y g o t e s LD-7a et les individus hdtdrozygotes p o u r le ddficit en C2 p o s s a d e n t tous la spdcificitd LD-7a. Le locus C2 serait situd h c6td de LD-1, e n t r e LD-1 et PGM-3 [12]. L'dtude gdndtique du cas de ddficit en C4 trouvd h S t r a s b o u r g [16] a p e r m i s de m o n t r e r que les ganes contr61ant la synthase de la fraction C4 du c o m p l d m e n t sont dgalement lids au complexe m a j e u r d'histocompatibilitd chez l ' h o m m e [23]. E n effet, le p r o p o s i t u s , prdsentant u n d~ficit c o m p l e t en C4, est h o m o z y g o t e p o u r HL-A 2, T3, W10, dgalement h o m o z y g o t e en MLC (avec une nouvelle spdcificitd p r o v i s o i r e m e n t d d n o m m d e (, Re ,,) ainsi q u e p o u r les a u t r e s m a r queurs du c h r o m o s o m e n ° 6 : Bf (SS) et PGM-3 (1-1). Dans la famille, trois m e m b r e s p r d s e n t a n t un ddficit partiel en C4 (la m a r e , l'oncle m a t e r n e l et le grand-pare m a t e r n e l ) p o s s a d e n t l ' h a p l o t y p e HL-A2,
474
HAUPTMANN
G. et coll.
T3, Wl0, LD-1 ~ Re,>, B f S , PGM3-1 auquel se trouve lid u n g~ne ddficient en C4. La m ~ r e du p r o p o s i t u s dtait figde de 15 ans lors de la naissance et le p~re serait u n p r o c h e p a r e n t du grand-p6re m a t e r n e l ou le grand-pbre lui-m~me (qui n ' a p a s p u ~tre exclu sur 21 m a r q u e u r s gdndtiques diffdrents). I1 y a donc une consanguinitd certaine mais la liaison e n t r e HL-A et C4 p e u t ~tre affirmde du fait que la mere, aprbs son mariage, a donn6 naissance ~t deux a u t r e s enfants auxquels elle n ' a t r a n s m i s n i l e ddficit en C4 ni l ' h a p l o t y p e HL-A 2, T3, W10. La liaison HL-A-C4 est h p r d s e n t confirmde p a r l ' d t u d e d'une deuxidme famille avec ddficit en C4 trouvde aux U.S.A. (R. CLARK, Seattle U.S.A., c o m m u n i c a t i o n personnelle). P o u r d ' a u t r e s c o m p o s a n t s du c o m p l d m e n t , C l r [6], C6 [19] et l'inhibiteur de la Cl-estdrase [21] il n ' y a pas de liaison gdndtique avec le c o m p l e x e d ' h i s t o c o m p a t i b i l i t 6 chez l ' h o m m e . I1 faut signaler que la liaison h i s t o c o m p a t i b i l i t d - c o m p l 6 m e n t a dtd d ' a b o r d trouvde chez la souris [7, 18]. E n effet, la rdgion S du complexe H2 contr61e le t a u x de c o m p l d m e n t h d m o l y t i q u e du sdrum de souris et celui de la protdine Ss qui est u n c o n s t i t u a n t essentiel du syst~me du c o m p M m e n t de la souris [14], en fait la fraction C4 [19, 20]. Chez le cobaye, l'6tude de souches ddficientes en C4 a p e r m i s d'dtablir, c o m m e chez l ' h o m m e , une liaison e n t r e C4 et le complexe m a j e u r d'histocompatibilit6 [ 9 ] . Nous p r d s e n t o n s ici la t e c h n i q u e du g r o u p a g e Bf, les rdsultats du g r o u p a g e effectud darts une p o p u l a t i o n de la rdgion de S t r a s b o u r g et donnons quelques prdcisions q u a n t h la situation du locus Bf an sein du complexe d ' h i s t o c o m p a t i b i l i t d chez l ' h o m m e .
MATERIEL ET M E T H O D E S PRI~L~VEMENTS : Le g r o u p a g e Bf est effectual sur le s d r u m : du sang veineux est prdlevd sur u n t u b e stdrile ne c o n t e n a n t p a s d ' a n t i c o a g u l a n t et aprbs coagulation et rdtracfion du caillot, le s 6 r u m est sdpar6 p a r centrifugation et congeld h - - 2 0 ° C . MATI~RIEL ET RI~ACTIFS: appareil d'dlectrophor~se ( d q u i p e m e n t UGI 30 DESAGA, Heidelberg, R.F.A.) ;
FACTEUR B DE LA PROPERD1NE
475
- - p l a q u e s de verre de 20 × 20 cm (plaques de verre utilisdes p o u r la c h r o m a t o g r a p h i e en couche mince) ; il s'agit de t a m p o n s barbital-lactate de calcium pr6conis6s p a r TEISBER6 p o u r l'6tude du p o l y m o r p h i s m e de C3 [24].
--tampons:
- - agarose (Lab. SERVA) ; - - i m m u n - s 6 r u m anti-Bf: nous avons utilis4 un i m m u n - s 6 r u m pr6par6 p a r C.A. ALPER (Boston, U.S.A.). MODE 0Pt~RATOIRE :
Le groupage Bf est effectu6 en deux t e m p s : - - d'abord, 61ectrophor6se prolong6e sous h a u t voltage en agarose d'apr6s TEISBERG [24] ; --
ensuite, ~, i m m u n o f i x a t i o n ,, d'apr~s ALPER et coll. [2].
Les plaques de verre de 20 × 20 c m sont rev6tues de 60 ml d'agarose ~t 1 % . Apr6s refroidissement, on d6coupe sur une ligne environ 4 cm du b o r d (FIG. 1) 16 h 18 puits de 8 × 1 m m (emportep i b c e APELAB, Bagneux). Les puits sont remplis avec le s6rum dilu6 1/4 dans de l'agarose h 1 % m a i n t e n u e liquide h + 42°C. L'61ectrophorbse est ensuite r6alis6e h 20 V / c m p e n d a n t 3 heures. Les ponts entre le
+
~2
!. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
1
FIG. 1 . - Schdma de r6alisation d'une plaque de groupage Bf. 1 : ligne de ddp6t des dchantillons de s 4 r u m ; 2 : zone de migration des bandes Bf. Partie hachurde : zone d'application de l'immun-
sdrum
anti-Bf.
HAUPTMANN
476
G. et coil.
gel et les cuves sont rdalisds de chaque c6td p a r deux b a n d e s de p a p i e r Schleicher et Schull 2043aMgl. A la fin de l'61ectrophor6se, on dtend sur le gel sur une l a r g e u r de 6 c m en a v a n t de la ligne de ddp6t 1,5 m l d ' i m m u n - s d r u m anti-Bf et les plaques sont placdes dans une c h a m b r e h u m i d e h 37°C p e n d a n t 5 h 6 heures. Les plaques sont ensuite plongdes p e n d a n t 24 h e u r e s dans de l'eau physiologique, puis rincdes ~t l'eau distillde et f i n a l e m e n t sdchdes et colordes au bleu de Coomassie [26].
NOMENCLATURE Une nouvelle n o m e n c l a t u r e p o u r le f a c t e u r B de la P r o p e r d i n e a dtd adoptde au I I Congrbs I n t e r n a t i o n a l d ' I m m u n o l o g i e de Brighton en 1974. Le sigle Bf r e m p l a c e le sigle Gb p r o p o s d initialement p a r Alper (Tabl. I). TABLEAU I N o m e n c l a t u r e des g&nes et types du ~acteur B de la Properdine.
NOUVELLE
ANClENNE Gbnes
Types
G~nes
Types
Gb vl
Gb F 1
B[ rl
B f F1
Gb v
Gb F
B[ r
Bf F
Gb s
Gb S
Bf s
Bf S -
Gb sl
Gb S1
B[ sl
B f S1
RESULTATS INTERPRETATION DES TRACES:
L ' a s p e c t des b a n d e s a dtd ddcrit en ddtail p a r ALPER et coll. [3]. La figure 2 m o n t r e l'aspect des types c o u r a n t s SS, SF et FF. La v a r i a n t e SS est caractdrisde p a r l'existence d ' u n e b a n d e principale en position c a t h o d i q u e entourde de b a n d e s accessoires plus ou moins visibles ; la v a r i a n t e FF p a r une b a n d e principale en position anodique
477
FACTEUR B DE LA PROPERDINE
FIG. 2 . -
FIG. 3 . -
Aspect des ph6notypes courants FF, SS et FS (a) plaque photographi~e par transparence; (b) m6me plaque pos6e sur une feuille blanche.
Aspect
des
phdnotypes
courants
et
rares:
1 = S S , 2 = F F , 3 = F S , 4 = $ 1 S , 5 = $ 1 F , 6 = S F 1 , 7 = FF1, 8 =
SS.
entour~e de bandes accessoires, la variante SF par l'existence de deux b a n d e s p r i n c i p a l e s en p o s i t i o n S e t F avec ~galement des bandes a c c e s s o i r e s . I1 f a u t r i o t e r q u e d a n s la v a r i a n t e SF, l a b a n d e p r i n c i p a l e F e s t s o u v e n t u n p e u p l u s n e t t e q u e la b a n d e S ce q u i p e u t rendre l'interpr~tation d~licate (risque de confondre la variante SF
478
H A U P T M A N N G. et coll.
a v e c F F ) . A u m o i n d r e d o u t e , il f a u t r e f a i r e le g r o u p a g e . L a figure 3 m o n t r e l ' a s p e c t d o n n 6 p a r les v a r i a n t e s p l u s r a r e s S I S , S1F, SF1 e t FF1 d u e s h la p r 6 s e n c e d e l'all61e $1 o u F1. FRI~QUENCES GENIQUES DES ALLELES B f : N o u s a v o n s g r o u p 6 247 i n d i v i d u s n o r m a u x n o n a p p a r e n t 6 s , de r a c e b l a n c h e d e la r 6 g i o n d e S t r a s b o u r g . Les f r d q u e n c e s g 6 n i q u e s c a l c u l 6 e s s o n t d o n n 6 e s d a n s le t a b l e a u n e t c o m p a r 6 e s ~ celles t r o u v 4 e s p a r ALPER e t coll. [3] et RITTNER e t coll. [22]. N o s r 6 s u l t a t s s o n t i n t e r m 6 d i a i r e s e n t r e c e u x t r o u v 4 s p a r ces d e u x a u t e u r s . C o m m e RITTNER et coll., n o u s a v o n s t r o u v 6 l'all~le r a r e F1 c h e z d e s i n d i v i d u s d e r a c e b l a n c h e a l o r s q u e F1 n ' a v a i t 6t6 t r o u v 4 p a r ALPER q u e chez les N o i r s . TABLEAUII Frdquences gdniques des alleles Bf. I
AUTEURS
NOMBRE D'INDIVIDUS TESTI~S
Bf s
Bf F
B fro
BfFI
127 158 86
0,437 0,709 0,890
0,512 0,278 0,110
m
0,051
0,013
RITTNER et coll. (1975) Blanche
82
0,826
0,149
0,012
0,012
Pr6sent travaH Blanche
247
0,757
0,219
0,014
0,010
(race) ALPER et coll. (1972) Noire Blanche Jaune
I
b
LIAISON GI~NI~TIOUE HL-A-Bf : Nous donnons cette liaison :
simplement
deux
exemples
typiques
illustrant
1) FAMILLE GIN... - - I1 s ' a g i t d ' u n ,, d o u b l e b a c k - c r o s s ,, p u i s q u e le p 6 r e e s t h 6 t 6 r o z y g o t e p o u r HL-A et Bf. Les j u m e l l e s 1 e t 2 et l ' e n f a n t 6 o n t h 6 r i t 6 d u p a r e l'all61e B f f a v e c l ' h a p l o t y p e HL-A 2, T4, W5, les a u t r e s e n f a n t s o n t h 6 r i t 6 d e l'all61e Bf s a v e c l ' h a p l o t y p e HL-A W32, T4, W5 (FIG. 4).
479
FACTEUR B DE LA PROPERDINE
[]
©
SF
ss
2 - T4- W5- F
~6-
T4- W5- S
W26- T3- W22- $
W32 - T4- W5- $
4 SF ,: -
T4-
SF W5- F
2 -
W26- T ) - W22- $
W26 -
T4-
SS W5-
T3 " W22 -
5
SS
W32- T 4 -
W5 -
S
W32- T4- W5- S
W32 -
T4 -
W5 -
S
2 -
S
W26-
W5
S
W26 - 1 4 - W 5 -
W26 -
T3 - W22 -
S
W26 -
T4 -
-
4.-
Famille
S
-W5
F
GuY
i
-
WS-
8-
F
-m
FI-•
1
-
W26-
-m
8
-
F 5
W15-
Fl-e S
-
JEAN I NE
JACQUELI NE"
SYLVI E
S FI
F F1
S FI
F F1 13 -
-
s F1
S -A
-
W5 -
T3 - ~2
©
SF 7 -
T4 -
Girc
E]
3
SF
F
FIG.
3 -
6
SS
3
-
7
1
-
8
-
S
-A
-
FI-•
3
-
W5-
F
1
-
8
FI-•
-
-m
3
-
7
-
S
-m
I
-
8
-
FI-•
FIG. 5. - - Famille Bou
2) FAMILLE BOU... - - C'est u n e f a m i l l e p a r t i c u l i 6 r e m e n t i n t 6 r e s s a n t e 6 t u d i 6 e p a r le P r o f e s s e u r DAUSSET: il s'agit d ' u n <, d o u b l e d o u b l e - c r o s s ,, p u i s q u e le p 6 r e et la m 6 r e s o n t d o u b l e h 6 t 6 r o z y g o t e s p o u r HL-A et Bf, d ' a u t r e p a r t , u n des e n f a n t s est i s s u d ' u n e r e c o m b i n a i s o n e n t r e SD-2 et LD-1 ce q u i a p e r m i s de p r 6 c i s e r la s i t u a t i o n
480
HAUPTMANN
G.
et
coll.
du locus Bf sur le c h r o m o s o m e n ° 6 [17]. Tous les enfants ont requ de leur mbre l'all6le rare Bf F1 avec l'haplotype HL-A 1, 8, deux enfants ont requ du p~re l'all6le Bf s avec l'haplotype HL-A 3, 7, les deux autres l'all61eBf F avec l'haplotype HL-A3, W5 (FIG. 5). SITUATION DU LOCUS
Bf SUR LE CHROMOSOME N ° 6 :
Dans la famille B0u .... l'enfant Sylvie a re~u de son p6re un haplotype recombin6 entre SD-2 et LD-1. En effet, Guy et Jacqueline, identiques en HL-A et Bf, sont 6galement identiques en culture mixte de lymphocytes. Sylvie n'est pas identique en culture mixte de
SD-1
chr. 6
~ []
$D-3
t
[]
SD-2
t
[]
BI
, 0
LD-I C2
0,0_ ,
Chida
0
PI3M'3
.'/
0
C4?
*
i ~0,8%
1 :0,4%
r :15%
FIG. 6. - - Carte g6ndtique du c o m p l e x e m a j e u r d ' h i s t o c o m p a t i b i l i t 6 situ6 s u r le c h r o m o s o m e n ° 6.
l y m p h o c y t e s h sa sceur Jeannine qui poss6de les m6mes groupes HL-A et Bf mais elle est identique en MLC h Guy et Jacqueline. Ceci indique q u ' u n e recombinaison paternelle s'est produite entre SD-2 et LD-1 et le locus B f e s t rest~ attach6 au segment de c h r o m o s o m e p o r t a n t les deux loci principaux HL-A. Le locus Bf n'a pas suivi le g6ne LD-1 et ne peut d o n c pas 6tre situ6 h l'ext6rieur de LD-1, entre LD-1 et PGM-3 c o m m e l'ont indiqu6 RITTNER et coll, [22].
DISCUSSION Les travaux d'ALLEN, TEISBERG et RITTNER ont d~montr6 l'existence d ' u n e liaison g~n~tique 6troite entre le complexe m a j e u r d'histocompatibilit6 et le facteur B de la properdine. Nous avons donn6 deux exemples de familles qui illustrent cette liaison° Seule la situation exacte du locus Bf au sein du complexe m a j e u r d!histocompatibilit~ restait h pr6ciser. Grgce h la d6couverte et ~ l'~tude de familles pr~sentant des recombinaisons entre HL-A et MLC il est possible de situer h pr6sent le locus Bf entre SD-2 et LD-1 [17]. RITTNER et coll. [22] avaient observ6 que le locus Bf suivait le g~ne LD-1 dans
FACTEUR B DE LA PROPERDINE
481
les recombinaisons entre le p r e m i e r locus HL-A et MLC et avaient situ6 le locus Bf h l'ext6rieur de LD-1, entre LD-1 et PGM-3, puisqu'ils avaient trouv6 une fr6quence de recombinaison entre HL-A et Bf de 6,1%. De plus, RITTNER et coll. ont trouv6 des cas de recombinaison entre Bf et SD-2. Darts la famille Bou .... une r e c o m b i n a i s o n s'est produite entre Bf et LD-1 et Bf est rest6 li6 h SD-2. L'ensemble de ces r6sultats p e r m e t doric h pr6sent de situer Bf entre SD-2 et LD-1 puisque des recombinaisons ont 6t6 observdes d'une p a r t entre Bf et SD-2 (par RITTNER et coll.) et d ' a u t r e p a r t entre Bf et LD-1 (famille BotJ). La fr6quence de r e c o m b i n a i s o n de 6 , 1 % entre HL-A et Bf trouv6e par RITTNER et coll. est c e r t a i n e m e n t trop 61ev6e c o m p t e tenu du fait que ALLEN et TEISBERG n ' o n t trouv6 a u c u n cas de recombinaison entre SD-2 et Bf sur un grand h o m b r e de familles 6tudi6es. La signification de l'6tonnante liaison g6n6tique entre certains constituants du syst~me du c o m p l 6 m e n t et le complexe m a j e u r d'histocompatibilit6 reste encore h 6tablir. Cette liaison suscitera probablement des travaux de recherche importants. Les recherches de ces derni~res ann6es ont m o n t r 6 que le syst6me du c o m p l 6 m e n t joue un r61e b e a u c o u p plus i m p o r t a n t q u ' o n ne le pensait darts la r6ponse immunitaire. Le syst6me du c o m p l 6 m e n t n'est pas seulement un syst6me effecteur des anticorps et un m6diateur de rdactions immunologiques humorales. Le comp16ment intervient p r o b a b l e m e n t aussi au niveau cellulaire de la r6ponse i m m u n e ainsi que l'attestent les constatations suivantes [8] : - - l ' e x i s t e n c e de r6cepteurs p o u r C3, C4 et le facteur B h la surface de certains lymphocytes, des m a c r o p h a g e s et m o n o c y t e s ; le fait que n o m b r e d'antig~nes T ind6pendants ainsi que des substances mitog6niques p o u r les B-lymphocytes sont de puissants inducteurs de la vole alterne d'activation de C3 ; -
-
- - le fait que la d6pl6tion de C3 in vivo par le venin de c o b r a entralne exp6rimentalement une diminution de la rdponse anticorps T-d6pendante ; - - le fait que les d6ficits h6rdditaires du c o m p l 6 m e n t chez l ' h o m m e (et particuli6rement les d6ficits p o r t a n t sur les c o m p o s a n t s de la voie classique d'activation de C3) entrainent le plus souvent l'apparition d'affections imrnunologiques (glom6rulon6phrites, lupus 6ryth6mateux ou s y n d r o m e s lupiques dont la pathog6nie reste obscure, dermatomyosite, p u r p u r a rhumatoide). A c e titre on pent n o t e r 6galement
482
HAUPTMANN
G.
et coll.
que j u s q u ' h prdsent seuls des c o m p o s a n t s faisant partie des sdquences d'activation de C3 ont dt6 trouvds gdndtiquement lids au complexe m a j e u r d'histocompatibilitd. L'existence de corrdlations entre le systbme HL-A et certaines maladies, de corrdlations entre des ddficits en c o m p l d m e n t et cerrains dtats pathologiques, d'une liaison gdndtique entre certains c o m p o s a n t s du c o m p l d m e n t et le complexe m a j e u r d'histocompatibilitd doit h prdsent inciter ~ poursuivre les recherches engagdes depuis quelques ann6es en vue de prdciser le rdle exact du compldment dans la rdponse i m m u n i t a i r e et en r u e de trouver un s u b s t r a t gdndtique h l'origine de l'dclosion de certaines maladies. Les dtudes sur les associations entre HL-A et certaines maladies devront comporter l'dtude de t o u s l e s m a r q u e u r s gdndtiques situds sur le c h r o m o s o m e n ° 6 et faisant p a t t i e du complexe m a j e u r d'histocompatibilit4 (HL-A, MLC, Bf, C2, C4) ou situds au voisinage de ce complexe (Chido, PGM-3).
RESUME Plusieurs travaux rdcents ont ddmontr6 l'existence d ' u n e liaison gdndtique entre le complexe d'histocompatibilitd (MHC) et le facteur B de la Properdine (GBG ou Bf). Le p o l y m o r p h i s m e de ce c o m p o s a n t du systhme du c o m p l d m e n t est mis en dvidence par dlectrophorhse sous h a u t voltage en agarose suivie d ' u n procddd <
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Nous avons group6 247 individus n o r m a u x non apparent6s de race blanche de la r4gion de S t r a s b o u r g et calcul6 les frdquences g4niques des all61es Bf qui sont les suivantes : Bf s = 0,757, Bf F = 0,219, BfSa= 0,014, B f f l = 0,010. Nos rdsultats sont intermddiaires entre ceux trouv6s par ALPER et RITTNER. La liaison g4ndtique entre le complexe m a j e u r d'histocompatibilit6 et le syst~me du c o m p l 4 m e n t s'est pr6cisde ~t la suite de la d6couverte que les g6nes contr61ant la synth6se de C2 et C4 sont 6troitement associ4s au MHC. Ces liaisons ont pu ~tre 4tablies gr~ce ~t l'6tude de plusieurs familles p r 6 s e n t a n t un d4ficit en C2 aux U.S.A. et d'une famille avec ddficit en C4 d4couverte ~t Strasbourg. Dans les cas de d4ficit en C2, le g6ne d4ficient a 6t6 trouv6 associ6 ~ trois sortes d'haplotypes HL-A (HL-A 10, W18 ; HL-A 2, W18 ; HL-A 2, 4A2 *) et ~ la sp4cificit6 MLC particuli~re LD-7a. Dans le cas de d4ficit en C4, le g6ne ddficient a 6t6 trouv6 associ6 ~t l'haplotype HL-A 2, T3, W10 et h une sp~cificit6 MLC particuli6re provisoirement d6signde par ,, Re ,,. La liaison entre C4 et MHC a 6t6 d6montr4e 6galement chez la souris (la protdine Ss 6tant la fraction C4 du comp16ment de souris) et le cobaye. La signification de la liaison entre certains c o m p o s a n t s du compl4ment et le complexe m a j e u r d'histocompatibilit6 n'est pas encore connue et devra faire l'objet de recherches plus importantes. Elle dolt aussi inciter ~t p o u r s u i v r e l'6tude des associations , syst~me HL-A et maladies ,, sur une nouvelle base, en tenant c o m p t e de tous les marqueurs g4n~tiques situ6s sur le c h r o m o s o m e n ° 6 au sein du complexe m a j e u r d'histocompatibilit6 ou au voisinage de celui-ci.
SUMMARY Several recent studies have shown that the genetic p o l y m o r p h i s m of factor B of the Properdin system (GBG or Bf) is closely linked to the m a j o r histocompatibility complex (MHC). The genetic polym o r p h i s m of Bf, a c o m p o n e n t of the alternate p a t h w a y of c o m p l e m e n t activation, is revealed by ~ immunofixation ,, technique after prolonged high voltage agarose electrophoresis. In this report, we describe technique for the Bf grouping and give the results in two families showing the linkage between HL-A and Bf loci. The study of a family with a r e c o m b i n a n t between the
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second HL-A locus (SD-2) and the m a j o r MLC locus (LD-1) provides evidence that the Bf locus is not located outside the MLC's because the Bf allele remains linked to the SD-2 allele. In this family, a crossover occurs between Bf and LD-1, and since crossovers between Bf and SD-2 have already been discovered, it is n o w possible to locate the Bf locus between SD-2 and LD-1. The Bf p h e n o t y p e s were d e t e r m i n e d in the s e r u m of 247 n o r m a l unrelated caucasian individuals f r o m the area of Strasbourg. The calculated allele frequencies in this population a r e : B f S = 0.757, Bf r = 0.219, Bf sl = 0.014, Bf F~ = 0.010. These allele frequencies are i n t e r m e d i a r y between those found b y ALPER and RITTNER. The linkage between MHC and the c o m p l e m e n t system is now even m o r e evident after the discovery that genes involved in the synthesis of the second and f o u r t h c o m p l e m e n t c o m p o n e n t s also belong to the MHC on the c h r o m o s o m e 6. These linkages were d e m o n s t r a t e d by the study of several families with h e r e d i t a r y C2 deficiency in the U.S.A., and one family with C4 deficiency discovered in Strasbourg. C2 deficiency was found to be associated with three kinds of HL-A haplotypes (HL-A 10, W18; HL-A2, W18 and HL-A 2, 4A2 *) and the LD-7a specificity. In the family with C4 deficiency, the C4 deficient gene is associated with the HL-A haplotype 2, T3, W10 and a new hitherto u n k n o w n MLC type , Re ,,. The linkage between C4 and MHC has been d e m o n s t r a t e d recently also in the m o u s e (the Ss protein in the c o m p l e m e n t C4 fraction in the mouse) and in the guinea pig. The significance of the genetic linkage between some i m p o r t a n t c o m p o n e n t s of the c o m p l e m e n t system and MHC is still u n k n o w n . It appears necessary to s t u d y all the genetic m a r k e r s located within or in the vicinity of the MHC region on the c h r o m o s o m e 6 in investigations of the relationship between ,, pathologic states and HL-A antigens ,,. Docteur G. HAUPTMANN, Centre de Transfusion sanguine, 10, rue Spielmann - 67085 STRASBOURGCedex.
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BIBLIOGRAPHIE [1] ALLEN F.H.Jr. - - Linkage of HL-A and GBG. Vox Sang., 27, 382, 1974. [2] ALPER C.A. a n d JOHNSON A.M. - - I m m u n o f i x a t i o n electrophoresis : a technique for the study of p r o t e i n p o l y m o r p h i s m . Vox. Sang., 17, 445, 1969. [3] ALPER C.A., BOENISCH T. a n d WATSON L. - - Genetic p o l y m o r p h i s m in h u m a n glycine-rich-beta-glycoprotein. J. Exp. Med., 135, 68, 1972. [4] BLUM L., PILLEMER L. a n d LEPOW ff.H. - - The p r o p e r d i n system and i m m u n i t y . X I I I : assay a n d p r o p e r t i e s of a heat-labile s e r u m factor (factor B) in the p r o p e r d i n system. Z~t Immun. Forsch., 118, 350, 1959. [5] DAY N.K., L'EsP~RANCE P., GOOD R.A., MICHAEL A.F., HANSEN J.A., DUPONT B. and JERSILD C. - - H e r e d i t a r y C2 deficiency : genetic studies a n d association with the HL-A system. J. Exp. Med., 141, 1464, 1975. [6] DAY N.K., RUBINSTEIN P., DE BRACCO M.M.E., DUPONT B., HANSEN J.A., GOOD R.A. a n d JERSILD C. - - H e r e d i t a r y C l r deficiency: lack of linkage to genetic m a r k e r s of the m a j o r h i s t o c o m p a t i b i l i t y complex (MHC). Sixth I n t e r n a t i o n a l H i s t o c o m p a t i b i l i t y W o r k s h o p Conference, Aarhus, 1975 I n : H i s t o c o m p a t i b i l i t y Testing, 960, 1975. [7] DEMANT P., CAPKOVAJ., HINZOVA E. and VORACOVAB. ~ The role of the histocompatibility-2-1inked Ss-Slp region in the control of mouse c o m p l e m e n t . Proc. Nat. Acad. Sci. (Wash.), 70, 863, 1973. [8] DUKOR P., DIETRICH F.M., GISLER R.H., SCHUMANN G., BITTER-SUERMANN D. - - Possible targets of c o m p l e m e n t action in B-cell triggering. I n : Progress in I m m u n o l o g y II, Vol. 3, 99. N o r t h H o l l a n d Publishing Company, 1974. [9] FRANK M . M . - C o m m u n i c a t i o n personnelle. [10] FRIEND P., HANDWERGER B., KIM Y., REINSMOEN N., MICHAEL A., and YUNIS E.J. - - The m a j o r h i s t o c o m p a t i b i l i t y region (HL-1) and deficiency of the second c o m p o n e n t of c o m p l e m e n t (C2): homozygosity for the MLR-S (LD) gene. Sixth I n t e r n a t i o n a l H i s t o c o m p a t i b i l i t y W o r k s h o p Conference, Aarhus 1975. I n : H i s t o c o m p a t i b i l i t y Testing 928, 1975. [11] Fu S.M., KUNKEL H.G., BRUSMAN H.P., ALLEN F.H. fir. and FOTINO M. - - Evidence for linkage b e t w e e n HL-A h i s t o c o m p a t i b i l i t y genes and those involved in the synthesis of the second c o m p o n e n t of complement. J. Exp. Med., 140, 1108, 1974. [12] Fu S.M., STERN R . , KUNKEL H.G., DUPONT B., HANSEN J.A., DAY N.K., GOOD R.A., JERSlLO C. a n d FOTINO M. - - Mixed l y m p h o c y t e culture d e t e r m i n a n t s and C2 deficiency: LD-7a associated w i t h C2 deficiency in four families. J. Exp. Med., 142, 495, 1975. [13] G/STZE O. - - I n : Progress in I m m u n o l o g y II, Vol. 1, 297. N o r t h H o l l a n d Publishing Company, 1974. [14] HANSEN T.H., SHIN H.S. a n d SHREFFLER D.C. - - Evidence for the involvement of the Ss p r o t e i n of the m o u s e in the h e m o l y t i c c o m p l e m e n t system. J. Exp. Med., 141, 1216, 1975.
486
HAUPTMANN G. et coll.
[15] HAUPT H. u n d HEIDE K. - - Isolierung u n d Eigenschaften eines 82Glykoproteins aus H u m a n s e r u m . Clin. Chim. Acta., 12, 419, 1965. [16] HAUPTMANNG., GROSSHANS E. et HEID E. - - Lupus 4ryth6mateux aigus et d6ficits h4rdditaires en compl4ment. A p r o p o s d ' u n cas p a r d6ficit complet en C4. Ann. Derm. Syph. (Paris), 101, 479, 1974. [17] HAUPTMANN G., SASPORTES M., TONGIO M.M., MAYER S. and DAUSSET J. About the localization of the Bf locus within the MHS region on c h r o m o s o m e N ° 6. Tissue Antigens (~ paraltre). [18] HINZOVAE., DEMANT P. a n d IVANYI P . - Genetic control of haemolytic c o m p l e m e n t in m i c e : association with H2. Folia biol. (Prague), 18, 237, 1972. [19] LACHMANNP. - - C o m m u n i c a t i o n personnelle. [20] MEO T. - - Facts a n d doubts about the m u r i n e Ss protein. Sdminaire au Basel I n s t i t u t e for I m m u n o l o g y , mai 1975. [21] OHELA K., TIILIKAINEN A., KAAKINEN A. a n d RASANEN J. - - Lack of association between HL-A haplotypes a n d HANE. XlV Congress of the I n t e r n a t i o n a l Society of Blood Transfusion, Helsinki, 1975. Abstracts. [22] RITTNER Ch., GROSSE-WILBE H., RITTNER B., NETZEL B., SCHOLTZ S., LORENTZ H. and ALBERT E.D. - - Linkage group HL-A - MLC - Bf (Properdin Factor B). The site of the Bf locus at the i m m u n o g e n e t i c linkage group on chromosome 6. Humangenetik, 27, 173, 1975. [23] RITTNER Ch., HAUPTMANN G., GROSSE-WILDE H., GROSSHANS E., TONGIO MM. a n d MAYER S. - - Linkage between HL-A (Major Histocompatibility Complex) a n d genes controlling the synthesis of the fourth c o m p o n e n t of complement. Sixth I n t e r n a t i o n a l Histocompatibility Workshop Conference, Aarhus 1975. I n : Histocompatibility Testing 945, 1975. [24] TEISBERG P. - - High voltage agarose gel electrophoresis in the study of the C3 polymorphism. Vox. Sang,. 19, 47, 1970. [ 2 5 ] TEISBERG P., OLAISEN B., GEDDE-DAHLT. Jr and THORSBY E. - - On the
localization of the Gb locus w i t h i n the MHS region of chromosome N ° 6. Tissue Antigens, 5, 257, 1975. [26] TULCI-IINN., ORNSTEIN L. a n d WEINER P. - - C3, GBG, Orosomucoid a n d haptoglobin polymorphisms. I m p r o v e d staining methods. Vox Sang., 28, 74, 1975. [27] ZIEGLER J.B., ALPER C.A. a n d BALNER H. - - Properdin factor B and histocompatibility in the rhesus monkey. Nature, 254, 609, 1975.