- Email: [email protected]
Standaryzacja ilościowego oznaczania BCR-ABL za pomoca RQ-PCR w polskich Laboratoriach Biologii Molekularnej – stan aktualny
acta haematologica polonica 44s (2013) 66
Contents lists available at SciVerse ScienceDirect
Acta Haematologica Polonica journal homepage: www.elsevier.com/locate/achaem
Wystąpienia ustne/Oral presentations
SESJA – Standaryzacja w biologii molekularnej
Standaryzacja ilościowego oznaczania BCR-ABL za pomoca RQ-PCR w polskich Laboratoriach Biologii Molekularnej – stan aktualny T. Sacha *, M. Zawada, I. Florek, D. Link-Lenczowska, S. Czekalska, A.B. Skotnicki Katedra i Klinika Hematologii UJ CM w Krakowie, Polska *Autor prezentujący i do korespondencji. Adres email: [email protected]
Wstęp: Leczenie przewlekłej białaczki szpikowej (PBSz) inhibitorami kinaz tyrozynowych wymaga oceny jego skuteczności metodą RQ-PCR. Skomplikowana metodyka tego badania, wysoka czułość i duże ryzyko powstania nieprawidłowości wymaga przestrzegania określonych norm i zaleceń będących przedmiotem standaryzacji prowadzonej w polskich Laboratoriach Biologii Molekularnej koordynowanej przez ELN. Materiał i metody: Po zainicjowanych w 2005 r. rundach badań w kooperacji z laboratorium referencyjnym ELN w Mannheim i uzyskaniu przez Pracownię Biologii Molekularnej Kliniki Hematologii UJ CM w Krakowie wskaźnika korygującego (CF) rozpoczął się etap standaryzacji pozostałych Laboratoriów Biologii Molekularnych w Polsce. Pracownia w Krakowie analizowała przygotowane zestawy zaślepionych próbek zawierających serie 4 rozcieńczeń materiału pobranego od chorego na PBSz w chwili diagnozy w materiale pochodzącym od zdrowych dawców. Każda seria zawierała 3 powtórzenia każdego z rozcieńczeń. Dodatkowo, analizowano po dwie próbki zawierające materiał zdrowego dawcy w celu przetestowania metodyki izolacji materiału genetycznego RNA w 11 standaryzowanych laboratoriach. CF dla poddawanych standaryzacji laboratoriów obliczano na podstawie równania krzywej zależności pomiędzy wynikami uzyskanymi w laboratorium w Krakowie wyrażonymi w skali międzynarodowej a wynikami niepoddanymi konwersji w laboratoriach standaryzowanych. Od początku procesu standaryzacji chęć uczestnictwa w nim wyraziło 15 laboratoriów. Wyniki i wnioski: Wyniki rund standaryzacyjnych dla celów oznaczania większej odpowiedzi molekularnej (MR3) uzyskane w 9 spośród 11 uczestniczących laboratoriów pozwoliły na obliczenie CF umożliwiającego wyrażanie wyników w skali międzynarodowej [IS]. W toku standaryzacji w laboratorium w Krakowie przeszkolono pracowników 5 innych pracowni. Zadaniem kolejnego etapu będzie standaryzacja wyników MR4 i MR4,5. Kontynuacja standaryzacji jest niezbędna dla zapewnienia optymalnej jakości wykonywanych badań i wiarygodności wyników. http://dx.doi.org/10.1016/j.achaem.2013.07.282
0001-5814/$ – see front matter
Contents lists available at SciVerse ScienceDirect
Acta Haematologica Polonica journal homepage: www.elsevier.com/locate/achaem
Wystąpienia ustne/Oral presentations
SESJA – Standaryzacja w biologii molekularnej
Standaryzacja ilościowego oznaczania BCR-ABL za pomoca RQ-PCR w polskich Laboratoriach Biologii Molekularnej – stan aktualny T. Sacha *, M. Zawada, I. Florek, D. Link-Lenczowska, S. Czekalska, A.B. Skotnicki Katedra i Klinika Hematologii UJ CM w Krakowie, Polska *Autor prezentujący i do korespondencji. Adres email: [email protected]
Wstęp: Leczenie przewlekłej białaczki szpikowej (PBSz) inhibitorami kinaz tyrozynowych wymaga oceny jego skuteczności metodą RQ-PCR. Skomplikowana metodyka tego badania, wysoka czułość i duże ryzyko powstania nieprawidłowości wymaga przestrzegania określonych norm i zaleceń będących przedmiotem standaryzacji prowadzonej w polskich Laboratoriach Biologii Molekularnej koordynowanej przez ELN. Materiał i metody: Po zainicjowanych w 2005 r. rundach badań w kooperacji z laboratorium referencyjnym ELN w Mannheim i uzyskaniu przez Pracownię Biologii Molekularnej Kliniki Hematologii UJ CM w Krakowie wskaźnika korygującego (CF) rozpoczął się etap standaryzacji pozostałych Laboratoriów Biologii Molekularnych w Polsce. Pracownia w Krakowie analizowała przygotowane zestawy zaślepionych próbek zawierających serie 4 rozcieńczeń materiału pobranego od chorego na PBSz w chwili diagnozy w materiale pochodzącym od zdrowych dawców. Każda seria zawierała 3 powtórzenia każdego z rozcieńczeń. Dodatkowo, analizowano po dwie próbki zawierające materiał zdrowego dawcy w celu przetestowania metodyki izolacji materiału genetycznego RNA w 11 standaryzowanych laboratoriach. CF dla poddawanych standaryzacji laboratoriów obliczano na podstawie równania krzywej zależności pomiędzy wynikami uzyskanymi w laboratorium w Krakowie wyrażonymi w skali międzynarodowej a wynikami niepoddanymi konwersji w laboratoriach standaryzowanych. Od początku procesu standaryzacji chęć uczestnictwa w nim wyraziło 15 laboratoriów. Wyniki i wnioski: Wyniki rund standaryzacyjnych dla celów oznaczania większej odpowiedzi molekularnej (MR3) uzyskane w 9 spośród 11 uczestniczących laboratoriów pozwoliły na obliczenie CF umożliwiającego wyrażanie wyników w skali międzynarodowej [IS]. W toku standaryzacji w laboratorium w Krakowie przeszkolono pracowników 5 innych pracowni. Zadaniem kolejnego etapu będzie standaryzacja wyników MR4 i MR4,5. Kontynuacja standaryzacji jest niezbędna dla zapewnienia optymalnej jakości wykonywanych badań i wiarygodności wyników. http://dx.doi.org/10.1016/j.achaem.2013.07.282
0001-5814/$ – see front matter