Ueber das Trypsin (Enzym des Pankreas)

Ueber das Trypsin (Enzym des Pankreas)

Volume 62, Supplement FEBS LETTERS 4 February 1976 W. Kiihne: Ueber dtls Trypsin (Enzym des Pmkreas), vanW, Kiihne. Cl. Bern Pankreassaft a I d h...

277KB Sizes 13 Downloads 96 Views

Volume 62, Supplement

FEBS LETTERS

4 February 1976

W. Kiihne:

Ueber dtls Trypsin (Enzym des Pmkreas), vanW, Kiihne. Cl. Bern Pankreassaft

a I d hat sehr richtig eine eiweissartige

angegeben , dass Alkohol

Substanz ausfille,

aus

die sicb in Wasser

leicht wieder l&e und C or v is a rt zeigte, dass der aus dem Driiseninfuse so magen

gefhllte

Kiirper

fi.ir Albuminstoffe

dass die Alkoholfallung setzend, winnung Pepsins kenntniss

das von ibm

nicht

nur

peptonisirend,

zu vermuthenden

in der Magenschlrimhaut, erreicht,

sondern

such zer-

Enzyms,

etwa wie des

war aber damit keino weitere Er-

denn sehr einfache Versuche ergaben

die fragliche Materie der bekannten

Verdauungsver-

zwar lange bekannt,

auf Eiweiss wirke ; fiir die Ge-

Leucin- und Tyrosin-bildend des im Panlrreas

entdeckte

Es war mir

besitze.

sich anscheinend

sofort, dass

selbst zersetze unter Bildung

pankreatischen’Verdauungsproducte.

Nicht anders ver-

hilt sich die nach v. Wit t i ch’s Verfahren aus dem Glycerinauszuge mit

Alkobol

der Driisen

ebenso

gefgllte Substanz,

das nach Alkoholbehnndlung

in Glycerin wiederholt gelijste und mehrfach mit Alkohol

gefgllte Prod&,

welches H il f n e r analysirte.

Aus H e i d e n ha i n’s subtilen Untersuchungeu sache bekannt,

dass das Pankreas

zym, sondern ein Zymogen enth8lt. lebensfrisches

Pankreas

sogleich

mit Glaspulver

und absoluiem

so behandelten

Driise bereitetes

ebenso eine mit I-procentiger warmes Pankreas

E8

ist die wichtige That-

in seinen Zellen kein fertiges EnNach meinen Erfahrungen

wirksam,

Alkohol zerreibt. Wasserextrakt

Ein bei O” aus

der

wirkt sofort verdauend,

Sodaliisung gewonnene Liisung.

mit Glaspulver und

wird

wenn man es noch warm

Schnee zerrieben,

Lebens-

giebt gloich

Volume 62, Supplement

FEBSLETTERS

4 February 1976

Ueber dss Trypsin.

7

nach &m Thauen ein milchiges, alkaliaches Filtrat, den verdaut,

das erst in 3 Stun-

nnd liefert in der KIilte laogsam mit sehr kaltem Alkohol

versetzt eine F&Bung, deren Wasserlijsung

nicht

schneller

gegen sofort wenn der Alkohol nur einige Minaten eingewirkt hat. kohol

aach Hoppe

spaltbarer

aus dem Eisextrakte

Ob der unter gewiihnlichen K&per

K&per,

-S ey le r’s Beohachtangen,

d-urch kalte Alkoholfiillung Bllbare

da-

Heid e n h ai n’s Zymogen ist also ein aach durch Al-

bei gewissen Temperaturen

Vitellin

wirkt,

bei miissiger W&me

des Pankreas

misch von Substanzen,

und man

selbst

die darunter

Spaltung

kann

es

der Driise gewinnen.

Temperaturverhlltnissen das Enzym

ob ferner

derum erst durch weitere

etwa wie das

mit Alkobol

sei, oder ein Ge-

wirksamste nicht wie-

das Enzym liefere, erhellt hieraas

noch nicht. Alle bisher kreatin)

fur das Eiweiss-zersetzende

der Bauchspeicheldriise

Beimengung

mindestens

lither

Menge,

sebr

erheblich

nach Loslicbkeit

von den bekannten

er deren Zusammensetzang

in

theilt.

bei 0’ wieder

Alkohol lange bebandelte massiges Ansluern nicht Eisessig

lost den

allmilhlich Zastande

Reactionen

abweicht,

obwohl

Fiir derartige Stoffe empfiehlt sich Driisenextrakten

Ver-

gefallte,

zagesetzt wird. Grosser Ueberschass von

Niederschlag

fast klar,

wenn sofort zageftigt,

odcr ausgcwaschen

Ftillung

worden.

des Pankreasleakords

harzigen Masse zasammen

such mit Wasser

lich bleibt.

nun als in reich-

endlich mit ganz entwiissertem Sabstanz wird aas wiissriger Losung darch gefallt, ziemlich vollst%ndig, wenn bis zu

undurchsichtige

za einer

and anderen

Albuminstoffen

dargest.ellten

wenn die F&hung abfiltrirt

schneeweisse ,

enthalten

Eiweissstoff

geloste,

1 pCt. und mehr Essigs2ure

nicht,

(das sog. Pan-

Die wiederholt mit Alkohol aus den anter

aller Selbstverdauung

Wasser

Korper

einen ganz indifferenten

der jedoch

der Name L e u kold. meidung

gehaltenen

Enzym

und kann

gar Die klebt

in diesem

gewascben werden, worin sie fortan unltis-

Nicht vollig aasgewaschen baftet ihr noch so vie1 von dem

Enzym, das ich T ry p sin nennen will, an, dass sie im warmen Zimmer auf dem Filter. zerfliesst,, wobei sich ein TyrosinPeptonbrei

bildet.

Gut gewascben

und

Leucin-haltiger

hat sie gar kein Verdauangsver-

E9

Volume 62, Supplement

4 February 1976

FEBS LETTERS

W. Riihne:

8 m6gen,

vollends

nicht,

wcnn sie einmal in Soda von 1 pCt. gelilst

und wieder durch Essigsanre getrennte

L8snng

reinere Trypsin

liefert

geftlllt wnrde.

Die von dem Leakoid

nun durch Alkohol

gebende Masse.

gefgllt eine bereits vie1

Der Selbstverdanung

tiberlassen

det sie zwar anch Pept,on nnd die iibrigen Verdaunngsprodukte, nicht

in der grossen Menge

wie vorher.

halte von 1 pCt. Essigsl,nre steht

ein

nener

Wird

sie bei einem Qe-

cinige Zeit auf 40° C. erwarmt,

feinflockiger ,

gran

bilaber

dnrchsichtiger

so ent.-

Niederschlag

in

mlssiger Menge vnn einem zweiten nicht

dnrch Alkohol gefilllt besteht ans Pepton,

Rest

Enzym.

Man befreit

gleitern, nnd reinigt Das Trypsin

das Letztere

durch

es dnrch wiederholte

ist in Wasser

leicht

Li%nng

gndert

kochen zerfallt das Trypsin

lijslich und coagulirt

daran

nichts.

dessen Ent,fcrnnng nicht gelnngen, lange solches Pepton da ist, erst da8 Trypsin

(vergl. nnten).

zn thnn habe, was leicht vorkommen erst beseitigt

erhiilt, man durch

und dann das Pepton,

werden.

fractionirte

Alkohol-

ist ferner

in reinem Glycerin

Das

ganz nnliislich,

So lange also iiber Trypsin reine

Trypsin

wghrend Pepton

sich

filtrirtes Glycerin mit Alkohol

giebt, ist freies Pepton vorhanden.

Trypsin

hei 40’ C. digerirt

So

die letzten Fallnngen

gel&t trliben sich also beim Kochen nicht mehr.

noch eine Trtibnng

Anf-

beigemischtem Pepton,

in Wasser darin l&t.

E 10

Bei einmaligem

wie das Antipepton

muss nach jeder Trypsindarstellnng

tillnng

wie Ei-

Eiweiss und reichlich Pep-

Der Verdacht, dass man es mit praeexistentem, kann,

Be-

Wochenlange Digestion such

in coagulirtes

t,on, welches sic11 ahnlich verhhlt

nnd dem

von seinen

F%llnng mit, Alkohol.

Weiss nnr in sanrer L6snng vollkommen. in alkalischer

vie1 Lencin

Dialyse

mit Waser

oder Sodalfisnng

bleibt. v6llig nnvcrtindert,

beliebig

namcntlich

lange

bildet sich

4 February 1976

FEBS LETTERS

Volume 62, Supplement

Ueber dae Trypsin. keine

Spur

Pepton,

van

violett. werdanden entdecken

Tyrosin,

Karpers,

odcr des mit Cl und Br

der au& in kleinsten

Spuren so leicht zu

ist. Aus der Lijsung durch Eindunsten

stellt das Trypsin

einen

schwach stqhgelb

K&per dar, von eigenthllmlicher leichten

Leucin

9

Elasticitiit,

bei 40’ C. gewonnen,

geftirbten,

durchsich8igen

der Art, dass es zu einer

wolligen Masse aufbriickelt.

Trypsin

lbst Fibrin

beim Erwtirmen fast. momcntan

Menge, dass man mit ausgepresstrm, zum Ende

kommt,

denn

und in s&her

ungekochtem Fibrin eigmtlich

die anscheinend

ganz

Masse, die sich zulet,zt dabei bildet, besteht in Wirklichkeit Peptontropfen

Substanz anhaften ringer

hebliche Mengen

verdauen.

Wenn

unverdaut,er

unter Hinterlassung

Mit der Lijsung kann

ganz schwinden

aus znhen

kleinen Flserchen

und sich in Wasser

Reste auf&en.

Wirkung

welche

und Schlieren.

nir

steife festgepfropfte

sehr ge-

man abermals sehr er-

es mir such nie gelungen ist die so fand ich sie endlich doch

zu sehen,

SO

verlangsamt,

dass ich noch nicht fiir eine viillige Unveranderlichkeit

des Enzyms

bei seiner Action einstehrn

liisung sind neben

Pepton,

miichte.

Antipepton,

In der Verdauungs-

Leucin,

Tyrosin und der mit

Br violett werdende Kiirper enthalten. Qenauere nigten

Versuche

Trypsin

haben

pankreasinfuse

mit reinen best.iitigt ,

vermuthen

Pepsinpepton

liessen.

Eiweissstoffen was lltere

und

dem gerei-

Erfahrungen

mit dem

nlmlich, .dass zunachst

von dem

nicht zu unterscheidende

Kiirper entstchen

und dass es

diese sind, welche in Antipepton und die tibrigen meist krystallinischen Zersetzungsprodukte Pepsinverdauung

zerfallen.

Ein derartiger

echter Eiweissstoffe nicht

Process kommt bei der

vor, diese liefert vielmehr

ein etwas grijsseres Gewicht Pepton, als dem in Verdauung Albumin

entspricht,

(durch

Spur von Amidoslluren, achtet , Beimengungen haut

zu vermeiden.

gespalten,

und

aus der Nach

Drtisensubstanz

vollendeter coagulirtes

das

gegebenen

Fibrin

Magenschleimist das Ei-

oder in Pepsinpepton nach

Antipepton , welches unter

keine

Vorsicht be-

der

Trypsinverdauung

verMrendet wurde) allem Anschein denn

beim

wenn man die selbstverstandliche

Weiss (gleichviel oh genuines, gewandeltes

H,O-Aufnahme)

um-

in zwei Halften

keinen

Umstilnden

El1

Volume

4 February

FEBSLETTERS

62, Supplement

Ueber

10 dnrch Trypsin

Trypnin.

weiter ver&ndert wird, hat

Gewicht des in Verdannng dnrch Trypsin

ha

Gegebenen.

ziemlich genan

Lencin

das halbe

nnd Tyrosin

werden

nicht weiter zersetzt.

Das Trypsin verwandelt

vorher mit SBnren bis zn einem gewiswn

Grade geqnelltes Collagen in das von S c hw e d e P vor 9 Jahren schriebene. Leimpepton. dannng

Dabei

bildet

sich, ganz wie bei der Ver-

fertiger Gelatine, weder Lencin noch ~lycocoll.

Bindegewebe wird von Trypsin

nicht

be-

gel&t,

Unvergndertes

aber die eiweisshaltigen

Einlagernngen

wt+rden vollkommen darans entfrrnt.

dnrch Trypsin

verdant

Hlmoglobin

wird

unter HBmat,inbildung.

Auf Stllrke nnd Dextrin wirkt Trypsin nicht. Fanlendes Eiweiss enthtilt. kein Trypsin nnd (gewisse Kilsesort.en ansgenommen) Enzyme.

tiberhanpt

keine

Das Gleiche

Blute,

drtisen des Mesenteriums Heidelberg,

E 12

Alkoholbehandlnng

gilt von den

sonders reichlich anftretenden Im arteriellen

die

tiberstehenden

bei der Pankreasftinlniss

be-

Bacterien. in den Speicheldrtisen

nnd

den

Lymph-

konnte kein Trypsin gefnnden werden.

den 6. Mkz

1876

1976