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070 Approche ultrastructurale de l’inflammation du muscle lisse bronchique dans l’asthme allergique
Asthme -Allergie
069 Modulation, par l'acide rétinoïque all-trans incorporé dans des liposomes (Lipo-ATRA), de la réaction pulmonaire allergique chez la souris
l
INSERM Unité 700, Faculté de MédecineXavier Bichat, Paris, France. Plateau de Molphologie, INSERM Institut Fédératifde Recherche 02, Hôpital Bichat, Paris, France. Service dAnatomo-pathologie,Hôpital Bichat, Paris, Francc.
Introduction : Les rétinoïdes régulent de nombreuses fonctions au niveau de l'épithélium respiratoire et des cellules impliquées dans la réaction immuno-inflammatoire allergique (lymphocytes T, cellules dendritiques, éosinophiles). Cependant, leur capacité à moduler in vivo les manifestations de l'asthme n'a pas été étudiée. Méthodes : Des souris mâles de la lignée Balblc ont été immunisées par voie intrapéritonale avec de l'ovalbumine (OVA) et provoquées 4 fois par voie intra-nasale avec du sérum physiologique ou de I'OVA. Les animaux ont été traités par voie intrapéritonéale avec 10 mglkgljour de Lipo-ATM, ou avec des liposomes vides, soit de façon aiguë (avant chaque provocation intra-nasale), soit chronique (pendant la période nécessaire à l'immunisation et aux provocations antigéniques). Vingt-quatre heures après la dernière provocation, I'hyperréactivité bronchique (HBR) en réponse à la métacholine, la réaction immuno-inflammatoire (IgE sériques, éosinophilie pulmonaire, libération &IL-4, IL-5, IL-13, éotaxine, dans le lavage bronchoalvéolaire - LBA -), et le remodelage bronchique (taux de fibronectine et mucines et activités MMP-2 et MM-9 dans le LBA, contenu du collagène dans le poumon) ont été analysés. Résultats : Le Lipo-ATRA, administré de façon aiguë, augmente du LBA et du tissu, les taux sériques d'IgE et la BHR, l'éo~ino~hilie la libération d'IL-4, IL-5, &IL-13 et de fibronectine dans le LBA. De façon opposée, le traitement chronique avec du Lipo-ATRA inhibe l'ensemble de ces réponses. Indépendamment du protocole de traitement (aigu ou chronique), le Lipo-ATRA supprime la libération d'éotaxine et augmente celle des mucines dans le LBA, mais ne modifie pas le dépôt pulmonaire de collagène et l'activité MMP-2 et MMP-9 dans le LBA. Conclusion : Le Lipo-ATM module positivement ou négativement I'HRB et la réponse immuno-inflammatoire allergique en fonction du moment et de la durée du traitement, suggérant une action sur des cibles cellulaires distinctes. Les effets du Lipo-ATRA au niveau de l'épithélium respiratoire (inhibition de l'éotaxine et augmentation des mucines) sont indépendants de ses actions opposées vis-à-vis de la réaction immuno-allergique. Enfin, dans ce modèle, I'HRB et la réponse immuno-inflammatoire sont associées, mais indépendantes du remodelage tissulaire.
880
Rev Mal Respir 2005 ;22 : 841-903
070 Approche ultrastructurale de l'inflammation du muscle lisse bronchique dans I'asthme allergique
H. Bégueret, P. Berger, P.O. Girodet, J.M. Vernejoux, R. Marthan, J.M. T u n o n de Lara Laboratoire de Physiologie Cellulaire Respiratoire, INSERM E356 Université Kctor Ségaien Bordeaux 2, Bordeaux, France. [email protected]
Introduction : Dans l'asthme, le muscle lisse bronchique est infiltré par différentes cellules inflammatoires qui peuvent interagir directement avec les cellules musculaires lisses (CML), influençant leur fonction et contribuant à leur remodelage, mais de telles interactions sont encore mal connues. Nous avons réalisé une analyse morphométrique de la tunique musculaire lisse bronchique chez des patients asthmatiques par microscopie électronique à transmission et avons étudié les interactions directes entre les cellules musculaires lisses et les cellules inflammatoires. Méthodes: i l sujets asthmatiques et 7 contrôles normaux ont été recrutés pour l'étude et ont subi une fibroscopie bronchique. Sur les biopsies recueillies pour l'analyse ultrastructurale, la tunique musculaire lisse était analysable chez 8 patients asthmatiques et 6 contrôles normaux. Les faisceaux de cellules musculaires lisses étaient orientés tantôt dans un plan longitudinal tantôt dans un plan transversal tantôt tangentiellement. Des photographies numérisées ont été réalisées et les mesures effectuées avec le logiciel halysisa Soft Imaging System. Résultats : La taille moyenne des CML et l'épaisseur moyenne de leur membrane basale étaient significativement plus grandes chez les patients asthmatiques que chez les contrôles (9,71 us 6,93 Pm, p = 0,02 et 1,54 us 0,69 Pm, p = 0,02, respectivement). Chez les patients asthmatiques, la matrice extra-cellulaire était fréquemment organisée sous formes de larges dépôts compacts de collagène entre les CML. La tunique musculaire lisse était infiltrée par des mastocytes, des lymphocytes, des monocyteslmacrophages et de rares polynucléaires neutrophiles. Des contacts étroits ont été observés entre des mastocytes activés et des CML, et plus discrètement entre des lymphocytes et des CML. Des myofibroblastes ont été observés chez 6 des 8 patients asthmatiques entre les faisceaux de CML, certains présentant des contacts étroits avec des mastocytes et des CML. Conclusions : Cette analyse ultrastructurale montre que, dans l'asthme, il existe des signes importants de remodelage de la tunique musculaire lisse bronchique avec des dépôts importants de collagène. Les CML sont en contact étroit avec des mastocytes activés, des lymphocytes et des myofibroblastes qui peuvent jouer un rôle direct dans ce processus.
069 Modulation, par l'acide rétinoïque all-trans incorporé dans des liposomes (Lipo-ATRA), de la réaction pulmonaire allergique chez la souris
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INSERM Unité 700, Faculté de MédecineXavier Bichat, Paris, France. Plateau de Molphologie, INSERM Institut Fédératifde Recherche 02, Hôpital Bichat, Paris, France. Service dAnatomo-pathologie,Hôpital Bichat, Paris, Francc.
Introduction : Les rétinoïdes régulent de nombreuses fonctions au niveau de l'épithélium respiratoire et des cellules impliquées dans la réaction immuno-inflammatoire allergique (lymphocytes T, cellules dendritiques, éosinophiles). Cependant, leur capacité à moduler in vivo les manifestations de l'asthme n'a pas été étudiée. Méthodes : Des souris mâles de la lignée Balblc ont été immunisées par voie intrapéritonale avec de l'ovalbumine (OVA) et provoquées 4 fois par voie intra-nasale avec du sérum physiologique ou de I'OVA. Les animaux ont été traités par voie intrapéritonéale avec 10 mglkgljour de Lipo-ATM, ou avec des liposomes vides, soit de façon aiguë (avant chaque provocation intra-nasale), soit chronique (pendant la période nécessaire à l'immunisation et aux provocations antigéniques). Vingt-quatre heures après la dernière provocation, I'hyperréactivité bronchique (HBR) en réponse à la métacholine, la réaction immuno-inflammatoire (IgE sériques, éosinophilie pulmonaire, libération &IL-4, IL-5, IL-13, éotaxine, dans le lavage bronchoalvéolaire - LBA -), et le remodelage bronchique (taux de fibronectine et mucines et activités MMP-2 et MM-9 dans le LBA, contenu du collagène dans le poumon) ont été analysés. Résultats : Le Lipo-ATRA, administré de façon aiguë, augmente du LBA et du tissu, les taux sériques d'IgE et la BHR, l'éo~ino~hilie la libération d'IL-4, IL-5, &IL-13 et de fibronectine dans le LBA. De façon opposée, le traitement chronique avec du Lipo-ATRA inhibe l'ensemble de ces réponses. Indépendamment du protocole de traitement (aigu ou chronique), le Lipo-ATRA supprime la libération d'éotaxine et augmente celle des mucines dans le LBA, mais ne modifie pas le dépôt pulmonaire de collagène et l'activité MMP-2 et MMP-9 dans le LBA. Conclusion : Le Lipo-ATM module positivement ou négativement I'HRB et la réponse immuno-inflammatoire allergique en fonction du moment et de la durée du traitement, suggérant une action sur des cibles cellulaires distinctes. Les effets du Lipo-ATRA au niveau de l'épithélium respiratoire (inhibition de l'éotaxine et augmentation des mucines) sont indépendants de ses actions opposées vis-à-vis de la réaction immuno-allergique. Enfin, dans ce modèle, I'HRB et la réponse immuno-inflammatoire sont associées, mais indépendantes du remodelage tissulaire.
880
Rev Mal Respir 2005 ;22 : 841-903
070 Approche ultrastructurale de l'inflammation du muscle lisse bronchique dans I'asthme allergique
H. Bégueret, P. Berger, P.O. Girodet, J.M. Vernejoux, R. Marthan, J.M. T u n o n de Lara Laboratoire de Physiologie Cellulaire Respiratoire, INSERM E356 Université Kctor Ségaien Bordeaux 2, Bordeaux, France. [email protected]
Introduction : Dans l'asthme, le muscle lisse bronchique est infiltré par différentes cellules inflammatoires qui peuvent interagir directement avec les cellules musculaires lisses (CML), influençant leur fonction et contribuant à leur remodelage, mais de telles interactions sont encore mal connues. Nous avons réalisé une analyse morphométrique de la tunique musculaire lisse bronchique chez des patients asthmatiques par microscopie électronique à transmission et avons étudié les interactions directes entre les cellules musculaires lisses et les cellules inflammatoires. Méthodes: i l sujets asthmatiques et 7 contrôles normaux ont été recrutés pour l'étude et ont subi une fibroscopie bronchique. Sur les biopsies recueillies pour l'analyse ultrastructurale, la tunique musculaire lisse était analysable chez 8 patients asthmatiques et 6 contrôles normaux. Les faisceaux de cellules musculaires lisses étaient orientés tantôt dans un plan longitudinal tantôt dans un plan transversal tantôt tangentiellement. Des photographies numérisées ont été réalisées et les mesures effectuées avec le logiciel halysisa Soft Imaging System. Résultats : La taille moyenne des CML et l'épaisseur moyenne de leur membrane basale étaient significativement plus grandes chez les patients asthmatiques que chez les contrôles (9,71 us 6,93 Pm, p = 0,02 et 1,54 us 0,69 Pm, p = 0,02, respectivement). Chez les patients asthmatiques, la matrice extra-cellulaire était fréquemment organisée sous formes de larges dépôts compacts de collagène entre les CML. La tunique musculaire lisse était infiltrée par des mastocytes, des lymphocytes, des monocyteslmacrophages et de rares polynucléaires neutrophiles. Des contacts étroits ont été observés entre des mastocytes activés et des CML, et plus discrètement entre des lymphocytes et des CML. Des myofibroblastes ont été observés chez 6 des 8 patients asthmatiques entre les faisceaux de CML, certains présentant des contacts étroits avec des mastocytes et des CML. Conclusions : Cette analyse ultrastructurale montre que, dans l'asthme, il existe des signes importants de remodelage de la tunique musculaire lisse bronchique avec des dépôts importants de collagène. Les CML sont en contact étroit avec des mastocytes activés, des lymphocytes et des myofibroblastes qui peuvent jouer un rôle direct dans ce processus.