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Nouvelle action des hormones thyroïdiennes : régulation du métabolisme des glucocorticoïdes
Disponible en ligne sur
ScienceDirect www.sciencedirect.com Annales d’Endocrinologie 78 (2017) 207–210
SFE Poitiers 2017 Communications orales et présentations orales de poster
Thyroïde 1夽
CO-001
CO-002
Rôle de la NADPH oxydase 4 (NOX4) dans la répression de l’expression du transporteur de l’iode (NIS) dans les cancers papillaires de la thyroïde porteurs de la mutation BRAFV600E
Nouvelle action des hormones thyroïdiennes : régulation du métabolisme des glucocorticoïdes
Dr C. Buffet ∗ , J. Cazarin De Menezes , Dr L. Barde , R. Corre , F. Hecht , Dr R. Andrade Louzada Neto , Dr A. Al Ghuzlan , Dr D. Hartl , Dr S. Leboulleux , Pr M. Schlumberger , Dr C. Dupuy Institut Gustave-Roussy, CNRS, UMR8200, Villejuif, France ∗ Auteur correspondant. Adresse e-mail : [email protected] (C. Buffet) La mutation BRAFV600E contribue à l’agressivité des cancers papillaires de la thyroïde (CPT) avec une inhibition de l’expression du symporteur de l’iode (NIS), essentiel pour le traitement des patients par irathérapie. Nos données récentes montrent que l’inactivation de la NADPH oxydase NOX4, enzyme générant des espèces réactives de l’oxygène (ROS), entraîne une réexpression du NIS dans des lignées humaines de CPT mutées BRAFV600E. La réversibilité de l’inhibition suggère l’existence de mécanismes épigénétiques contrôlant l’expression du gène sous le contrôle de NOX4. Notre hypothèse est que NOX4 induit des dommages à l’ADN à l’origine du recrutement au promoteur du NIS d’un complexe de silenc¸age contenant des ADN methyltransferases (DNMT) et des histone deacetylases (HDAC). Nous montrons qu’un traitement par H202 entraîne un enrichissement à la chromatine de DNMT1 dans la lignée CPT mutée BRAFV600E (BCPAP). Ce recrutement diminue après traitement par des antioxydants. L’inactivation de NOX4 par siRNA diminue l’expression de DNMT1 à la chromatine. Nous avons précédemment démontré que NOX4 est un effecteur clé de la voie du TGFb, laquelle est contrôlée par BRAFV600E. Nous montrons que le TGFb, via les ROS, favorise cet enrichissement en DNMT1 dans la fraction chromatinienne. Par ailleurs, un inhibiteur spécifique d’HDAC nucléaire augmente fortement l’expression du NIS. Ceci est associé à une diminution de l’ARNm NOX4. Des expériences d’immunoprécipitation de chromatine (ChIP) à venir viendront compléter le rôle de DNMT1 et d’HDAC dans la régulation du NIS sous le contrôle de NOX4. Notre travail ouvre des perspectives de nouveaux outils diagnostiques et/ou pronostiques. Déclaration de liens d’intérêts d’intérêts.
Les auteurs déclarent ne pas avoir de liens
http://dx.doi.org/10.1016/j.ando.2017.07.002
L. Bessiène a,∗ , Dr S. Hescot b , L. Dumeige a , C. Lhadj a , Q.Y. Xuec c , Dr E. Pussard c , Pr M. Lombès a , Dr S. Viengchareun a , Dr L. Martinerie d a Inserm U1185, faculté de médecine Paris-Sud, université Paris-Saclay, Le Kremlin-Bicêtre, France b Service de cancérologie endocrinienne, Gustave-Roussy, Villejuif, France c Service de génétique moléculaire pharmacogénétique hormonologie, hôpitaux universitaires Paris-Sud, Le Kremlin-Bicêtre, France d Service d’endocrinologie pédiatrique, CHU Robert-Debré, AP–HP, Paris, France ∗ Auteur correspondant. Adresse e-mail : [email protected] (L. Bessiène) Objectif Le métabolisme des hormones glucocorticoïdes est sous la dépendance de la 11 b-hydroxystéroïde déshydrogénase de type 2 (11HSD2) d’expression principalement rénale, qui transforme le cortisol en cortisone (composé inactif), et la 11bHDS1, ubiquitaire, qui catalyse la réaction inverse. Certains patients de réanimation présentent une insuffisance thyréotrope (syndrome basse T3) et un hypercortisolisme par diminution du métabolisme du cortisol en cortisone. Une étude a montré une corrélation inverse entre ces deux paramètres chez ces patients après correction de l’hypothyroïdie. L’objectif de cette étude est de démontrer un effet direct des hormones thyroïdiennes (T3) sur la régulation de la 11HSD2 rénale, hypothèse renforcée par l’existence de motifs thyroid response elements (TRE) dans le promoteur du gène Hsd11b2. Méthodes Utilisation de 3 modèles complémentaires : cellules tubulaires rénales murines KC3AC1, souris en hyperthyroïdie, en hypothyroïdie ou en euthyroïdie, et patients en hyperthyroïdie et en hypothyroïdie. Résultats L’expression de la 11HSD2, mesurée par RT-PCR quantitative, est significativement augmentée (× 2) dans les cellules KC3AC1 après 6 h de traitement par la T3. L’actinomycine D, un inhibiteur de la transcription, inhibe cet effet, confirmant le mécanisme transcriptionnel de cette régulation. L’expression protéique de la 11HSD2 est augmentée après 24 h de traitement par la T3 (Western blot), ainsi que son activité. Ces résultats ont été confirmés in vivo chez la souris et nous sommes en train d’analyser les résultats chez l’homme. Discussion Nos résultats suggèrent l’existence d’un effet direct transcriptionnel des hormones thyroïdiennes sur la régulation de la 11HSD2 rénale. Déclaration de liens d’intérêts d’intérêts.
Les auteurs déclarent ne pas avoir de liens
http://dx.doi.org/10.1016/j.ando.2017.07.003
夽 Résumés présentés lors du 34e Congrès de la Société franc ¸ aise d’endocrinologie Poitiers 2017.
0003-4266/$ — see front matter
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Thyroïde 1夽
CO-001
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Rôle de la NADPH oxydase 4 (NOX4) dans la répression de l’expression du transporteur de l’iode (NIS) dans les cancers papillaires de la thyroïde porteurs de la mutation BRAFV600E
Nouvelle action des hormones thyroïdiennes : régulation du métabolisme des glucocorticoïdes
Dr C. Buffet ∗ , J. Cazarin De Menezes , Dr L. Barde , R. Corre , F. Hecht , Dr R. Andrade Louzada Neto , Dr A. Al Ghuzlan , Dr D. Hartl , Dr S. Leboulleux , Pr M. Schlumberger , Dr C. Dupuy Institut Gustave-Roussy, CNRS, UMR8200, Villejuif, France ∗ Auteur correspondant. Adresse e-mail : [email protected] (C. Buffet) La mutation BRAFV600E contribue à l’agressivité des cancers papillaires de la thyroïde (CPT) avec une inhibition de l’expression du symporteur de l’iode (NIS), essentiel pour le traitement des patients par irathérapie. Nos données récentes montrent que l’inactivation de la NADPH oxydase NOX4, enzyme générant des espèces réactives de l’oxygène (ROS), entraîne une réexpression du NIS dans des lignées humaines de CPT mutées BRAFV600E. La réversibilité de l’inhibition suggère l’existence de mécanismes épigénétiques contrôlant l’expression du gène sous le contrôle de NOX4. Notre hypothèse est que NOX4 induit des dommages à l’ADN à l’origine du recrutement au promoteur du NIS d’un complexe de silenc¸age contenant des ADN methyltransferases (DNMT) et des histone deacetylases (HDAC). Nous montrons qu’un traitement par H202 entraîne un enrichissement à la chromatine de DNMT1 dans la lignée CPT mutée BRAFV600E (BCPAP). Ce recrutement diminue après traitement par des antioxydants. L’inactivation de NOX4 par siRNA diminue l’expression de DNMT1 à la chromatine. Nous avons précédemment démontré que NOX4 est un effecteur clé de la voie du TGFb, laquelle est contrôlée par BRAFV600E. Nous montrons que le TGFb, via les ROS, favorise cet enrichissement en DNMT1 dans la fraction chromatinienne. Par ailleurs, un inhibiteur spécifique d’HDAC nucléaire augmente fortement l’expression du NIS. Ceci est associé à une diminution de l’ARNm NOX4. Des expériences d’immunoprécipitation de chromatine (ChIP) à venir viendront compléter le rôle de DNMT1 et d’HDAC dans la régulation du NIS sous le contrôle de NOX4. Notre travail ouvre des perspectives de nouveaux outils diagnostiques et/ou pronostiques. Déclaration de liens d’intérêts d’intérêts.
Les auteurs déclarent ne pas avoir de liens
http://dx.doi.org/10.1016/j.ando.2017.07.002
L. Bessiène a,∗ , Dr S. Hescot b , L. Dumeige a , C. Lhadj a , Q.Y. Xuec c , Dr E. Pussard c , Pr M. Lombès a , Dr S. Viengchareun a , Dr L. Martinerie d a Inserm U1185, faculté de médecine Paris-Sud, université Paris-Saclay, Le Kremlin-Bicêtre, France b Service de cancérologie endocrinienne, Gustave-Roussy, Villejuif, France c Service de génétique moléculaire pharmacogénétique hormonologie, hôpitaux universitaires Paris-Sud, Le Kremlin-Bicêtre, France d Service d’endocrinologie pédiatrique, CHU Robert-Debré, AP–HP, Paris, France ∗ Auteur correspondant. Adresse e-mail : [email protected] (L. Bessiène) Objectif Le métabolisme des hormones glucocorticoïdes est sous la dépendance de la 11 b-hydroxystéroïde déshydrogénase de type 2 (11HSD2) d’expression principalement rénale, qui transforme le cortisol en cortisone (composé inactif), et la 11bHDS1, ubiquitaire, qui catalyse la réaction inverse. Certains patients de réanimation présentent une insuffisance thyréotrope (syndrome basse T3) et un hypercortisolisme par diminution du métabolisme du cortisol en cortisone. Une étude a montré une corrélation inverse entre ces deux paramètres chez ces patients après correction de l’hypothyroïdie. L’objectif de cette étude est de démontrer un effet direct des hormones thyroïdiennes (T3) sur la régulation de la 11HSD2 rénale, hypothèse renforcée par l’existence de motifs thyroid response elements (TRE) dans le promoteur du gène Hsd11b2. Méthodes Utilisation de 3 modèles complémentaires : cellules tubulaires rénales murines KC3AC1, souris en hyperthyroïdie, en hypothyroïdie ou en euthyroïdie, et patients en hyperthyroïdie et en hypothyroïdie. Résultats L’expression de la 11HSD2, mesurée par RT-PCR quantitative, est significativement augmentée (× 2) dans les cellules KC3AC1 après 6 h de traitement par la T3. L’actinomycine D, un inhibiteur de la transcription, inhibe cet effet, confirmant le mécanisme transcriptionnel de cette régulation. L’expression protéique de la 11HSD2 est augmentée après 24 h de traitement par la T3 (Western blot), ainsi que son activité. Ces résultats ont été confirmés in vivo chez la souris et nous sommes en train d’analyser les résultats chez l’homme. Discussion Nos résultats suggèrent l’existence d’un effet direct transcriptionnel des hormones thyroïdiennes sur la régulation de la 11HSD2 rénale. Déclaration de liens d’intérêts d’intérêts.
Les auteurs déclarent ne pas avoir de liens
http://dx.doi.org/10.1016/j.ando.2017.07.003
夽 Résumés présentés lors du 34e Congrès de la Société franc ¸ aise d’endocrinologie Poitiers 2017.
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