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R63: Large spectre de mutations de PAX5 dans les LAL-B (V2)
6es Journées du Cancéropôle Grand Sud-Ouest
Stromales Gastrointestinales (GIST), des carcinomes mammaires et des lymphomes. L’application de cette signature permettrait une meilleure sélection des patients à risque et ainsi une amélioration du pronostic individuel.
R61 - Oral Fonction de la protéine FANCM dans la réponse au stress réplicatif Gari K.1, Luke-Glaser S.2, Luke B.2, Décaillet C.3, Constantinou A.4 1 London Research Institute, Cancer Research UK, Clare Hall, South Mimms, UK ; 2ZMBH, Heidelberg, Germany ; 3Department of Biochemistry, University of Lausanne, Switzerland ; 4 Institut de Génétique Humaine, CNRS UPR 1142, Montpellier
L’
anémie de Fanconi est une maladie autosomale récessive. Les manifestations cliniques de cette maladie comprennent des anomalies congénitales, un déficit sévère de la moelle osseuse, ainsi qu’une forte prédisposition à développer des cancers. À ce jour, 13 protéines impliquées dans l’anémie de Fanconi ont été identifiées. Ces protéines jouent un rôle clé dans la réponse aux lésions de l’ADN durant la phase de synthèse du cycle cellulaire. Cette présentation sera focalisée sur la fonction de la protéine FANCM, une translocase ATP dépendante. Nous observons que FANCM présente une forte affinité pour des structures transitoires qui apparaissent durant la réplication et la réparation de l’ADN. FANCM est notamment capable de remodeler des structures synthétiques imitant une fourche de réplication. Afin de mesurer l’impact de FANCM sur la dynamique de la réplication, nous avons utilisé une approche de peignage moléculaire, qui nous permet de pister les fourches de réplication au niveau de la molécule isolée. Nous avons ainsi pu montrer que FANCM facilite la progression des fourches de réplication suite à une exposition des cellules aux UV ou à la camptothécine, c’est-à-dire des agents qui endommagent l’ADN. Nous montrons également que FANCM prévient la formation d’ADN simple brin qui s’accumule dans les régions intrinsèquement difficiles à répliquer, par exemple au niveau des télomères. En conclusion, nous proposons le modèle suivant : FANCM reconnaît et remodèle les fourches de réplication bloquées par des obstacles sur la matrice d’ADN, favorisant l’assemblage de complexes multiprotéiques impliqués dans la signalisation des lésions et leur réparation, permettant ainsi au réplisome de surmonter ces obstacles. Comme la majorité des traitements radio et chimio thérapeutiques prennent pour cible l’ADN, il est possible que l’activité de FANCM joue un rôle dans la réponse des cellules tumorales à ces traitements.
R62 - Oral L’ATPase p400 module le devenir cellulaire via la régulation de l’homéostasie des ROS Courilleau C.1*, Mattera L.1*, Legube G.1, Ueda T.3, Fukunaga R.2, Chevillard-Briet M.1, Canitrot Y.1#, Escaffit F.1#, Trouche D.1 1
Laboratoire de Biologie Cellulaire et Moléculaire du Contrôle de la Prolifération (LBCMCP), CNRS and Université de Toulouse, 31062-Toulouse, France ; 2Department of Medical Chemistry, Graduate School of Medicine, Kyoto University, Japan ; 3Campbell Family Institute for Breast Cancer Research, Princess Margaret Hospital, Toronto, Ontario, Canada *, # These authors contributed equally to this work.
L’
ATPase p400 est une protéine responsable de l’incorporation d’H2AZ au niveau de promoteurs spécifiques. Par ce mécanisme, elle contrôle la transcrip-
Bull Cancer vol. 97, supplément 4, octobre 2010
tion et joue un rôle dans le devenir cellulaire. Il permet la progression cellulaire et inhibe l’induction de l’apoptose ou de la sénescence. Dans notre étude, nous montrons que l’expression de p400 est nécessaire pour le contrôle du métabolisme des ROS. En effet, l’inhibition de l’expression de p400 augmente le niveau de radicaux libres intracellulaires et cause des dommages à l’ADN. Ceci montre que p400 maintient le stress oxydatif en dessous d’un seuil afin qu’ils ne produisent pas de dommages à l’ADN. La suppression de la voie des dommages à l’ADN grâce au siRNA dirigé contre ATM inhibe les effets observés en absence de p400 (arrêt du cycle cellulaire, apoptose ou sénescence). Cela démontre l’importance de la voie des dommages à l’ADN dans les devenirs cellulaires contrôlés par p400. Enfin, nous avons montré que les effets de p400 sont dépendants de la régulation transcriptionnelle de gènes spécifiques, comme HSP70 et FancA, et peuvent aussi impliquer une boucle de rétrocontrôle positif entre le stress oxydatif et les cassures de l’ADN. En effet, nous avons montré que les cassures persistantes de l’ADN sont suffisantes pour induire du stress oxydatif. Nos résultats montrent donc un lien entre p400 et le métabolisme des ROS. De plus, ils nous ont permis de comprendre les mécanismes moléculaires responsables du contrôle de la prolifération cellulaire par p400.
R63 Large spectre de mutations de PAX5 dans les LAL-B (V2) Coyaud E.1, Struski S.2, Prade N.1, Familiades J.1, Delabesse E.1, 2, Dastugue N.1, 2, Brousset P.1, 3, Broccardo C.1 1 Inserm U563, Centre de Physiopathologie de Toulouse Purpan ; 2CHU Toulouse Purpan, Service d’Hématologie ; 3CHU de Toulouse Purpan, Service d’Anatomie et de Cytologie Pathologiques
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e facteur de transcription PAX5 est essentiel à la lymphopoïèse B. Il est responsable de l’avancement de la différenciation du stade pro-B au stade B mature où son expression s’éteint pour permettre la différenciation plasmocytaire. Sur un plan pathologique, PAX5 est le gène le plus fréquemment altéré dans les LAL-B (leucémies aiguës lymphoblastiques B, près de 40 % des cas). Ces altérations peuvent être de diverses sortes : délétion d’un allèle ou d’une partie de sa séquence, mutations ponctuelles ou fusion avec d’autres gènes par le biais de translocations chromosomiques. Notre projet a porté sur l’étude des réarrangements de PAX5 (locus 9p13) dans une cohorte de 153 patients (du Groupe Francophone de Cytogénétique Hématologique) porteurs d’un remaniement chromosomique en 9p13 et d’une LAL-B. Ainsi, nous avons mis en évidence des profils particuliers d’associations du statut mutationnel de PAX5 avec d’autres altérations chromosomiques récurrentes dans les LAL-B. Nous avons également développé une stratégie de Rolling Circle Amplification-RACE pour rechercher d’éventuels transcrits de fusions chez les patients porteurs de points de cassures internes au gène PAX5. Cette étude a permis de décrire de nouveaux partenaires de fusions de PAX5 tels que NCoR1, GOLGA6, DACH2 ou encore TAOK1. Nous avons également mis en évidence l’existence d’une forme tronquée récurrente de PAX5 chez 5 patients. Des tests rapporteurs d’activité transcriptionnelle nous ont permis de montrer l’effet inhibiteur des mutants PAX5-NCoR1 et PAX5 tronqué sur PAX5 sauvage (Blood 2010). De plus, nous procédons à la caractérisation des propriétés oncogéniques
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6es Journées du Cancéropôle Grand Sud-Ouest
de différents mutants par l’utilisation d’un modèle ex vivo de différenciation B murin inductible par privation en IL7. Des résultats préliminaires nous permettent d’associer les mutants de PAX5 à des caractères oncogéniques. Ces travaux visent à mieux comprendre les mécanismes impliqués lors de la leucémogenèse B.
R64 H2AZ/TIP49b Interconnection and estrogen regulation Dalvai M., Bellucci L., Kocanova S., Eeckhoute J., Lavigne AC., Bystricky K. Laboratoire de Biologie Moléculaire Eucaryote (LBME) CNRS, UMR5099, Bâtiment IBCG 118, route de Narbonne, F-31062 Toulouse Cedex 9, France
L’
incorporation de variants d’histones sur des sites stratégiques au sein du génome joue un rôle clé dans la structure chromatinienne et sa fonction. H2A.Z est un variant de l’histone canonique H2A. Il est principalement impliqué dans l’induction de modifications locales de la structure de la chromatine et ainsi dans les processus de régulation de l’expression des gènes. Cependant, sa fonction exacte dans les processus de transcription n’est pas bien définie. Notre objectif est de décrypter les liens qui existent entre le récepteur des oestrogènes (ERalpha), la régulation des gènes cibles, la mobilisation différentielle de H2A.Z sur ces gènes et leur dynamique nucléaire. Nos travaux montrent des différences importantes dans le recrutement de H2A.Z aux promoteurs de gènes cibles œstrogéno-régulés comme PGR, pS2/TFF1 ou CCND1. Sur le promoteur pS2/TFF1 nous avons détecté un enrichissement de H2A.Z, tandis que dans les mêmes conditions d’induction, la liaison de H2A.Z a été réduite sur le promoteur de PGR ou de CCND1. Nous observons également des variations de l’acétylation de H2AZ suivant le temps d’induction et le gène étudié. Nous avons montré l’implication de H2AZ dans les variations de l’expression de ces gènes après un traitement à l’oestradiol par l’utilisation de siRNA dirigés contre H2AZ. Le complexe p400/Tip60 a été identifié comme pouvant acétyler H2AZ et pouvant potentiellement incorporer ce variant d’histone. Tip49b, une ATPase trouvé au sein de ce complexe pourrait faciliter l’echange H2A/H2AZ. Par une approche de siRNA nous avons montré le rôle important de Tip49b dans la régulation de ces gènes, en particulier du gène codant pour la cycline D1.
R65 L’activation de la protéine kinase ATR contrôle l’accumulation hypoxique du complexe HIF-1 : une nouvelle cible pour inhiber l’adaptation des cellules tumorales à l’hypoxie ? Fallone F.1, 2, Botanch C.1, Muller C.1, 2 1
Team Microenvironment, Cancer and Adipocytes (MICA), Institute of Pharmacology and Structural Biology CNRS UMR 5089, Toulouse, France ; 2Université de Toulouse, France
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es cellules tumorales capables de s’adapter à l’hypoxie contribuent à la progression tumorale car elles présentent
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des capacités métastatiques augmentées ainsi qu’une résistance aux thérapeutiques antitumorales. Le facteur central permettant cette adaptation est le facteur de transcription HIF-1 (pour Hypoxia Inducible Factor 1), composé des sousunités HIF-1alpha et HIF-1beta. L’expression de HIF-1b est constitutive alors que l’expression de HIF-1a est régulée par la concentration cellulaire en oxygène. Des travaux récents montrent que l’hypoxie induit des modifications de l’ADN capable d’activer une réponse aux dommages impliquant la famille des Phosphatidyl Inositol-3 Kinase like Kinase (PI3KKs). La protéine ATR (Ataxia Telangiectasia and Rad3 related protein) fait partie des PI3KKs activées en hypoxie. En effet, l’hypoxie induit un stress réplicatif et ATR joue un rôle majeur dans la signalisation de ce stress. Dans tous les modèles étudiés, nous montrons que l’hypoxie (0,1 % O2) conduit à une activation précoce d’ATR. L’absence d’expression ou l’inhibition de l’activité kinase d’ATR conduit à une diminution majeure de l’accumulation hypoxique des deux sous-unités de HIF-1, HIF-1a et HIF-1b. Ces résultats ont été obtenus : (i) dans des cellules ou l’expression d’ATR est régulée négativement par une approche SiRNA ; (ii) dans des cellules exprimant une forme inactive d’ATR (U2OS Kinase-Dead) ; (iii) à l’aide d’un inhibiteur pharmacologique de l’activité kinase d’ATR, le CGK733. Le, ou les, mécanismes moléculaires impliqués sont en cours de caractérisation mais semblent impliquer la biosynthèse de HIF-1. L’inhibition de l’activité kinase d’ATR conduit à une diminution majeure de l’expression des cibles de HIF-1 telles que CaIX ou GLUT-1. En conclusion, nous avons mis en évidence une nouvelle voie de régulation de l’expression de HIF-1 par la protéine ATR, soulignant l’importance de la réponse aux dommages de l’ADN dans l’adaptation cellulaire à l’hypoxie.
R66 Rôle de l’ADN polymérase thêta dans le maintien de l’intégrité du génome en absence de stress exogène Fernandez-Vidal A.1,2, Magdeleine E.1,2, Wood RD.3, Cazaux C.1,2, Hoffmann JS.1,2 1 CNRS, IPBS (Institute of Pharmacology and Structural Biology), 205, route de Narbonne, F-31077 Toulouse, France ; 2University of Toulouse, UPS, F-31077 Toulouse, France ; 3University of Texas, M. D. Anderson Cancer Center, Smithville, TX 78957 [email protected]
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otre laboratoire a récemment pu mettre en évidence que contrairement à l’ensemble des ADN polymérases, Pol Thêta est la seule surexprimée dans le cancer du colon (Pillaire et al., Oncogene 2010) et du sein (Lemée et al., PNAS, sous presse). De plus, sa surexpression est associée à un mauvais pronostic, identifiant pour la première fois une ADN polymérase comme nouveau marqueur pronostic dans le cancer du sein. D’un point de vue moléculaire, nous avons montré que l’augmentation de son taux intracellulaire perturbe le programme de réplication (stress réplicatif) conduisant à des cassures et des aberrations chromosomiques (Lemée et al., PNAS, sous presse). Pol thêta est une des dernières ADN polymérases identifiée et elle est classée dans la famille A des ADN polymérases.
Bull Cancer vol. 97, supplément 4, octobre 2010
Stromales Gastrointestinales (GIST), des carcinomes mammaires et des lymphomes. L’application de cette signature permettrait une meilleure sélection des patients à risque et ainsi une amélioration du pronostic individuel.
R61 - Oral Fonction de la protéine FANCM dans la réponse au stress réplicatif Gari K.1, Luke-Glaser S.2, Luke B.2, Décaillet C.3, Constantinou A.4 1 London Research Institute, Cancer Research UK, Clare Hall, South Mimms, UK ; 2ZMBH, Heidelberg, Germany ; 3Department of Biochemistry, University of Lausanne, Switzerland ; 4 Institut de Génétique Humaine, CNRS UPR 1142, Montpellier
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anémie de Fanconi est une maladie autosomale récessive. Les manifestations cliniques de cette maladie comprennent des anomalies congénitales, un déficit sévère de la moelle osseuse, ainsi qu’une forte prédisposition à développer des cancers. À ce jour, 13 protéines impliquées dans l’anémie de Fanconi ont été identifiées. Ces protéines jouent un rôle clé dans la réponse aux lésions de l’ADN durant la phase de synthèse du cycle cellulaire. Cette présentation sera focalisée sur la fonction de la protéine FANCM, une translocase ATP dépendante. Nous observons que FANCM présente une forte affinité pour des structures transitoires qui apparaissent durant la réplication et la réparation de l’ADN. FANCM est notamment capable de remodeler des structures synthétiques imitant une fourche de réplication. Afin de mesurer l’impact de FANCM sur la dynamique de la réplication, nous avons utilisé une approche de peignage moléculaire, qui nous permet de pister les fourches de réplication au niveau de la molécule isolée. Nous avons ainsi pu montrer que FANCM facilite la progression des fourches de réplication suite à une exposition des cellules aux UV ou à la camptothécine, c’est-à-dire des agents qui endommagent l’ADN. Nous montrons également que FANCM prévient la formation d’ADN simple brin qui s’accumule dans les régions intrinsèquement difficiles à répliquer, par exemple au niveau des télomères. En conclusion, nous proposons le modèle suivant : FANCM reconnaît et remodèle les fourches de réplication bloquées par des obstacles sur la matrice d’ADN, favorisant l’assemblage de complexes multiprotéiques impliqués dans la signalisation des lésions et leur réparation, permettant ainsi au réplisome de surmonter ces obstacles. Comme la majorité des traitements radio et chimio thérapeutiques prennent pour cible l’ADN, il est possible que l’activité de FANCM joue un rôle dans la réponse des cellules tumorales à ces traitements.
R62 - Oral L’ATPase p400 module le devenir cellulaire via la régulation de l’homéostasie des ROS Courilleau C.1*, Mattera L.1*, Legube G.1, Ueda T.3, Fukunaga R.2, Chevillard-Briet M.1, Canitrot Y.1#, Escaffit F.1#, Trouche D.1 1
Laboratoire de Biologie Cellulaire et Moléculaire du Contrôle de la Prolifération (LBCMCP), CNRS and Université de Toulouse, 31062-Toulouse, France ; 2Department of Medical Chemistry, Graduate School of Medicine, Kyoto University, Japan ; 3Campbell Family Institute for Breast Cancer Research, Princess Margaret Hospital, Toronto, Ontario, Canada *, # These authors contributed equally to this work.
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ATPase p400 est une protéine responsable de l’incorporation d’H2AZ au niveau de promoteurs spécifiques. Par ce mécanisme, elle contrôle la transcrip-
Bull Cancer vol. 97, supplément 4, octobre 2010
tion et joue un rôle dans le devenir cellulaire. Il permet la progression cellulaire et inhibe l’induction de l’apoptose ou de la sénescence. Dans notre étude, nous montrons que l’expression de p400 est nécessaire pour le contrôle du métabolisme des ROS. En effet, l’inhibition de l’expression de p400 augmente le niveau de radicaux libres intracellulaires et cause des dommages à l’ADN. Ceci montre que p400 maintient le stress oxydatif en dessous d’un seuil afin qu’ils ne produisent pas de dommages à l’ADN. La suppression de la voie des dommages à l’ADN grâce au siRNA dirigé contre ATM inhibe les effets observés en absence de p400 (arrêt du cycle cellulaire, apoptose ou sénescence). Cela démontre l’importance de la voie des dommages à l’ADN dans les devenirs cellulaires contrôlés par p400. Enfin, nous avons montré que les effets de p400 sont dépendants de la régulation transcriptionnelle de gènes spécifiques, comme HSP70 et FancA, et peuvent aussi impliquer une boucle de rétrocontrôle positif entre le stress oxydatif et les cassures de l’ADN. En effet, nous avons montré que les cassures persistantes de l’ADN sont suffisantes pour induire du stress oxydatif. Nos résultats montrent donc un lien entre p400 et le métabolisme des ROS. De plus, ils nous ont permis de comprendre les mécanismes moléculaires responsables du contrôle de la prolifération cellulaire par p400.
R63 Large spectre de mutations de PAX5 dans les LAL-B (V2) Coyaud E.1, Struski S.2, Prade N.1, Familiades J.1, Delabesse E.1, 2, Dastugue N.1, 2, Brousset P.1, 3, Broccardo C.1 1 Inserm U563, Centre de Physiopathologie de Toulouse Purpan ; 2CHU Toulouse Purpan, Service d’Hématologie ; 3CHU de Toulouse Purpan, Service d’Anatomie et de Cytologie Pathologiques
L
e facteur de transcription PAX5 est essentiel à la lymphopoïèse B. Il est responsable de l’avancement de la différenciation du stade pro-B au stade B mature où son expression s’éteint pour permettre la différenciation plasmocytaire. Sur un plan pathologique, PAX5 est le gène le plus fréquemment altéré dans les LAL-B (leucémies aiguës lymphoblastiques B, près de 40 % des cas). Ces altérations peuvent être de diverses sortes : délétion d’un allèle ou d’une partie de sa séquence, mutations ponctuelles ou fusion avec d’autres gènes par le biais de translocations chromosomiques. Notre projet a porté sur l’étude des réarrangements de PAX5 (locus 9p13) dans une cohorte de 153 patients (du Groupe Francophone de Cytogénétique Hématologique) porteurs d’un remaniement chromosomique en 9p13 et d’une LAL-B. Ainsi, nous avons mis en évidence des profils particuliers d’associations du statut mutationnel de PAX5 avec d’autres altérations chromosomiques récurrentes dans les LAL-B. Nous avons également développé une stratégie de Rolling Circle Amplification-RACE pour rechercher d’éventuels transcrits de fusions chez les patients porteurs de points de cassures internes au gène PAX5. Cette étude a permis de décrire de nouveaux partenaires de fusions de PAX5 tels que NCoR1, GOLGA6, DACH2 ou encore TAOK1. Nous avons également mis en évidence l’existence d’une forme tronquée récurrente de PAX5 chez 5 patients. Des tests rapporteurs d’activité transcriptionnelle nous ont permis de montrer l’effet inhibiteur des mutants PAX5-NCoR1 et PAX5 tronqué sur PAX5 sauvage (Blood 2010). De plus, nous procédons à la caractérisation des propriétés oncogéniques
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6es Journées du Cancéropôle Grand Sud-Ouest
de différents mutants par l’utilisation d’un modèle ex vivo de différenciation B murin inductible par privation en IL7. Des résultats préliminaires nous permettent d’associer les mutants de PAX5 à des caractères oncogéniques. Ces travaux visent à mieux comprendre les mécanismes impliqués lors de la leucémogenèse B.
R64 H2AZ/TIP49b Interconnection and estrogen regulation Dalvai M., Bellucci L., Kocanova S., Eeckhoute J., Lavigne AC., Bystricky K. Laboratoire de Biologie Moléculaire Eucaryote (LBME) CNRS, UMR5099, Bâtiment IBCG 118, route de Narbonne, F-31062 Toulouse Cedex 9, France
L’
incorporation de variants d’histones sur des sites stratégiques au sein du génome joue un rôle clé dans la structure chromatinienne et sa fonction. H2A.Z est un variant de l’histone canonique H2A. Il est principalement impliqué dans l’induction de modifications locales de la structure de la chromatine et ainsi dans les processus de régulation de l’expression des gènes. Cependant, sa fonction exacte dans les processus de transcription n’est pas bien définie. Notre objectif est de décrypter les liens qui existent entre le récepteur des oestrogènes (ERalpha), la régulation des gènes cibles, la mobilisation différentielle de H2A.Z sur ces gènes et leur dynamique nucléaire. Nos travaux montrent des différences importantes dans le recrutement de H2A.Z aux promoteurs de gènes cibles œstrogéno-régulés comme PGR, pS2/TFF1 ou CCND1. Sur le promoteur pS2/TFF1 nous avons détecté un enrichissement de H2A.Z, tandis que dans les mêmes conditions d’induction, la liaison de H2A.Z a été réduite sur le promoteur de PGR ou de CCND1. Nous observons également des variations de l’acétylation de H2AZ suivant le temps d’induction et le gène étudié. Nous avons montré l’implication de H2AZ dans les variations de l’expression de ces gènes après un traitement à l’oestradiol par l’utilisation de siRNA dirigés contre H2AZ. Le complexe p400/Tip60 a été identifié comme pouvant acétyler H2AZ et pouvant potentiellement incorporer ce variant d’histone. Tip49b, une ATPase trouvé au sein de ce complexe pourrait faciliter l’echange H2A/H2AZ. Par une approche de siRNA nous avons montré le rôle important de Tip49b dans la régulation de ces gènes, en particulier du gène codant pour la cycline D1.
R65 L’activation de la protéine kinase ATR contrôle l’accumulation hypoxique du complexe HIF-1 : une nouvelle cible pour inhiber l’adaptation des cellules tumorales à l’hypoxie ? Fallone F.1, 2, Botanch C.1, Muller C.1, 2 1
Team Microenvironment, Cancer and Adipocytes (MICA), Institute of Pharmacology and Structural Biology CNRS UMR 5089, Toulouse, France ; 2Université de Toulouse, France
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es cellules tumorales capables de s’adapter à l’hypoxie contribuent à la progression tumorale car elles présentent
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des capacités métastatiques augmentées ainsi qu’une résistance aux thérapeutiques antitumorales. Le facteur central permettant cette adaptation est le facteur de transcription HIF-1 (pour Hypoxia Inducible Factor 1), composé des sousunités HIF-1alpha et HIF-1beta. L’expression de HIF-1b est constitutive alors que l’expression de HIF-1a est régulée par la concentration cellulaire en oxygène. Des travaux récents montrent que l’hypoxie induit des modifications de l’ADN capable d’activer une réponse aux dommages impliquant la famille des Phosphatidyl Inositol-3 Kinase like Kinase (PI3KKs). La protéine ATR (Ataxia Telangiectasia and Rad3 related protein) fait partie des PI3KKs activées en hypoxie. En effet, l’hypoxie induit un stress réplicatif et ATR joue un rôle majeur dans la signalisation de ce stress. Dans tous les modèles étudiés, nous montrons que l’hypoxie (0,1 % O2) conduit à une activation précoce d’ATR. L’absence d’expression ou l’inhibition de l’activité kinase d’ATR conduit à une diminution majeure de l’accumulation hypoxique des deux sous-unités de HIF-1, HIF-1a et HIF-1b. Ces résultats ont été obtenus : (i) dans des cellules ou l’expression d’ATR est régulée négativement par une approche SiRNA ; (ii) dans des cellules exprimant une forme inactive d’ATR (U2OS Kinase-Dead) ; (iii) à l’aide d’un inhibiteur pharmacologique de l’activité kinase d’ATR, le CGK733. Le, ou les, mécanismes moléculaires impliqués sont en cours de caractérisation mais semblent impliquer la biosynthèse de HIF-1. L’inhibition de l’activité kinase d’ATR conduit à une diminution majeure de l’expression des cibles de HIF-1 telles que CaIX ou GLUT-1. En conclusion, nous avons mis en évidence une nouvelle voie de régulation de l’expression de HIF-1 par la protéine ATR, soulignant l’importance de la réponse aux dommages de l’ADN dans l’adaptation cellulaire à l’hypoxie.
R66 Rôle de l’ADN polymérase thêta dans le maintien de l’intégrité du génome en absence de stress exogène Fernandez-Vidal A.1,2, Magdeleine E.1,2, Wood RD.3, Cazaux C.1,2, Hoffmann JS.1,2 1 CNRS, IPBS (Institute of Pharmacology and Structural Biology), 205, route de Narbonne, F-31077 Toulouse, France ; 2University of Toulouse, UPS, F-31077 Toulouse, France ; 3University of Texas, M. D. Anderson Cancer Center, Smithville, TX 78957 [email protected]
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otre laboratoire a récemment pu mettre en évidence que contrairement à l’ensemble des ADN polymérases, Pol Thêta est la seule surexprimée dans le cancer du colon (Pillaire et al., Oncogene 2010) et du sein (Lemée et al., PNAS, sous presse). De plus, sa surexpression est associée à un mauvais pronostic, identifiant pour la première fois une ADN polymérase comme nouveau marqueur pronostic dans le cancer du sein. D’un point de vue moléculaire, nous avons montré que l’augmentation de son taux intracellulaire perturbe le programme de réplication (stress réplicatif) conduisant à des cassures et des aberrations chromosomiques (Lemée et al., PNAS, sous presse). Pol thêta est une des dernières ADN polymérases identifiée et elle est classée dans la famille A des ADN polymérases.
Bull Cancer vol. 97, supplément 4, octobre 2010