Diagnostic virologique d'une hépatite virale C (VHC)

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DIAGNOSTIC VIROLOGIQUE D'UNE HEPATITE VIRALE C (VHC)

Paul Deny ~ Jean-Claude Nicolas b

1. CLINIQUE [.'infection aigu~ par le virus de I' hepatite C est asymptomatique dans 90 % des cas. En Europe, I'infection isolee n'est jamais associee & une hepatite fulminante. La gravit6 des hepatites C est lice & un pourcentage tr6s important d'evolution vers la chronicit6 (65-80 %).

HEPATITES C

H6patites

asymptomatiques > 90% H6patites

chroniques~(65-80%)

H6patites

fulminantes exceptionnelles voire inexistantes

Gu6rison (20-35%)

at"

(sous traitement

T lo-4o%) Cirrhose (10 %)

Cancer (2%)

2. LE VIRUS Pendant tres Iongtemps, on a ignore la morphologie du virus de I'h6patite C en raison de sa raret6 dans les liquides biologiques et toutes les connaissances concernant ce virus dependaient de I'analyse de son genome. On a ainsi predit que ce virus appartient & la famille des flaviviridae, qu'il a une capside & symetrie icosaedrique et une enveloppe. On a pu recemment mieux caracteriser sa morphologie gr&ce & des cliches de microscopie 61ectronique.

•

El'x,

i E2/ •

Glycoprot6ines d'enveloppe

Ag du Core

ARN viral

a Laboratoire de virologie - H6pital Avicenne 125, bd de Stalingrad - 98009 Bobigny cedex b Laboratoire de virologie- H6pital Rothschild 33, b d de Picpus - 75571 Paris cedex 12

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3. LE GI~NOME Le g6nome du virus de I'h6patite C a 6t6 caract6ris6 gr&ce aux technologies de biologie mol6culaire. La connaissance du g6nome et son expression ont permis de produire des prot6ines virales qui sont utiNs6es darts le diagnostic virologique. Ce g6nome contient des g6nes de structure codant pour une proteine du core et de 2 prot6ines d'enveIoppe El, E2. II contient aussi des g~nes non structuraux (NS2, NS3, NS4, NS5) dont les produits d'expression participent & la r6plication du virus. 5' non codant

./

Capside

Portion codante

,l ,1

Glycoprot6ines d'enveloppe

3' non codant

Prot6ase et h61icase

ARN polym6rase ARN d~pendante

4. LES MARQUEURS DE L'INFECTION VIRALE Le diagnostic virologique chez I'adulte repose en premiere intention sur la detection d'anticorps anti-virus (anti-VHC) par des techniques immunoenzymatiques. La 16gislation impose actuellement que cette d6tection soit realis~e avec une trousse commerciale agr66e. A I'image du virus de I'immunod6ficience humaine, il est recommand6 en cas de depistage positif de repr61ever ie patient pour confirmer cette s6ropositivit6 par le VHC. L'6tude de la sp6cificit6 de la r6action peut 6tre appr6ciee par des techniques d'immunoblot. La recherche de I'ARN viral inscrite & la nomenclature est tr6s interessante pour : diagnostiquer en phase aigu6 une infection virale avant la s6roconversion ; - affirmer le diagnostic d'une h6patite chronique chez un immunod6prim6 (la s6rologie pouvant 6tre n6gative) ; d6finir I'existence d'une multiplication virale ; suivre I'efficacit6 anti-virale des th6rapeutiques prescrites. -

-

-

5. ~i/OLUTION DES MARQUEURS EN FONCTION DE LA PATHOLOGIE

5.1. HI~PATITE C AIGUI~ Les anticorps lgG anti-VHC persistent avec possibilit6 de diminution & long terme. L'ARN circulant va progressivement disparaftre.

Contamination

I

H~patitesC aigu~s

5.2. HI~PATITEC CHRONIQUE Le signe majeur d'une hepatite chronique est la persistance de I'ARN circulant avec pr6sence d'anticorps anti-VHC.

Contamination

I

H~patiteC chronique

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6. TRAITEMENT D'UNE HI:!:PATITE C Chaque fois que sera mis en evidence une replication virale (presence d'ARN circulant) en cas d'hepatite aigue ou d'hepatite chronique C, il faudra discuter l'instauration d'une therapeutique. Uefficacite de ce traitement sera suivi par la detection de I'ARN du VHC circulant. II existe deux situations cliniques en regard de I'efficacite therapeutique : Les bons repondeurs vont negativer leur replication virale et normaliser leurs transaminases apr~s un traitement par I'interferon.

Chez les mauvais repondeurs, la replication virale est insensible & I'action de I'interferon et I'hepatite chronique persiste.

JINTERFI~RONI

[ INTERFERON J Ac anti-HCV Ac anti-HCV I

ARNHCV /

H6patite C chronique r@ondant au traitement par l'interf6ron

H6patite C chronique ne r6pondant pas an traitement par l'interf6ron

7. GI~NOTYPAGE DES VIRUS ET TYPAGE DES ANTICORPS DU SI:!:RUM On vient de voir une grande diversite dans le pouvoir pathog~ne du VHC (forme aigu6, forme chronique, forme evoluant vers une cirrhose ou vers un cancer), dans I'efficacite du traitement par I'interferon (forme sensible et forme resistante). II semble important de tenter de correler ces differentes entites & un genotype ou un typage serologique.

7.1. LE GI~NOTYPAGE II va analyser une ou plusieurs parties du genome viral (region 5' non codante, g~ne du core, g~ne El, g~ne NS5) et sera realise par diverses techniques : polymerase chain reaction, restriction fragment lenght polymorphism, hybridation avec oligosondes, sequengage. Actuellement, au moins 6 genotypes du virus de l'hepatite C ont ete identifies. Le genotypage est realise par des laboratoires specialises capables de mettre en oeuvre des techniques de biologie moleculaire.

7.2. LE TYPAGE SI~ROLOGIQUE II consiste & analyser la reponse immunitaire du patient au moyen de peptides synthetiques de la region du core ou de la region NS4, specifiques de chacun des genotypes.

8. PRINCIPE DU TYPAGE DES ANTICORPS ANTI-VHC On caracterise la specificite des anticorps du patient vis-&-vis des proteines du virus C infectant.

Anticorps

pr6sents darts le s6rum Peptides synth6tiques sp~eifiques de type

AA AAA 0 0 O 0 0 0 G~notype G~notype G~notype G~notype G~notype

1

2

Peptides 1, 2, 3, 4, -, 6. S~rum 5

R6action

0

positive

3

4

G~notype

5

6

Peptidesl, 2, 3, 4, 5, -. Sdrum 5

Neutralisation

0 O o

0

O

@

M i s e e n 6vidence d'anticorps anti-g6notype 5 dans le s d r u m

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