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O23-2 Qualité du plasma après viro-atténuation par le bleu de méthylène
S e s s i o n 23
Attdnuation virale des produits sanguins labiles Coordonnateur
• G Andreu
O23-1
Plasma issu d' aphdr~se (n =30)
Essais prdliminaires du dispositif Baxter d'inactivation du plasma par filtration et phototraitement par le bleu de mdthyl~ne C Naegelen, M Masse, F Konig, P Morel ETS Franche-Comtd, 1, boulevard Alexandre-Fleming, 25020 Besan~on Les objectifs de cette 6tude 6taient d'apprOcier l'intOgration, dans u n service de preparation de produits sanguins labiles, du proc6d6 Baxter d'inactivation du plasma, sa praticabilitG et enfin, de mesurer le niveau de qualit6 acceptable du plasma ainsi prOpar6. La technique s'applique ici a des plasmas issus d'aph6r6se (n = 30) ou de sang total (n = 30) ayant u n volume compris entre 230 et 310 mL. Chaque poche de plasma est connectOe st6rilement ~ u n kit (Baxter) compos6 d ' u n filtre 6cran et d ' u n e poche contenant 97 Bg de bleu de m6thylOne. Les plasmas filtr6s et additionnOs de bleu de mOthyl6ne sont phototrait6s au travers d ' u n e b o r e de photo-illumination (lumiOre blanche). Les temps moyens de traitement sont de l'ordre de 5 minutes pour la filtration et de 30 minutes pour la photo-illumination. Un contr(31e visuel est rOalis~ lors de chaque filtration. La dose lumineuse d01ivr6e est v~rifiOe toute les 5 heures de fonctionnement. La temp6rature de chaque poche est enregistr6e aprOs illumination. Au cours de nos essais, aucune anomalie de fonctionnement n'a ~t6 dOcel6e. Les r6sultats sont rOsum6s dans les tableaux ci-aprOs. Ce procOd6 est facilement int6grable dans une chaine de prOparation des produits sanguins labiles. Cependant, les rOsultats biologiques montrent une diminution du taux de certains facteurs et notamment du facteur VIII, nOcessitant la dOfinition de nouvelles caractOristiques, diff6rentes de celles actuellement applicables au plasma frais congel6. Plasma issu de sang total (n=30) Moyenne aprOs inactivation FI (g/L) FVIII (%) FXI (%) FXIIa (ng/mL) Prot C (%) Prot S (%) Frag 1-2 (nmol/L) D-dimbres (ng/mL)
1,93 49 55 1,24 90 96 1,84 249
Poche traitde/poche contr61de 0,63 0,6 0,6 0,82 0,91 1,05 1,08 0,9
F1 (g/L) FvnI (%)
FXI (%) FXlla (ng/mL) Prot C (%) Prot S (%) Frag 1-2 (tool/L) D-dim~res (ng/mL)
Moyenne aprOs inactivation
Poche trait~e/poche contrfl&
1,58
0,54 0,62 0,62 0,82 0,88 0,96 1,01 0,87
57 60 1,3 91 100 1,22 188
023-2
Qualitd du plasma aprOs viro-attdnuation par le bleu de mdthyt~ne P Sedillo 1, A Girard 1, V Lefevre ~, E Lebrun 1, A Batho ~, B Pelletier 1, D Filleau 2, A R i d e a u ~ 1Etablissement de transfusion sanguine de Basse-Normandie, 1, rue Professeur-Rousselot, 14000 Caen ; 2laboratoires Baxter Objectifs : 6valuer l'impact d ' u n proc6d6 (Pathinact®-Baxter) de viroatt6nuatton du plasma par le bleu de m6thyl6ne sur la qualit6 des produits obtenus. Matdriel et mdthodes : trente plasmas issus de sang total et 30 obtenus par aph6r6se ont 6t6 divis6s chacun en deux sousunit~s, l'une t6moin, l'autre traitOe : filtration, addition de 10 minutes de bleu de m6thylbne et exposition de 30 minutes ~ une lumibre blanche. Des tests biologiques ont ~t6 r6alis6s pour chaque produit : facteurs V, VIII, XII, fibrinog6ne, prot6ines totales, pH. Les temp6ratures initiales et aprbs traitement et le temps de filtration ont 6galement 6t6 6tud i6s. Rdsultats des poches traitdes : Moyenne
Ecart-type Maxi
Mini
Temps de filtration 5,09 3,36 15 2,33 Facteur V (%) 74 9 91 57 Facteur VIII (%) 73 8 84 53 Facteur XII (%) 67 9 85 51 Fibrinog6ne(%) 64 8 82 53 Protdines 97 3 102 92 pH 7,49 0,08 7,59 7,32 % : r6cup6rationen pourcentagecalcul6e selonla formule : (100 valeurdu t6moin- valeurde l'6chantillon)x 100)/valeurt6moin
n 29 21 21 21 20 21 27
Conclusion : Aucune difference statistiquement significatire n'a 6t~ observ6e selon l'origine du plasma (sang total ou aph6r6se). Les taux moyens de rOcup~ration des diff6-
Transfus Clin Biol 1998 ; 5 (Suppl 1)
Session 23 - Att6nuation virale des produits sanguins labiles facteurs de coagulation sont sup6rieurs ~ 64 %, valeurs conformes a celles attendues. Par ailleurs, les temps de filtration sont d6pendants de la contamination cellulaire initiale, donc du s6parateur utilis6. r e n t s
209S
cessit6 de fabrication du PVA SD du groupe O, certains pays ayant d6cid6 de preparer exclusivement d u PVA SD des groupes A et AB.
023-4 023-3
Influence des groupes sanguins sur le rendement de production du plasma viro-attdnud par les solvants-ddtergents JP Maurel, B Daze~ Y Piquet, G Vezon Etablissement de transfusion sanguine d'Aquitaine, BP 24, place Amdlie-Raba-Ldon, 33035 Bordeaux Le plasma viro-att6nu6 par traitement au solvant-d6tergent (PVA SD) est pr6par6, depuis 1992, sur le site transfusionnel de Bordeaux. Le service de production est r6gulibrement confront6 au probl6me d'approvisionnement en plasma de groupe O et au stock de PVA SD de ce groupe. Nous avons donc 6tudi6 les rendements de fabrication en fonction des diff6rents groupes sanguins. I1 apparait qu'il existe une diff6rence entre les plasmas de groupe O et les plasmas des autres groupes (A, Bet AB). En effet, il a 6t6 constat6 que les sujets de groupe O pr6sentent u n taux de facteur VIIlc inf6rieur a la normale. Aussi, pour respecter la norme du produit fini (F VIIIc _> 0,7 UI/mL), nous devons int6grer une 6tape de concentration par ultrafiltration. Cette 6tape pr6sente trois inconv6nients majeurs : celui de rallonger le temps de fabrication ; celui d'introduire u n facteur de risque en termes de rejet de fabrication ; celui d'obtenir une productivit6 inf6rieure pour les lots de PVA SD de groupe O. Nous avons 6tudi6 la r6partition des plasmas - mati6re premi6re ,~ que nous recevons des diff6rents 6tablissements de transfusion sanguine fran~ais, pour les plasmas de groupe O, en fonction du taux de facteur VIIIc sur le pool de d6part et la n6cessit6 de l'6tape de concentration finale avant r6partition du produit. Les r6sultats obtenus montrent que plus de 80 % de la production des PVA SD de groupe O doivent subir l'6tape de concentration. De ce fait, la productivit6 (nombre de poches produites par litre de plasma) qui 6tait de 313 _+28 poches pour les plasmas des groupes A, B et AB, contre 264 + 27 pour les PVA SD de groupe O (donn6es 1996). Les r6sultats 1997 montrent une baisse de cette productivit6, qui est respectivement de 305 + 17 poches pour les groupes A, Bet AB, et de 256 _+14 pour les PVA SD de groupe O. La baisse observ6e en 1997 est li6e a une diminution du taux de facteur VIIIc au niveau du plasma de d6part. Cette constatation nous am6ne ~ nous interroger sur la n6-
Transfus Clin Bio11998 ; 5 (Suppl 1)
Etude comparative des marqueurs de l'activation de la coagulation prdsents dans le plasma viro-inactivd et le plasma sdcurisd utilisds au cours d'dchanges plasmatiques T Bibi-Triki 1, T Vu2, D N o u r 1, ML Scrobohacci 2, A Bussel I
1Site transfusionnel, hfipital Saint-Louis, 1, avenue Claude-Vellefaux, 75010 Paris ; 21aboratoire d'hdmatologie, h6pital Saint-Louis, Paris Objectifs : comparer les marqueurs de l'activation de la coagulation (MAC) pr6sents : in vitro :dans chaque unit6 de plasma viro-inactiv6 (PVI) ou de plasma s6curis6 (PS) utilis~e ; in vivo : chez les malades pr61ev6s avant et apr6s 6changes plasmatiques (EP) effectu6 avec plasma (PVI ou PS) versus albumine a 4 %. Mdthodes : les MAC ont 6t6 dos6s dans 197 unit6s de plasma viro-inactiv6 provenant de 16 lots et 73 unit6s de plasma s6curis6. Vingt proc6dures d'6changes plasmatiques effectu6es chez dix patients ont 6t6 6tudi6es : dix ont 6t6 effectu6es avec de l'albumine, huit avec du plasma viro-inactiv6 et deux avec du plasma s6curis6. Quatre MAC ont 6t6 mesur6s : D dim6res (DD), fragments de prothrombine (F1 +2), complexes thrombine-antithrombine (TAT) et monom6res de fibrine (MF). Rdsultats : les r6sultats de l'6tude in vitro sont r6sum6s dans le tableau ci-apr6s. -
-
DD* (ug/mL) PVI (n = 197) PS (n = ?3)
2,14-+0,8 2,02 -+0,23 p = 0,23 * moyennes_+6cart-type
F1+2* (mnol/L) 1,77_+0,76 7,08 -+22,98 p < 0,0013
TAT* (ug/mL) 2,85-+1,3 8,83 -+14,66 p < 0,0001
Les monom~res de fibrine ne sont pas pris en compte car le test n'est pas quantitatif ; les r6sultats montrent toutefois que ce marqueur est rarement augment6. Parmi les autres marqueurs, les complexes thrombine-antithrombinesont le plus souvent augment~s suivis des fragments de prothrombine et des D dim6res. Selon l'analyse statistique, les MAC sont plus souvent pr6sents dans le plasma s6curis6 que dans le plasma viro-inactiv6.
Attdnuation virale des produits sanguins labiles Coordonnateur
• G Andreu
O23-1
Plasma issu d' aphdr~se (n =30)
Essais prdliminaires du dispositif Baxter d'inactivation du plasma par filtration et phototraitement par le bleu de mdthyl~ne C Naegelen, M Masse, F Konig, P Morel ETS Franche-Comtd, 1, boulevard Alexandre-Fleming, 25020 Besan~on Les objectifs de cette 6tude 6taient d'apprOcier l'intOgration, dans u n service de preparation de produits sanguins labiles, du proc6d6 Baxter d'inactivation du plasma, sa praticabilitG et enfin, de mesurer le niveau de qualit6 acceptable du plasma ainsi prOpar6. La technique s'applique ici a des plasmas issus d'aph6r6se (n = 30) ou de sang total (n = 30) ayant u n volume compris entre 230 et 310 mL. Chaque poche de plasma est connectOe st6rilement ~ u n kit (Baxter) compos6 d ' u n filtre 6cran et d ' u n e poche contenant 97 Bg de bleu de m6thylOne. Les plasmas filtr6s et additionnOs de bleu de mOthyl6ne sont phototrait6s au travers d ' u n e b o r e de photo-illumination (lumiOre blanche). Les temps moyens de traitement sont de l'ordre de 5 minutes pour la filtration et de 30 minutes pour la photo-illumination. Un contr(31e visuel est rOalis~ lors de chaque filtration. La dose lumineuse d01ivr6e est v~rifiOe toute les 5 heures de fonctionnement. La temp6rature de chaque poche est enregistr6e aprOs illumination. Au cours de nos essais, aucune anomalie de fonctionnement n'a ~t6 dOcel6e. Les r6sultats sont rOsum6s dans les tableaux ci-aprOs. Ce procOd6 est facilement int6grable dans une chaine de prOparation des produits sanguins labiles. Cependant, les rOsultats biologiques montrent une diminution du taux de certains facteurs et notamment du facteur VIII, nOcessitant la dOfinition de nouvelles caractOristiques, diff6rentes de celles actuellement applicables au plasma frais congel6. Plasma issu de sang total (n=30) Moyenne aprOs inactivation FI (g/L) FVIII (%) FXI (%) FXIIa (ng/mL) Prot C (%) Prot S (%) Frag 1-2 (nmol/L) D-dimbres (ng/mL)
1,93 49 55 1,24 90 96 1,84 249
Poche traitde/poche contr61de 0,63 0,6 0,6 0,82 0,91 1,05 1,08 0,9
F1 (g/L) FvnI (%)
FXI (%) FXlla (ng/mL) Prot C (%) Prot S (%) Frag 1-2 (tool/L) D-dim~res (ng/mL)
Moyenne aprOs inactivation
Poche trait~e/poche contrfl&
1,58
0,54 0,62 0,62 0,82 0,88 0,96 1,01 0,87
57 60 1,3 91 100 1,22 188
023-2
Qualitd du plasma aprOs viro-attdnuation par le bleu de mdthyt~ne P Sedillo 1, A Girard 1, V Lefevre ~, E Lebrun 1, A Batho ~, B Pelletier 1, D Filleau 2, A R i d e a u ~ 1Etablissement de transfusion sanguine de Basse-Normandie, 1, rue Professeur-Rousselot, 14000 Caen ; 2laboratoires Baxter Objectifs : 6valuer l'impact d ' u n proc6d6 (Pathinact®-Baxter) de viroatt6nuatton du plasma par le bleu de m6thyl6ne sur la qualit6 des produits obtenus. Matdriel et mdthodes : trente plasmas issus de sang total et 30 obtenus par aph6r6se ont 6t6 divis6s chacun en deux sousunit~s, l'une t6moin, l'autre traitOe : filtration, addition de 10 minutes de bleu de m6thylbne et exposition de 30 minutes ~ une lumibre blanche. Des tests biologiques ont ~t6 r6alis6s pour chaque produit : facteurs V, VIII, XII, fibrinog6ne, prot6ines totales, pH. Les temp6ratures initiales et aprbs traitement et le temps de filtration ont 6galement 6t6 6tud i6s. Rdsultats des poches traitdes : Moyenne
Ecart-type Maxi
Mini
Temps de filtration 5,09 3,36 15 2,33 Facteur V (%) 74 9 91 57 Facteur VIII (%) 73 8 84 53 Facteur XII (%) 67 9 85 51 Fibrinog6ne(%) 64 8 82 53 Protdines 97 3 102 92 pH 7,49 0,08 7,59 7,32 % : r6cup6rationen pourcentagecalcul6e selonla formule : (100 valeurdu t6moin- valeurde l'6chantillon)x 100)/valeurt6moin
n 29 21 21 21 20 21 27
Conclusion : Aucune difference statistiquement significatire n'a 6t~ observ6e selon l'origine du plasma (sang total ou aph6r6se). Les taux moyens de rOcup~ration des diff6-
Transfus Clin Biol 1998 ; 5 (Suppl 1)
Session 23 - Att6nuation virale des produits sanguins labiles facteurs de coagulation sont sup6rieurs ~ 64 %, valeurs conformes a celles attendues. Par ailleurs, les temps de filtration sont d6pendants de la contamination cellulaire initiale, donc du s6parateur utilis6. r e n t s
209S
cessit6 de fabrication du PVA SD du groupe O, certains pays ayant d6cid6 de preparer exclusivement d u PVA SD des groupes A et AB.
023-4 023-3
Influence des groupes sanguins sur le rendement de production du plasma viro-attdnud par les solvants-ddtergents JP Maurel, B Daze~ Y Piquet, G Vezon Etablissement de transfusion sanguine d'Aquitaine, BP 24, place Amdlie-Raba-Ldon, 33035 Bordeaux Le plasma viro-att6nu6 par traitement au solvant-d6tergent (PVA SD) est pr6par6, depuis 1992, sur le site transfusionnel de Bordeaux. Le service de production est r6gulibrement confront6 au probl6me d'approvisionnement en plasma de groupe O et au stock de PVA SD de ce groupe. Nous avons donc 6tudi6 les rendements de fabrication en fonction des diff6rents groupes sanguins. I1 apparait qu'il existe une diff6rence entre les plasmas de groupe O et les plasmas des autres groupes (A, Bet AB). En effet, il a 6t6 constat6 que les sujets de groupe O pr6sentent u n taux de facteur VIIlc inf6rieur a la normale. Aussi, pour respecter la norme du produit fini (F VIIIc _> 0,7 UI/mL), nous devons int6grer une 6tape de concentration par ultrafiltration. Cette 6tape pr6sente trois inconv6nients majeurs : celui de rallonger le temps de fabrication ; celui d'introduire u n facteur de risque en termes de rejet de fabrication ; celui d'obtenir une productivit6 inf6rieure pour les lots de PVA SD de groupe O. Nous avons 6tudi6 la r6partition des plasmas - mati6re premi6re ,~ que nous recevons des diff6rents 6tablissements de transfusion sanguine fran~ais, pour les plasmas de groupe O, en fonction du taux de facteur VIIIc sur le pool de d6part et la n6cessit6 de l'6tape de concentration finale avant r6partition du produit. Les r6sultats obtenus montrent que plus de 80 % de la production des PVA SD de groupe O doivent subir l'6tape de concentration. De ce fait, la productivit6 (nombre de poches produites par litre de plasma) qui 6tait de 313 _+28 poches pour les plasmas des groupes A, B et AB, contre 264 + 27 pour les PVA SD de groupe O (donn6es 1996). Les r6sultats 1997 montrent une baisse de cette productivit6, qui est respectivement de 305 + 17 poches pour les groupes A, Bet AB, et de 256 _+14 pour les PVA SD de groupe O. La baisse observ6e en 1997 est li6e a une diminution du taux de facteur VIIIc au niveau du plasma de d6part. Cette constatation nous am6ne ~ nous interroger sur la n6-
Transfus Clin Bio11998 ; 5 (Suppl 1)
Etude comparative des marqueurs de l'activation de la coagulation prdsents dans le plasma viro-inactivd et le plasma sdcurisd utilisds au cours d'dchanges plasmatiques T Bibi-Triki 1, T Vu2, D N o u r 1, ML Scrobohacci 2, A Bussel I
1Site transfusionnel, hfipital Saint-Louis, 1, avenue Claude-Vellefaux, 75010 Paris ; 21aboratoire d'hdmatologie, h6pital Saint-Louis, Paris Objectifs : comparer les marqueurs de l'activation de la coagulation (MAC) pr6sents : in vitro :dans chaque unit6 de plasma viro-inactiv6 (PVI) ou de plasma s6curis6 (PS) utilis~e ; in vivo : chez les malades pr61ev6s avant et apr6s 6changes plasmatiques (EP) effectu6 avec plasma (PVI ou PS) versus albumine a 4 %. Mdthodes : les MAC ont 6t6 dos6s dans 197 unit6s de plasma viro-inactiv6 provenant de 16 lots et 73 unit6s de plasma s6curis6. Vingt proc6dures d'6changes plasmatiques effectu6es chez dix patients ont 6t6 6tudi6es : dix ont 6t6 effectu6es avec de l'albumine, huit avec du plasma viro-inactiv6 et deux avec du plasma s6curis6. Quatre MAC ont 6t6 mesur6s : D dim6res (DD), fragments de prothrombine (F1 +2), complexes thrombine-antithrombine (TAT) et monom6res de fibrine (MF). Rdsultats : les r6sultats de l'6tude in vitro sont r6sum6s dans le tableau ci-apr6s. -
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DD* (ug/mL) PVI (n = 197) PS (n = ?3)
2,14-+0,8 2,02 -+0,23 p = 0,23 * moyennes_+6cart-type
F1+2* (mnol/L) 1,77_+0,76 7,08 -+22,98 p < 0,0013
TAT* (ug/mL) 2,85-+1,3 8,83 -+14,66 p < 0,0001
Les monom~res de fibrine ne sont pas pris en compte car le test n'est pas quantitatif ; les r6sultats montrent toutefois que ce marqueur est rarement augment6. Parmi les autres marqueurs, les complexes thrombine-antithrombinesont le plus souvent augment~s suivis des fragments de prothrombine et des D dim6res. Selon l'analyse statistique, les MAC sont plus souvent pr6sents dans le plasma s6curis6 que dans le plasma viro-inactiv6.